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    重庆时时彩君彩计划: 有机肥的制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410086926.7

    申请日:

    2014.03.11

    公开号:

    CN103787712A

    公开日:

    2014.05.14

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 专利权的转移IPC(主分类):C05F 17/00登记生效日:20170726变更事项:专利权人变更前权利人:南通禾宝生物科技有限公司变更后权利人:江苏联海生物科技有限公司变更事项:地址变更前权利人:226100 江苏省南通市海门市临江镇临甸工业集中区东区变更后权利人:226100 江苏省南通市海门市临江镇临甸工业集中区纬四路变更事项:共同专利权人变更后权利人:南通禾宝生物科技有限公司|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C05F 17/00申请日:20140311|||公开
    IPC分类号: C05F17/00; C05F5/00 主分类号: C05F17/00
    申请人: 南通禾宝生物科技有限公司
    发明人: 唐波; 李舒宇; 仝志勇; 陈玉和
    地址: 226100 江苏省南通市海门市临江镇临甸工业集中区东区
    优先权:
    专利代理机构: 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 代理人: 高之波;邬玥
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410086926.7

    授权公告号:

    |||||||||

    法律状态公告日:

    2017.08.15|||2016.05.18|||2014.06.11|||2014.05.14

    法律状态类型:

    专利申请权、专利权的转移|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了有机肥的制备方法,包括如下步骤:(1)制备复合菌剂培养液:将第一菌种、绿针假单胞菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌依次经过种子活化、种子扩培和复合培养得到复合菌剂培养液;(2)堆肥发酵:将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用0.5~1.2升复合菌剂培养液的配比与酒精厌氧酒糟混合,在55~65℃及堆料的含水率在40~45%下发酵15~30天;然后再堆放15~20天即可完成。本发明的有益效果是:一方面可以减少废弃物的污染,另一方面可以实现废弃物的增值和资源化利用。且生产周期短、工艺稳定。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  有机肥的制备方法,其特征在于包括如下步骤: 
    (1)制备复合菌剂培养液:将第一菌种、绿针假单胞菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌依次经过种子活化、种子扩培到复合培养得到复合菌剂培养液; 
    (2)堆肥发酵:将复合菌剂培养液与酒精厌氧酒糟混合,在55~65℃下发酵15~30天;然后再堆放15~20天即可完成。 

    2.  根据权利要求1所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)制得的复合菌剂培养液的有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。 

    3.  根据权利要求2所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中复合菌剂培养液的用量为每吨酒精厌氧酒糟用0.5~1.2升复合菌剂培养液。 

    4.  根据权利要求3所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的复合菌剂培养液的制备方法如下: 
    a、培养基的配制 
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖15~20g/L,酵母膏2~5g/L,蛋白胨8~10g/L,琼脂15~20g/L,用蒸馏水定容至1000mL,高压蒸汽灭菌; 
    第二种子活化固体培养基:氯化铵8~12g/L;磷酸氢二钠0.5~0.8g/L;硫酸镁1.5~2g/L;氯化钠1.5~2g/L;碳酸氢钠:45~60g/L;酵母膏:15~20g/L乙醇1.2~2ml/L,琼脂15~20g/L,用磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,高压蒸汽灭菌; 
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖8~15g/L,酵母膏6~10g/L,碳酸钙5~8g/L,琼脂15~20g/L,水1000mL,调至pH5.5~5.8,高压蒸汽灭菌; 
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨10~15g/L,酵母膏3~5g/L,氯化钠5~10g/L,用蒸馏水定容至1000mL,pH7.0~7.2,高压蒸汽灭菌; 
    种子液体培养基:玉米浆90~120g/L,红糖100~150g/L,自来水1000ml,搅拌均匀,高压蒸汽灭菌; 
    复合菌剂培养基:玉米浆20~35kg,红糖150~200kg,麸皮10~20kg,自来水定容至1000L,搅拌均匀,高压蒸汽灭菌; 
    b、种子活化 
    将第一菌种在无菌环境中接种至第一种子活化固体培养基,28~35℃ 恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的种子; 
    将绿针假单胞菌在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,25~28℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的绿针假单胞菌种子; 
    将枯草芽孢杆菌在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,30~40℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子; 
    将巨大芽孢杆菌在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,28~32℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的巨大芽孢杆菌。 
    c、种子扩培 
    将活化后的四种种子在无菌环境中接种至种子液体培养基中,在40~45℃恒温条件下混合培养60~72h后即为种子培养液; 
    d、复合培养 
    将待种子培养液扩陪完成后接种至复合菌剂培养基,45~50℃恒温条件下培养60~72h后即得到复合菌剂培养液。 

