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    手机买重庆时时彩: 一种获得高生物产量的羌活细胞培养方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201910027791

    申请日:

    20190111

    公开号:

    CN109652360A

    公开日:

    20190419

    当前法律状态:

    公开

    有效性:

    审中

    法律详情: 公开
    IPC分类号: C12N5/04 主分类号: C12N5/04
    申请人: 成都大学
    发明人: 王跃华;屈锡梅;陈芳;马涛;任倩;史斯予;王一品;陈诚;陈勤科;贾宇航;张婕萱;冯玉柯;张晓捷;付雪玲;陈泓杉;王盼
    地址: 610106 四川省成都市外东十陵镇
    优先权:
    专利代理机构: 51101 代理人: 余丽生
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201910027791

    授权公告号:

    法律状态公告日:

    20190419

    法律状态类型:

    公开

    摘要

    本发明公开了一种获得高生物产量的羌活细胞培养方法,该方法包括如下步骤:羌活丛生芽诱导→愈伤组织的诱导培养→羌活细胞的悬浮培养→细胞的继代培养。本发明可实现大规??焖偕鲇行С煞趾扛叩那蓟钕赴嘌?,从而有效解决当前羌活植物资源和药材资源短缺的问题。

    权利要求书

    1.一种获得高生物产量的羌活细胞培养方法,其特征在于包括如下步骤: (1)羌活丛生芽诱导:选取羌活植物根茎上生长的健康、无病虫害的不定芽作为外植体,将其进行消毒处理后接种到丛生芽诱导培养基1/2MS+ZT2.0~5.0mg/L+NAA 0.2~0.5mg/L+LH300~600mg/L+琼脂6.8g/L中,在培养温度20~25℃、每天光照10~15h、光照强度1000~1500lx条件下进行丛生芽诱导培养; (2)愈伤组织的诱导培养:取丛生芽2个为一组接入愈伤组织诱导培养基B5+2,4-D 1.0~3.0mg/L+6-BA 0.5~1.0mg/L+IAA 0.5~1.5mg/L+活性炭30~60g/L+琼脂6.8g/L中,在培养温度18~22℃、每天光照4~8h、光照强度500~800lx条件下进行愈伤组织诱导培养; (3)羌活细胞的悬浮培养:选取生长良好、颜色为黄白色且质地疏松的愈伤组织,以20~40g/L的接种量接入羌活细胞悬浮培养基改良MS+6-BA 0.1~0.5mg/L+IAA 1.0~3.0mg/L+NAA 0.5~1.5mg/L+PVP 5.0~15.0g/L+苯丙氨酸200~600μmol/L中,在培养温度20~28℃、每天光照6~10h、光照强度600~1000lx及摇床转数100~140r/min的条件下进行羌活细胞的悬浮培养,所述改良MS是指NH4NO3含量为825mg/L、KNO3含量为950mg/L的MS培养基; (4)细胞的继代培养:羌活细胞悬浮培养20~40天继代一次,接种量、培养基和培养条件与步骤(3)相同; 上述所有培养基的pH值为5.8~6.2、蔗糖25~35g/L。 2.根据权利要求1所述的获得高生物产量的羌活细胞培养方法,其特征在于:步骤(1)中所述消毒处理是指将作为外植体的羌活植物根茎上的不定芽先用浓度为70%的酒精消毒10~30s,再用浓度为0.1%的升汞消毒4~8min,最后用无菌水冲洗3~5次。

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