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    重庆时时彩个位技巧: 一种乳酸菌的有氧高密度培养方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201910024620

    申请日:

    20190110

    公开号:

    CN109536422A

    公开日:

    20190329

    当前法律状态:

    实质审查的生效

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效
    IPC分类号: C12N1/20;C12R1/25;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/01;C12R 主分类号: C12N1/20;C12R1/25;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/01;C12R
    申请人: 广西大学
    发明人: 蒙健宗;潘勤春;叶柳健;韩佳临;冯旄;甘敏鑫;周礼芹
    地址: 530003 广西壮族自治区南宁市西乡塘区大学东路100号
    优先权:
    专利代理机构: 11340 代理人: 牙斐颖
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201910024620

    授权公告号:

    法律状态公告日:

    20190423

    法律状态类型:

    实质审查的生效

    摘要

    本发明涉及乳酸菌高密度培养技术领域,特别涉及一种乳酸菌在有氧条件下的高密度培养方法。本发明是将乳酸菌接种到含有氧抑制剂的培养基中,在通入空气的条件下进行分批发酵培养或分批补料发酵培养,通过在乳酸菌培养基成分中添加微生物和动物中提取的氧抑制剂的方法来达到抑制有害代谢物,提高乳酸菌有氧培养的细胞密度和活菌体数量的目的。本发明添加的游动放线菌细胞提取物以及牛肝细胞提取物,能使乳酸菌有氧培养过程中活性氧的产生大大减少或消除,大大减少或清除活性氧对乳酸菌的毒害作用,实现乳酸菌有氧条件下的高密度培养。

    权利要求书

    1.一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,将乳酸菌接种到含有氧抑制剂的培养基中,在通入空气的条件下进行分批发酵培养或分批补料发酵培养。 2.根据权利要求1所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述乳酸菌为兼性厌氧乳酸菌,具体为植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、德式乳杆菌乳酸亚种、鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、戊糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、纤维二糖乳杆菌、发酵乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、产丙酸丙酸杆菌、布氏乳杆菌、副干酪乳杆菌中的一种或多种。 3.根据权利要求1所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述的乳酸菌在发酵培养中通入空气的量为0.1vvm-2.0vvm。 4.根据权利要求1所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述在培养基成分中添加的氧抑制剂为游动放线菌细胞提取物和/或牛肝细胞提取物。 5.根据权利要求4所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述的游动放线菌细胞提取物的制备方法为:将游动放线菌接种于常规放线菌液体培养基,于25-30℃、转速为200r/min的摇床中发酵培养7-9天,离心,将菌体沉淀物用上清液体积0.2-0.3倍的乙醇充分悬浮,在超声破碎仪上破碎15-20分钟,离心,收集上清液即为游动放线菌细胞提取物。 6.根据权利要求4所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述的牛肝细胞提取物的制备方法为:新鲜牛肝切碎,加入预冷到2-5℃的2-3倍体积的pH7.0磷酸缓冲液,用组织匀浆机搅碎为匀浆,室温静置4-5小时,离心,收集上清液;沉淀物再用预冷到2-5℃的2-3倍体积的pH7.0磷酸缓冲液重复提取一次,合并两次提取液,用截留分子量为10KD的超滤膜浓缩8-10倍,将浓缩液过滤除菌,即为牛肝细胞提取物。 7.根据权利要求4所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述氧抑制剂的组成如下:乳酸菌发酵培养基体积0.1%-2.0%的游动放线菌细胞提取物和/或乳酸菌发酵培养体积0.1%-2.0%的牛肝细胞提取物。 8.根据权利要求1所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述分批发酵培养是将乳酸菌接种到培养基后,用无菌操作方法加入氧抑制剂,发酵过程通入空气,并保持37℃,搅拌100r/m,发酵至pH下降至6.8后,自动流加体积分数10%的氨水调节pH=6.8±0.2。 9.根据权利要求1所述一种乳酸菌的有氧高密度培养方法,其特征在于,所述分批补料发酵培养是将乳酸菌接种到培养基后,用无菌操作方法加入氧抑制剂,发酵过程通入空气,并保持37℃,搅拌100r/m,发酵至pH下降至6.8后,自动流加体积分数10%的氨水调节pH=6.8±0.2;并且在发酵数小时后补充碳源。

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    一种 乳酸菌 有氧 高密度 培养 方法
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