    5.  根据权利要求1~4任一项所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的第一菌种选自产朊假丝酵母、热带假丝酵母、扣囊拟内孢霉或白地霉中的至少一种。 

    6.  根据权利要求1~4任一项所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的酒精厌氧酒糟在发酵过程中的含水率为40~45%。 

    7.  根据权利要求1~4任一项所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的酒精厌氧酒糟在发酵之前进行汽爆处理,所述的汽爆条件为:压力为0.5~3MPa条件下,维持5~20min。 

    8.  根据权利要求7所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆成高度1.0~1.5米、宽度1.5~3.0米的条垛进行发酵。 

    9.  根据权利要求1~4任一项所述的有机肥的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的发酵过程中需每天测定堆料温度和水分,当升温停顿或有下降趋势时,及时进行翻堆。

    说明书

    说明书有机肥的制备方法
    技术领域
    本发明涉及肥料生产领域,特别涉及一种有机肥的制备方法。
    背景技术
    酒精是一种重要的工业、食品原料,广泛应用于化工、食品饮料、日化和医药卫生等行业,同时也是应用广泛的可再生能源,因此具有十分广泛的应用和发展前景。我国的酒精产能达到600万吨以上,但是开工率约75%。目前酒精的主要生产原料为木薯、玉米、糖蜜等。酒精发酵行业是一个污染相对严重的行业,每年产生的有机废水达到6000万立方,废水通常经过全糟高温厌氧、好氧等环节进行处理达标排放,在全糟高温厌氧处理过程中会产生大量的厌氧酒糟,水分在65%~70%,这些酒糟长期以来作为废料进行处理,容易实现二次污染,没有实现资源化利用。常规的生物有机肥堆肥发酵,发酵周期长,生产粗放,品质难以保证,迫切需要开发出高效、稳定的有机肥生产工艺。
    发明内容
    本发明的目的在于提供一种生产周期短、工艺稳定有机肥的制备方法。
    根据本发明的一个方面,提供了有机肥的制备方法,包括如下步骤:
    (1)制备复合菌剂培养液:将第一菌种、绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)依次经过种子活化、种子扩培到复合培养得到复合菌剂培养液;
    (2)堆肥发酵:将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用0.5~1.2升复合菌剂培养液的配比与酒精厌氧酒糟混合,在55~65℃下发酵15~30天;然后再堆放15~20天即可完成。
    在一些实施方式中,步骤(1)制得的有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。足量的有效活菌数可确保发酵工艺的稳定。
    在一些实施方式中,步骤(2)中复合菌剂培养液的用量为每吨酒精厌氧酒糟用0.5~1.2升复合菌剂培养液。
    酒精厌氧酒糟的原料一般为木薯、玉米等草本植物,其有机质含量大于45%,养分(总氮、总磷、总钾)大于4.5%,不含重金属、蛔虫卵、药物残留,是生产有机肥的良好原料。本发明采用特定的菌种通过种子活化、 种子扩培和复合培养得到复合菌剂培养液,再把复合菌剂培养液与酒精厌氧酒糟混合进行发酵制造有机肥。复合菌剂培养液中的第一菌种主要用于产生蛋白质以增加有机肥中的氮肥含量。绿针假单胞菌可产生促进植物生长活性物质和改善矿质营养??莶菅挎吒司刹髦值鞍酌负陀谢锓纸饷傅纫苑纸庥谢锖偷鞍字?。巨大芽孢杆菌可分解有机磷以产生磷肥。
    本发明的有益效果是:一方面可以减少废弃物的污染,另一方面可以实现废弃物的增值和资源化利用。本发明的方法生产的有机肥中的有机质的质量分数(以烘干基计)大于45%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)的质量分数(以烘干基计)大于5%,水分的质量分数小于30%。PH值:5.5~8.5。完全达到有机肥国家标准的要求。且生产周期短、工艺稳定。
    在一些实施方式中,步骤(1)中的复合菌剂培养液的制备方法如下:
    a、培养基的配制
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖15~20g/L,酵母膏2~5g/L,蛋白胨8~10g/L,琼脂15~20g/L,用蒸馏水定容至1000mL,高压蒸汽灭菌;
    第二种子活化固体培养基:氯化铵8~12g/L;磷酸氢二钠0.5~0.8g/L;硫酸镁1.5~2g/L;氯化钠1.5~2g/L;碳酸氢钠:45~60g/L;酵母膏:15~20g/L乙醇1.2~2ml/L,琼脂15~20g/L,用磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,高压蒸汽灭菌;
