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    重庆时时彩如何定胆码: 蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用.pdf

    关 键 词:
    多糖 制备 血糖 药物 保健品 中的 应用
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    摘要
    申请专利号:

    CN201510188397.6

    申请日:

    2015.04.21

    公开号:

    CN104771410A

    公开日:

    2015.07.15

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):A61K 31/715申请日:20150421|||公开
    IPC分类号: A61K31/715; A61P3/10; A23L1/30; C08B37/00 主分类号: A61K31/715
    申请人: 兰州大学
    发明人: 闵光宁; 闵光涛; 王利军
    地址: 730000甘肃省兰州市城关区天水南路222号
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201510188397.6

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2015.08.12|||2015.07.15

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种蕨麻多糖的新用途,具体涉及蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用。本发明研究表明,蕨麻多糖可以显著降低糖尿病模型小鼠的血糖,对糖尿病模型小鼠具有治疗作用,提示蕨麻多糖具有显著的降血糖作用,可在制备降血糖药物或保健品中应用;可在制备治疗糖尿病的药物中应用,亦可在制备辅助治疗糖尿病的保健品中应用。

    权利要求书

    1.  蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用。

    2.
      如权利要求1所述的蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用,其 特征是,所述的蕨麻多糖是由下述方法制备的:
    (1)称取干燥蕨麻,捣碎,加水,煎煮1.5h后,将水溶液过滤,重复3 次,将3次所得滤液合并,蒸发浓缩至1:1,得到浓缩液;
    (2)将(1)得到的浓缩液置容器中,加5倍量95%v/v的乙醇,低温静置 过夜,得到沉淀物;
    (3)将(2)得到的沉淀物离心,弃上清液,再依次分别加入无水乙醇、 丙酮、乙醚充分洗涤后离心,弃上清液,得到沉淀物;
    (4)挥去(3)得到的沉淀物中的乙醚,即得蕨麻多糖。

    3.
      蕨麻多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。

    4.
      如权利要求3所述的蕨麻多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用,其特征 是,所述的蕨麻多糖是由下述方法制备的:
    (1)称取干燥蕨麻,捣碎,加水,煎煮1.5h后,将水溶液过滤,重复3 次,将3次所得滤液合并,蒸发浓缩至1:1,得到浓缩液;
    (2)将(1)得到的浓缩液置容器中,加5倍量95%v/v的乙醇,低温静置 过夜,得到沉淀物;
    (3)将(2)得到的沉淀物离心,弃上清液,再依次分别加入无水乙醇、 丙酮、乙醚充分洗涤后离心,弃上清液,得到沉淀物;
    (4)挥去(3)得到的沉淀物中的乙醚,即得蕨麻多糖。

    5.
      蕨麻多糖在制备辅助治疗糖尿病保健品中的应用。

    6.
      如权利要求5所述的蕨麻多糖在制备辅助治疗糖尿病保健品中的应用, 其特征是,所述的蕨麻多糖是由下述方法制备的:
    (1)称取干燥蕨麻,捣碎,加水,煎煮1.5h后,将水溶液过滤,重复3 次,将3次所得滤液合并,蒸发浓缩至1:1,得到浓缩液;
    (2)将(1)得到的浓缩液置容器中,加5倍量95%v/v的乙醇,低温静置 过夜,得到沉淀物;
    (3)将(2)得到的沉淀物离心,弃上清液,再依次分别加入无水乙醇、 丙酮、乙醚充分洗涤后离心,弃上清液,得到沉淀物;
    (4)挥去(3)得到的沉淀物中的乙醚,即得蕨麻多糖。

    7.
      如权利要求1或2所述的蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用, 其特征是,所述药物或保健品的剂型为胶囊、微囊、脂体质、颗粒剂、片剂、 口服液、分散片中的任一种。

    8.
      如权利要求3或4所述的蕨麻多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用,其 特征是,所述药物的剂型为注射液。

