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    重庆时时彩送注册金: 磁珠法培养贴壁细胞.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201910022715

    申请日:

    20190110

    公开号:

    CN109628372A

    公开日:

    20190416

    当前法律状态:

    公开

    有效性:

    审中

    法律详情: 公开
    IPC分类号: C12N5/00;C12N13/00 主分类号: C12N5/00;C12N13/00
    申请人: 武汉济源高科技有限公司
    发明人: 方松刚
    地址: 430073 湖北省武汉市:东湖高新技术开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地研发楼B1栋
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201910022715

    授权公告号:

    法律状态公告日:

    20190416

    法律状态类型:

    公开

    摘要

    本专利主要描述的是一种新型的贴壁细胞培养方法。这种新型的贴壁细胞培养方法依赖于一种表面经过包被液处理的微型磁珠(50nm),将磁珠和细胞混合于液体培养基中后,细胞将很快贴附于磁珠表面,这样将大大增大细胞的培养面积。同时磁珠具有磁吸附的特性,通过外加磁场可以方便快捷地将磁珠和培养基分离开来,便于细胞的传代和收集。本专利中的贴壁细胞培养方法可以广泛应用于干细胞、成纤维细胞、表皮细胞、DC细胞以及其它贴壁细胞的科研和工业化生产。

    权利要求书

    1.一种磁珠培养贴壁细胞的方法,包括磁珠包被液的配置、微型磁珠的包被方法、微型磁珠培养贴壁细胞的接种方法、微型磁珠培养贴壁细胞的传代方法和微型磁珠培养贴壁细胞的手机纯化方法。 2.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于磁珠包被液的配置配方中包含胶原蛋白和纤维粘连蛋白。 3.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于磁珠的包被方法为37℃包被24h。 4.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于细胞接种的方法中接种细胞和磁珠的比例为2:1。 5.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于细胞收集纯化的方法为收集细胞液,在外加磁场的作用或者用磁力吸附架下,富集磁珠,去掉培养基,加入与磁珠等体积的0.25%胰酶,消化1分钟,加入2倍磁珠体积终止液(小牛血清),将消化液加入到带磁场的过滤柱中,再加入3倍体积洗脱液进行洗脱,将洗脱液进行1200rpm离心8分钟,得到细胞沉淀,注意观察离心管底部是否有残留的磁珠,如果含有残留磁珠,加入5倍体积生理盐水重悬细胞,再次加入到磁场的过滤柱中,加入3倍体积洗脱液进行洗脱,将洗脱液进行1200rpm离心8分钟,得到细胞沉淀。

    关 键 词:
    磁珠法 培养 细胞
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