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖8~15g/L,酵母膏6~10g/L,碳酸钙5~8g/L,琼脂15~20g/L,水1000mL,调至pH5.5~5.8,高压蒸汽灭菌;
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨10~15g/L,酵母膏3~5g/L,氯化钠5~10g/L,用蒸馏水定容至1000mL,pH7.0~7.2,高压蒸汽灭菌;
    种子液体培养基:玉米浆90~120g/L,红糖100~150g/L,自来水1000ml,搅拌均匀,高压蒸汽灭菌;
    复合菌剂培养基:玉米浆20~35kg,红糖150~200kg,麸皮10~20kg,自来水定容至1000L,搅拌均匀,高压蒸汽灭菌;
    b、种子活化
    将第一菌种在无菌环境中接种至第一种子活化固体培养基,28~35℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的种子;
    将绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,25~28℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的绿针假单胞菌种子;
    将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,30~40℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子;
    将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,28~32℃恒温条件下静止培养48~72h,获得活化的巨大芽孢杆菌。
    c、种子扩培
    将活化后的四种种子在无菌环境中接种至种子液体培养基中,在40~45℃恒温条件下混合培养60~72h后即为种子培养液;
    d、复合培养
    将待种子培养液扩陪完成后接种至复合菌剂培养基,45~50℃恒温条件下培养60~72h后即得到复合菌剂培养液。
    通过上述过程可得到PH值4.5~7.5,有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45的复合菌剂培养液。通过含有特定的菌种的复合菌剂培养液对酒精厌氧酒糟进行发酵处理,其生产工艺稳定,产品质量好。
    在一些实施方式中,步骤(1)中的第一菌种选自产朊假丝酵母(Candida utilis)、热带假丝酵母(Candidatropicalis)、扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuliger)或白地霉(Geotrichumcandidum)中的至少一种。
    上述菌种主要用于增加有机肥中的氮肥含量。
    在一些实施方式中,步骤(2)的酒精厌氧酒糟在发酵过程中的含水率为40~45%。有利于各种菌种的繁殖和透气。
    在一些实施方式中,步骤(2)的酒精厌氧酒糟在发酵之前进行汽爆处理,所述的汽爆条件为:压力为0.5~3MPa条件下,维持5~20min。
    通过汽爆处理可降低原酒精厌氧酒糟中的水份含量,同时也可以增加酒精厌氧酒糟发酵堆料的透气度,改善发酵条件。
    在一些实施方式中,经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆成高度1.0~1.5米、宽度1.5~3.0米的条垛进行发酵。堆成条垛可便于测量水份和温度,也便于翻堆操作。
    在一些实施方式中,步骤(2)的发酵过程中需每天测定堆料温度和水分,当升温停顿或有下降趋势时,及时进行翻堆。翻堆有利于给发酵堆料进行粉碎和增氧,以确保发酵过程在高温下进行。
    具体实施方式
    本发明实施例所用的菌种均购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,其中各菌种的保藏编号分别为:产朊假丝酵母31923、热带假丝酵母1419、枯草芽孢杆菌10071、黑曲霉菌2109、嗜酸乳杆菌6091、绿针假单胞菌20676、枯草芽孢杆菌10063、巨大芽孢杆菌21458、扣囊拟内孢霉31258、白地霉1443。
    实施例1
    一种以酒精厌氧酒糟为主要原料生产有机肥的制备方法,包括步骤如下:
    (1)复合发酵菌剂培养液的制备
    a、培养基的配制
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖20g/L,酵母膏5g/L,蛋白胨10g/L,琼脂15g/L,用蒸馏水定容至1000mL,PH值自然,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟后摆斜面。
    第二种子活化固体培养基:氯化铵8g/L;磷酸氢二钠0.7g/L;硫酸镁1.8g/L;氯化钠2g/L;碳酸氢钠:50g/L;酵母膏:20g/L乙醇1.8ml/L,琼脂18g/L,用0.1mol/L磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟后摆斜面。
