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    重庆时时彩后三组选: 一种免疫抗体及其制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201910036677

    申请日:

    20190115

    公开号:

    CN109627332A

    公开日:

    20190416

    当前法律状态:

    公开

    有效性:

    审中

    法律详情: 公开
    IPC分类号: C07K16/12;C07K16/06 主分类号: C07K16/12;C07K16/06
    申请人: 深圳康体生命细胞技术有限公司
    发明人: 吴勇刚
    地址: 518000 广东省深圳市龙岗区南湾街道南新路13号C栋206室
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201910036677

    授权公告号:

    法律状态公告日:

    20190416

    法律状态类型:

    公开

    摘要

    本发明涉及免疫抗体技术领域,且公开了一种免疫抗体及其制备方法,通过从兔子体内抽取样本血液进行多次免疫所产生的抗体,具体步骤:步骤一:动物的选择,步骤二:抗原的选择,步骤三:佐剂和抗原乳剂的制备,步骤四:免疫,步骤五:抗血清的制备。该免疫抗体及其制备方法,通过对兔子进行三个阶段的免疫,能够制备出高纯度的免疫抗体,特异性强、效价高和亲和力强,通过规范的从兔子的体内取样品血,使得取出的免疫抗体不受到细菌污染,提高了免疫抗体的纯度。

    权利要求书

    1.一种免疫抗体及其制备方法,其特征在于:通过从兔子体内抽取样本血液进行多次免疫所产生的抗体。 2.一种免疫抗体的制备方法,具体步骤如下: 步骤一:动物的选择,选择2-3个月以上的兔子,免疫作好标号,然后再进行分笼饲养; 步骤二:抗原的选择,将抗原(纤维素酶)稀释为4mg/ml,即可与佐剂混合制成乳剂用于兔子免疫; 步骤三:佐剂和抗原乳剂的制备,佐剂完全福氏佐剂:轻矿物油(石腊油)8.5ml,羊毛脂1.5ul,灭活结核杆菌10mg,抗原乳剂制备; (1)油剂:矿物油和羊毛脂按比例混合,高压8磅20分钟灭菌后作为油剂,使用前微火融化; (2)水剂:灭活结核杆菌1mg/ul+抗原4mg/ml; (3)油剂和水剂1:1混合; 步骤四:免疫,再兔子的耳动脉皮下多点注射,每点0.1m1,第一次免疫:实验组在兔子体内加佐剂的抗原, A组5只(头部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml磷酸缓冲液; B组5只(尾部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml2mg/ml纤维素南液; C组8只(中部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml加佐剂的抗原乳剂; 第二次免疫:第3周实验组兔子不加佐剂抗原, A组5只(头部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml磷酸缓冲液; B组5只(尾部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml2mg/ml纤维素醇液; C组8只(中部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml2mg/ml纤维素酶液; 第三次免疫:第二次免疫后1周,实验组兔子不加佐剂抗原, A组5只(头部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml磷酸缓冲液; B组5只(尾部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml2mg/ml纤维素酶液; C组8只(中部有黄色):每只兔子耳动脉皮下多点注射,共计注射0.4ml2mg/ml纤维素醇液; 步骤五:抗血清的制备,第三次免疫,一周后,从兔子的耳动脉皮下或心脏取样品血,收集的血液置于室温下1h左右,凝固后,置4℃下,过夜(切勿冰冻)析出血清,离心,4000rpa,10min,在无菌条件,吸出血清,然后用带有相同表位的抗原(带有表位2)进行反应,以除去非特异性抗体,获得针对(表位2)的特异性免疫抗。 3.根据权利要求2所述的一种免疫抗体的制备方法,其特征在于:所述油剂和水剂的混合方式为研磨或者注射器混合。 4.根据权利要求2所述的一种免疫抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤五中吸出的血清进行分装(0.05~0.2ul),贮于-40℃以下冰箱,或冻干后贮存于4℃冰箱保存。 5.根据权利要求2所述的一种免疫抗体及其制备方法,其特征在于:所述灭活结核杆菌和抗原均为终浓度。 6.根据权利要求2所述的一种免疫抗体及其制备方法,其特征在于:所述取样品血的步骤为:将兔子的耳朵露于箱笼外,也可由另一人捉住免身,剪去耳缘的毛,用少许二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管扩张、充血,用手轻拉耳尖,以单面剃须刀或尖的手术刀片,快速切开耳朵动脉,血液即流出,每次可收集30~40ml,然后用棉球压迫止血,凝血后洗去二甲苯,二星期后,可在另一耳朵放血,此法可反复多次放血,放血过程中要严格按无菌要求进行。

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    一种 免疫 抗体 及其 制备 方法
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