    说明书

    蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用
    技术领域
    本发明属于中药技术领域,具体涉及蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品 中的应用。
    背景技术
    糖尿病是由遗传和环境因素共同引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临 床综合征,糖尿病可并发多种慢性并发症,导致器官功能障碍和衰竭,甚至残 疾和死亡。随着社会的日益发展,人们的生活水平日益提高,我国糖尿病的发病率 也在逐年上升。糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢紊乱综合症,全世界糖尿 病患者以每年6%的速度增加。预计在2010年至2030年间,发展中国家的成年 人总患病者会增加69%,发达国家会增加20%。目前的医学尚不能攻克糖尿病, 糖尿病的治疗主要以长期服用药物控制和缓解病情,然而目前临床使用药物多 为化学药物或生化药物,毒副作用的长期积累对人体的影响很大。这一严峻形 势促使对糖尿病药物的新药开发重点转向从自然界中寻找天然、安全、疗效确 切的新型活性成分。
    蕨麻是青藏高原特有的药材,属蔷薇科植物鹅绒委陵菜Potentilla anserina  L.,其药用部位为根,资源较为丰富。它既可以作为药物用来治病强身,又可以 作为食品以充饥食用,是当地极具开发前景的药材。
    蕨麻性平,味甘,健脾益胃,生津止渴,益气补血,止咳利痰,利湿,亦 有滋补之效;主治脾虚腹泻,病后贫血,营养不良等症,是藏医的常用药材。民间宜 长期作为营养保健品与药品应用?!吨谢乇静荨分屑窃仄淇楦泻刑妓?合物、蛋白质、脂肪、鞣质、黄酮、甾醇、胆碱、甜菜碱、组氨酸等成分。根 据有关的文献披露,蕨麻块根中有丰富的多糖。在李灵芝,张丽,龚海英等著 的“蕨麻醇提取物的抗缺氧与抗氧化研究”(中国食品卫生杂志, 2005,17(4):306-308)、陈炅然,胡庭俊,程富胜等著的“蕨麻多糖的免疫药理实 验研究”《兽药与饲料添加剂》2005,10(5):1-2.)和胡庭俊,陈炅然,程富胜,等 著的“蕨麻多糖对小鼠血清中三种细胞因子水平的影响”(《中国兽医科技》 2005,35(8):653-656)公开了蕨麻活性成分之一的蕨麻多糖(Potentilla anserina L. Polysaccharide,PAP),具有提高人体免疫功能、抗疲劳、耐缺氧和止泻抑菌的作 用。闵光宁等著的“蕨麻多糖的提取及对CCl4急性肝损伤的?;ぷ饔谩惫?蕨麻多糖的保肝作用。吴慧平,仲启亮,张喆等著“蕨麻提取物对α-葡萄糖苷 酶活性的影响”(《中药新药与临床药理》2010,21(1):4-6)以及吴慧平、高美 风、戴晓明等的“一种α-糖苷酶抑制剂----蕨麻提取物及其提取方法”的专利, 提到了蕨麻的水提物对正常小鼠餐后1小时的血糖有降低趋势,但和未给药组 比较没有统计学意义(ZL 200710131473.5),即没有降低正常小鼠血糖的作用。
    发明内容
    本发明的目的是提供蕨麻多糖的新应用,具体为蕨麻多糖在制备降血糖药 物或保健品中的应用。
    蕨麻多糖在制备降血糖药物或保健品中的应用。
    其中,所述药物或保健品的剂型为胶囊、微囊、脂体质、颗粒剂、片剂、 口服液、分散片中的任一种。
    蕨麻多糖在制备治疗糖尿病药物中的应用。
    其中,所述治疗糖尿病药物的剂型为注射液。
    蕨麻多糖在制备辅助治疗糖尿病的保健品中的应用。
    以上所述的蕨麻多糖均是由下述方法制备的:
    (1)称取干燥蕨麻,捣碎,加水,煎煮1.5h后,将水溶液过滤,重复3 次,将3次所得滤液合并,蒸发浓缩至1:1,得到浓缩液;
    (2)将(1)得到的浓缩液置容器中,加5倍量95%v/v的乙醇,低温静置 过夜,得到沉淀物;
    (3)将(2)得到的沉淀物离心,弃上清液,再依次分别加入无水乙醇、 丙酮、乙醚充分洗涤后离心,弃上清液,得到沉淀物;
    (4)挥去(3)得到的沉淀物中的乙醚,即得蕨麻多糖。
    本发明的有益效果:
    本发明研究表明,蕨麻多糖可以显著降低糖尿病模型小鼠的血糖,对糖尿 病模型小鼠具有治疗作用,提示蕨麻多糖具有显著的降血糖作用,可在制备降 血糖药物或保健品中的应用;可在制备治疗糖尿病的药物中应用,亦可在制备 辅助治疗糖尿病的保健品中应用。
    附图说明
    图1为正常组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片
    图2为模型对照组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片
    图3为二甲双胍阳性对照组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片
    图4为蕨麻多糖低剂量组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片
    图5为蕨麻多糖中剂量组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片
    图6为蕨麻多糖高剂量组的受试小鼠胰腺组织染色病理切片照片。
    具体实施方式
    实施例1蕨麻多糖的提取
    称取干燥蕨麻,捣碎,加约8倍量的水,置电炉上煎煮1.5h后,将水溶液 过滤,重复3次,将3次所得滤液合并,置蒸发皿中蒸发浓缩至1:1。将浓缩 液置烧杯中,加5倍量95%v/v的乙醇,低温静置过夜。将沉淀物置离心管中离 心(3000r/min,10min),弃上清液,再依次分别加入无水乙醇、丙酮、乙醚充分 洗涤后离心(3000r/min,10min),弃上清液。将所得沉淀物置平皿中,待乙醚挥 发完后所得灰色粉末即为蕨麻多糖,称重。得率为2.66%。
    实施例2蕨麻多糖含量测定
    采用苯酚-浓硫酸法测定蕨麻多糖的含量。精密吸取葡萄糖标准品溶液 0.16、0.20、0.24、0.28、0.32、0.36、0.40mL,分置于10mL容量瓶中,加蒸 馏水稀释至刻度混匀。分别精密吸取2.0mL于10mL带塞试管中,另取2.0mL 蒸馏水作空白对照。各管再加入1.0mL苯酚溶液,混匀,迅速加入浓H2SO45.0 mL,混匀后放置5min,置沸水浴中加热15min,取出置冷水中冷却后,于490nm 处测定吸光度。经过计算得回归方程为:y=0.042x-0.6836  R=0.9906。
    精密称取蕨麻多糖约4mg于100ml容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,精 密吸取1.0ml置试管中,按照标准曲线绘制项下方法测定吸光度,根据回归方 程计算,得蕨麻多糖含量为66.3%。
    实施例3糖尿病小鼠模型的建立
    所用实验动物为雄性昆明种小鼠,110只,体重17~23g,由兰州大学医学 院动物实验中心提供。
    取体重(20±3)g清洁级雄性昆明种小鼠110只,其中10只为空白对照 组,其余100只分笼、标记、称重后,尾静脉注射四氧嘧啶70mg/kg。3d后 测空腹血糖,血糖值>11.1mmol/L者为糖尿病模型。
    实施例4蕨麻多糖降血糖功效验证
    1.实验分组
    正常小鼠10只,糖尿病模型小鼠50只。
    将糖尿病模型小鼠随机分成5组,每组10只。糖尿病模型小鼠的模型建 立参照实施例3。