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖8g/L,酵母膏6g/L,碳酸钙5g/L,琼脂15g/L,水1000mL,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH5.5,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟后摆斜面。
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨12g/L,酵母膏3g/L,氯化钠10g/L,溶于900毫升蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟后摆斜面。
    种子液体培养基:玉米浆90g,红糖150g,自来水1000ml,PH值自然,搅拌均匀,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟。
    复合菌剂培养基:玉米浆20kg,红糖150kg,麸皮20kg,自来水定容至1000L,PH值自然,搅拌均匀,至于2立方发酵罐,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟。
    b、种子活化
    将产朊假丝酵母(Candidautilis)作为第一菌种在无菌环境中接种至第一种子活化固体培养基,35℃恒温条件下静止培养48h,获得活化的种子。
    将绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,25℃恒温条件下静止培养60h,获得活化的绿针假单胞菌种子。
    将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,40℃恒温条件下静止培养52h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子。
    将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,28℃恒温条件下静止培养72h,获得活化的巨大芽孢杆菌。
    c、种子扩培
    将活化后的四种种子在无菌环境中用接种环分别接3环至种子液体培养基中,在45℃恒温条件下培养72h后即得到种子培养液。
    d、复合菌剂培养液的制备
    将种子培养液接种至复合菌剂培养基,50℃恒温条件下培养72h后即得到复合菌剂培养液。所得到的复合菌剂培养液PH值为5.5,有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。
    (2)酒精厌氧酒糟的预处理
    将酒精厌氧酒糟输送至汽爆机上进行汽爆处理,汽爆条件为:压力为1.5MPa条件下,维持15min。
    (3)堆肥发酵:
    将经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆砌成条垛,高度1.5米,宽2米,长度不限。将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用1.2升复合菌剂培养液的比例喷洒在条垛表面,用翻堆机翻堆一次,堆砌后每隔48小时翻一次,在55~65℃的温度下持续堆放发酵15天。发酵过程中每天上午8:30,中午12:30,下午4:30按时测定堆料温度和水分,并作好准确记录,制作温度和水分变化曲线。根据测温的结果,当升温停顿或有下降趋势时,及时用翻抛机增加翻堆次数。翻堆要彻底翻透,要求上层及表面翻入底部及中心部位以达到粉碎、增氧,促进微生物繁殖及挥发水分的作用。通过持续高温及10次翻堆增加水分的蒸发量确保堆料的含水率在40%。发酵完成后,将堆料放置于半成品库,堆放20天,完成后熟。按照有机肥国家标准进行检测,得到成品有机肥的指标为:有机质的质量分数(以烘干基计)为50%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)的质量分数(以烘干基计)为5.3%,水分的质量分数为28%。pH值为6.0。
    (4)粉碎、包装
    在成品包装前,半成品用筛选机进行细化处理,过筛孔直径为2.0cm的筛子,筛下物物合格产品,筛上物进行二次粉碎。筛上物用包装机按每袋25千克称量包装(包装标识按GB18382),包装后入库贮存于阴凉干燥处。
    实施例2
    一种以酒精厌氧酒糟为主要原料生产有机肥的制备方法,包括步骤如下:
    (1)复合发酵菌剂培养液的制备
    a、培养基的配制
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖15g/L,酵母膏4.5g/L,蛋白胨9g/L,琼脂15g/L,用蒸馏水定容至1000mL,PH值自然,用0.1MPa的高压蒸汽 灭菌20-30分钟后摆斜面。
    第二种子活化固体培养基:氯化铵10g/L;磷酸氢二钠0.5g/L;硫酸镁2g/L;氯化钠1.8g/L;碳酸氢钠:45g/L;酵母膏:15g/L乙醇2ml/L,琼脂20g/L,用0.1mol/L磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌25分钟后摆斜面。
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖15g/L,酵母膏8gg/L,碳酸钙5g/L,琼脂15g/L,水1000mL,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH5.6,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟后摆斜面。
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨10g/L,酵母膏5g/L,氯化钠8g/L,溶于900毫升蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH7.2,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌23分钟后摆斜面。
    种子液体培养基:玉米浆105g/L,红糖100g/L,自来水1000ml,PH值自然,搅拌均匀,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟。
    复合菌剂培养基:玉米浆35kg,红糖200kg,麸皮15kg,自来水定容至1000L,PH值自然,搅拌均匀,置于2立方发酵罐,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌15分钟)。
    b、种子活化
    将热带假丝酵母(Candidatropicalis)作为第一菌种在无菌环境中接种至第一种子活化固体培养基,30℃恒温条件下静止培养72h,获得活化的热带假丝酵母种子。
    将绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,25℃恒温条件下静止培养72h,获得活化的绿针假单胞菌种子。
    将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,38℃恒温条件下静止培养72h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子。
    将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,30℃恒温条件下静止培养60h,获得活化的巨大芽孢杆菌。
    c、种子扩培
    将活化后的四种种子在无菌环境中用接种环分别接5环至种子液体培养基中,在42℃恒温条件下培养68h后即得到种子培养液;
    d、复合菌剂培养液的制备
    将种子培养液接种至复合菌剂培养基,50℃恒温条件下培养72h后即得到复合菌剂培养液,所得到的复合菌剂培养液PH值为4.8,有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。
    (2)酒精厌氧酒糟的预处理
    将酒精厌氧酒糟输送至汽爆机上进行汽爆处理,汽爆条件为:压力为3MPa条件下,维持5min。
    (3)堆肥发酵:
    将经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆砌成条垛,高度1.2米,宽1.5米,长度不限。将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用1.0升复合菌剂培养液的比例喷洒在条垛表面,用翻堆机翻堆一次,堆砌后每隔48小时翻一次,在55~65℃的温度下持续堆放发酵25天。发酵过程中每天上午8:30,中午12:30,下午4:30按时测定堆料温度和水分,并作好准确记录,制作温度和水分变化曲线。根据测温的结果,当升温停顿或有下降趋势时,及时用翻抛机增加翻堆次数。翻堆要彻底翻透,要求上层及表面翻入底部及中心部位,以达到粉碎、增氧,促进微生物繁殖及挥发水分的作用。通过持续高温及14次翻堆增加水分的蒸发量确保堆料的含水率在42%。发酵完成后,将堆料放置于半成品库,堆放16天,完成后熟。按照有机肥国家标准进行检测,得到成品有机肥的指标为:有机质的质量分数(以烘干基计)60%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)的质量分数(以烘干基计)5.1%,水分的质量分数29%。PH值7.0。
    (4)粉碎、包装
    在成品包装前,半成品用筛选机进行细化处理,过筛孔直径为1.8cm的筛子,筛下物物合格产品,筛上物进行二次粉碎。筛上物用包装机按每袋25千克称量包装(包装标识按GB18382),包装后入库贮存于阴凉干燥处。
    实施例3
    一种以酒精厌氧酒糟为主要原料生产有机肥的制备方法,包括步骤如下:
    (1)复合发酵菌剂培养液的制备
    a、培养基的配制
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖20g/L,酵母膏4g/L,蛋白胨8g/L,琼脂20g/L,用蒸馏水定容至1000mL,PH值自然,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟)后摆斜面。