    组别 剂量 正常组 生理盐水 模型对照组 生理盐水 二甲双胍阳性对照组 250mg/kg 蕨麻多糖低剂量组 100mg/kg 蕨麻多糖中剂量组 200mg/kg 蕨麻多糖高剂量组 400mg/kg

    2.实验步骤
    受试小鼠在给药前称重。其中:二甲双胍阳性对照组、蕨麻多糖低剂量组、 蕨麻多糖中剂量组、蕨麻多糖高剂量组小鼠均灌胃给予相应的药物,1日1次, 正常组、模型对照组均用同等体积生理盐水灌胃,1日1次,每次100ml/kg。 给药21天,处死前一天晚上,禁食不禁水。第21天早上小鼠称重并摘眼球取 血,离心后血清测空腹血糖,随后处死小鼠,剖腹,并摘取小鼠肝脏,用注射 器将生理盐水缓慢注入肝脏冲洗,制备肝匀浆以测定肝糖原,同时取左侧小腿同 一部位的肌肉做肌肉匀浆以测定肌糖原。摘取小鼠胰腺10%福尔马林固定,石 蜡包埋切片,HE染色后用图象分析仪对肝脏的形态进行观察并拍摄病理图片。
    3.实验结果:
    实验结果表明:模型对照组小鼠的血糖值明显高于正常组,与正常组相比, 差异有显著性(P<0.01),表明造模成功。
    二甲双胍阳性对照组的血糖明显低于模型对照组,与模型对照组相比,差异 有显著性(P<0.01),说明实验方法是可靠的。
    蕨麻多糖低剂量组、蕨麻多糖中剂量组、蕨麻多糖高剂量组均可明显降低实 验性高血糖小鼠的血糖。与模型对照组相比,差异有显著性(P<0.05),且与剂量 有依赖性,呈负相关,蕨麻多糖剂量越小,小鼠血糖下降越多。
    结果见表1。
    表1.蕨麻多糖对糖尿病模型小鼠血糖的影响

    注:*P<0.05,**P<0.01
    蕨麻多糖各剂量组尚可降低糖尿病小鼠的肝糖原,与模型对照组相比,差异 有显著性(P<0.05)。蕨麻多糖各剂量组也可降低糖尿病模型小鼠的肝糖原及肌糖 原,且与模型对照组相比,差异有显著性(P<0.01),结果见表2。
    表2.蕨麻多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠肝糖原、肌糖原的影响

    注:*P<0.05,**P<0.01
    从各受试小鼠胰腺组织病理切片可见:
    正常组:胰岛细胞数量形态正常;(图1)
    模型对照组:胰岛细胞变性;(图2)
    二甲双胍阳性对照组:胰岛有轻微炎症细胞;(图3)
    蕨麻多糖低剂量组:胰岛细胞形态接近正常,数量增加;(图4)
    蕨麻多糖中剂量组:胰岛细胞形态接近正常,数量增加;(图5)
    蕨麻多糖高剂量组:胰岛细胞形态接近正常,数量增加。(图6)
    以上实验结果表明,蕨麻多糖对糖尿病小鼠血糖有降低作用,同时可以修 复因糖尿病变性的胰岛细胞,提示蕨麻多糖可在制备降血糖药物或保健品中应 用;也可在制备治疗糖尿病药物中应用;在制备辅助治疗糖尿病的保健品中应 用?!  ∧谌堇醋宰ɡ鴚ww.www.4mum.com.cn转载请标明出处

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