    第二种子活化固体培养基:氯化铵8g/L;磷酸氢二钠0.5g/L;硫酸镁1.7g/L;氯化钠1.5g/L;碳酸氢钠:48g/L;酵母膏:20g/L乙醇1.4ml/L,琼脂15g/L,用0.1mol/L磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟)后摆斜面。
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖12g/L,酵母膏10g/L,碳酸钙5g/L,琼脂18/L,水1000mL,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH5.6,用 0.1MPa的高压蒸汽灭菌25分钟后摆斜面。
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨15g/L,酵母膏3g/L,氯化钠6g/L,溶于900毫升蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH7.2,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟后摆斜面。
    种子液体培养基:玉米浆120g/L,红糖150g/L,自来水1000ml,PH值自然,搅拌均匀,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌45分钟。
    复合菌剂培养基:玉米浆35kg,红糖180kg,麸皮20kg,自来水定容至1000L,PH值自然,搅拌均匀,置于2立方发酵罐,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌45分钟。
    b、种子活化
    将产朊假丝酵母(Candidautilis)和热带假丝酵母(Candida tropicalis)菌种作为第一菌种,在无菌环境中同时接种至第一种子活化固体培养基,35℃恒温条件下静止培养50h,获得活化的种子。
    将绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,28℃恒温条件下静止培养60h,获得活化的绿针假单胞菌种子。
    将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,30℃恒温条件下静止培养72h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子。
    将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,32℃恒温条件下静止培养60h,获得活化的巨大芽孢杆菌。
    c、种子扩培
    将活化后的四种种子在无菌环境中用接种环分别接5环至种子液体培养基中,在45℃恒温条件下培养60h后即得到种子培养液。
    d、复合菌剂培养液的制备
    将种子培养液接种至复合菌剂培养基,50℃恒温条件下培养60h后即得到复合菌剂培养液,所得到的复合菌剂培养液PH值为7.2,有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。
    (2)酒精厌氧酒糟的预处理
    将酒精厌氧酒糟输送至汽爆机上进行汽爆处理,汽爆条件为:压力为3MPa条件下,维持5min。
    (3)堆肥发酵:
    将经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆砌成条垛,高度1.5米,宽2.5米,长度不限。将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用1升复合菌剂培养液的比例喷洒在条垛表面,用翻堆机翻堆一次,堆砌后每隔48小时翻一次,在55~65℃的温度下持续堆放发酵20天。发酵过程中每天上午8: 30,中午12:30,下午4:30按时测定堆料温度和水分,并作好准确记录,制作温度和水分变化曲线。根据测温的结果,当升温停顿或有下降趋势时,及时用翻抛机增加翻堆次数。翻堆要彻底翻透,要求上层及表面翻入底部及中心部位,以达到粉碎、增氧,促进微生物繁殖及挥发水分的作用。通过持续高温及12次翻堆增加水分的蒸发量确保堆料的含水率在40%左右。发酵完成后,将堆料放置于半成品库,堆放17天,完成后熟。按照有机肥国家标准进行检测,得到成品有机肥的指标为:有机质的质量分数(以烘干基计)59%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)的质量分数(以烘干基计)6.3%,水分的质量分数25%。PH值:7.7。
    (4)粉碎、包装
    在成品包装前,半成品用筛选机进行细化处理,过筛孔直径为2.0cm的筛子,筛下物物合格产品,筛上物进行二次粉碎。筛上物用包装机按每袋25千克称量包装(包装标识按GB18382),包装后入库贮存于阴凉干燥处。
    实施例4
    一种以酒精厌氧酒糟为主要原料生产有机肥的制备方法,包括步骤如下:
    (1)复合发酵菌剂培养液的制备
    a、培养基的配制
    第一种子活化固体培养基:葡萄糖20g/L,酵母膏2g/L,蛋白胨8g/L,琼脂20g/L,用蒸馏水定容至1000mL,PH值自然,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟后摆斜面。
    第二种子活化固体培养基:氯化铵12g/L;磷酸氢二钠0.8g/L;硫酸镁1.5g/L;氯化钠1.5g/L;碳酸氢钠:60g/L;酵母膏:20g/L乙醇1.2ml/L,琼脂15g/L,用0.1mol/L磷酸调至pH7.0,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌30分钟后摆斜面。
    第三种子活化固体培养基:葡萄糖12g/L,酵母膏10g/L,碳酸钙8g/L,琼脂20/L,水1000mL,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH5.8,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌25分钟后摆斜面。
    第四种子活化固体培养基:蛋白胨15g/L,酵母膏3g/L,氯化钠5g/L,溶于900毫升蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸调至pH7.2,用蒸馏水定容至1000mL,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20分钟后摆斜面。
    种子液体培养基:玉米浆120g/L,红糖150g/L,自来水1000ml,PH值自然,搅拌均匀,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌45分钟。
    复合菌剂培养基:玉米浆35kg,红糖180kg,麸皮10kg,自来水定 容至1000L,PH值自然,搅拌均匀,置于2立方发酵罐,用0.1MPa的高压蒸汽灭菌45分钟。
    b、种子活化
    将扣囊拟内孢霉(Endomycopsisfibuliger)和白地霉(Geotrichum candidum)菌种作为第一菌种,在无菌环境中同时接种至第一种子活化固体培养基,28℃恒温条件下静止培养50h,获得活化的种子。
    将绿针假单胞菌(Pseudomonaschlororaphis)在无菌环境中接种至第二种子活化固体培养基,28℃恒温条件下静止培养48h,获得活化的绿针假单胞菌种子。
    将枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在无菌环境中接种至第三种子活化固体培养基,40℃恒温条件下静止培养48h,获得活化的枯草芽孢杆菌种子。
    将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)在无菌环境中接种至第四种子活化固体培养基,32℃恒温条件下静止培养48h,获得活化的巨大芽孢杆菌。
    c、种子扩培
    将活化后的四种种子在无菌环境中用接种环分别接5环至种子液体培养基中,在40℃恒温条件下培养72h后即得到种子培养液。
    d、复合菌剂培养液的制备
    将种子培养液接种至复合菌剂培养基,45℃恒温条件下培养60h后即得到复合菌剂培养液。所得到的复合菌剂培养液PH值为7.2,有效活菌数(cfu)/〔×108/g(ml)〕≥45。
    (2)酒精厌氧酒糟的预处理
    将酒精厌氧酒糟输送至汽爆机上进行汽爆处理,汽爆条件为:压力为0.5MPa条件下,维持20min。
    (3)堆肥发酵:
    将经过汽爆预处理后的酒精厌氧酒糟,堆砌成条垛,高度1米,宽3米,长度不限。将复合菌剂培养液按照每吨酒精厌氧酒糟用1升复合菌剂培养液的比例喷洒在条垛表面,用翻堆机翻堆一次,堆砌后每隔48小时翻一次,在55~65℃的温度下持续堆放发酵30天。发酵过程中每天上午8:30,中午12:30,下午4:30按时测定堆料温度和水分,并作好准确记录,制作温度和水分变化曲线。根据测温的结果,当升温停顿或有下降趋势时,及时用翻抛机增加翻堆次数。翻堆要彻底翻透,要求上层及表面翻入底部及中心部位,以达到粉碎、增氧,促进微生物繁殖及挥发水分的作用。通过持续高温及12次翻堆增加水分的蒸发量确保堆料的含水率在40%左右。发酵完成后,将堆料放置于半成品库,堆放15天,完成后熟。按照有机肥国家标准进行检测,得到成品有机肥的指标为:有机质的质量分数(以烘 干基计)56%,总养分(氮+五氧化二磷+氧化钾)的质量分数(以烘干基计)6.0%,水分的质量分数28%。PH值:7.2。
    (4)粉碎、包装
    在成品包装前,半成品用筛选机进行细化处理,过筛孔直径为2.0cm的筛子,筛下物物合格产品,筛上物进行二次粉碎。筛上物用包装机按每袋25千克称量包装(包装标识按GB18382),包装后入库贮存于阴凉干燥处。
    以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明创造构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于发明的?;し段?。

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