• 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
    • / 9
    • 下载费用:30 金币  

    重庆时时彩老走势图: 一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法.pdf

    关 键 词:
    一种 检测 氧化 密度 脂蛋白 损伤 小鼠 肠系膜 动脉 内皮 依赖性 舒张 功能 机制 方法
      专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    摘要
    申请专利号:

    CN201410174962.9

    申请日:

    2014.04.29

    公开号:

    CN103940984A

    公开日:

    2014.07.23

    当前法律状态:

    撤回

    有效性:

    无权

    法律详情: 发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):G01N 33/50申请公布日:20140723|||专利申请权的转移IPC(主分类):G01N 33/50变更事项:申请人变更前权利人:李洁变更后权利人:郴州市第一人民医院变更事项:地址变更前权利人:423000 湖南省郴州市北湖区罗家井102号变更后权利人:423000 湖南省郴州市北湖区罗家井102号变更事项:申请人变更前权利人:林杰 王俊杰登记生效日:20150225|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/50申请日:20140429|||公开
    IPC分类号: G01N33/50; G01N23/22 主分类号: G01N33/50
    申请人: 李洁; 林杰; 王俊杰
    发明人: 李洁; 陈根; 林杰; 王俊杰; 阳建军; 黄晓亮
    地址: 423000 湖南省郴州市北湖区罗家井102号
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410174962.9

    授权公告号:

    |||||||||

    法律状态公告日:

    2016.07.06|||2015.03.25|||2014.08.27|||2014.07.23

    法律状态类型:

    发明专利申请公布后的视为撤回|||专利申请权、专利权的转移|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法,采用离体微血管张力描记,透射电镜观察血管内皮超微结构。结果显示mmLDL致小鼠肠系膜动脉内皮细胞明显水肿、内弹力膜断裂,显著抑制EDHF介导的舒张;显著抑制NO介导的舒张;对PGI2介导的舒张功能无明显影响,mmLDL损伤内皮细胞超微结构;显著降低内皮依赖性舒张功能与NO-和EDHF途径受损有关。本发明方法灵敏高效,操作简单,且对环境友好。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法,包括采用离体微血管张力描记和透射电镜观察血管内皮超微结构。

    2.  如权利要求1所述的方法,其中,所述方法包括以下具体步骤:动物实验、检测血管环收缩和舒张功能、检测血管内皮完整性以及统计学分析。

    说明书

    说明书一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法
    技术领域
    本发明涉及一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法。
    背景技术
    血管内皮细胞广泛分布于血管内层,具有多种生理功能,能分泌血管舒张因子和收缩因子,在调节血管张力和血管内环境稳态方面有重要作用。内皮细胞功能障碍是众多心血管疾病如动脉粥样硬化、高血压等疾病的发病共同环节和关键。内皮依赖性舒张(endothelium-dependent relaxation,EDR)主要由一氧化氮(nitric oxide,NO)-、前列环素(prostacyclin I2,PGI2)-、内皮衍生超极化因子(endothelium derived hyperpolarizing factor,EDHF)三条途径构成[1-4]。EDHF途径介导血管舒张反应与细胞膜上的钙激活钾通道开放、促进钾离子外流有关。钙激活钾通道主要由小电导钙激活钾通道(small-conductance calcium-activated potassium channel,SKca)、中电导钙激活钾通道(intermediate-conductance calcium-activated potassium channel,IKca)和大电导钙激活钾通道(big-conductance calcium-activated potassium channel,BKca)组成。经典的EDHF激活方式有两种,可以通过激活IKca和SKca[5]开放引起超极化,继而激活下游微区信号通路[6-8]和肌一内皮缝隙连接[9]进而引起血管平滑肌细胞舒张;另一种则不涉及内皮细胞超极化,但涉及到NO、HNO、环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)等内皮源性因子的释放,它们直接作用于平滑肌细胞上的BKca等钾离子通道,从而引起血管平滑肌舒张[10]。有文献报道NO-,EDHF-,PGI2三条途径对机体不同部位血管张力的调节作用有明显差异[11,12]。
    弱氧化低密度脂蛋白(minimally modified low density lipoprotein,mmLDL)是指仅有脂质部分被氧化、载脂蛋白中赖氨酸残基结构未被破坏的LDL。mmLDL促进氧化型低密度脂蛋白大量产生,诱导血管内皮细胞损伤和平滑肌细胞的增殖,但机制还不明了。近期我们研究发现,mmLDL可以上调大鼠脑基底动脉[13]和冠状动脉[14]内皮素B受体(endothelin Breceptor,ETBR),在功能上表现为ETBR 介导的收缩性增强。mmLDL对整体动物的阻力血管EDR和超微结构的影响尚不清楚。本实验考察尾静脉注射mmLDL对小鼠肠系膜动脉EDR的影响及作用机制,同时观察其对内皮细胞超微结构的影响。
    发明内容
    本发明的目的在于采用离体微血管张力描记技术,透射电镜观察血管内皮超微结构,提供一种研究mmLDL对小鼠肠系膜动脉EDR的影响及作用机制的方法。
    材料与方法
    1.1主要试剂mmLDL、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、L-Nω-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)、吲哚美辛(indomethacin,Indo)、apamin、charybdotoxin(ChTX)、二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)均为美国Sigma公司产品。除了Indo用DMSO初溶外,其余均用Krebs液溶解,并且所有试剂在使用前均用Krebs液稀释到所需浓度。实验中使用的水为超纯水、其它化学试剂均为分析纯。
    1.2仪器DMT610M微小血管张力测定仪(Danish Myo Technology A/S,DMT,丹麦)、Powerlab生物信号采集和分析系统(埃德仪器有限公司,澳大利亚)、欧-卡XSP-C系列生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)、显微手术解剖工具(World Precision Instruments,WPI,美国)、透射电子显微镜(TEM,H7650,HITACHI,日本)、电子天平(BP211D,Startorius公司)、微量移液器(Dragonmed,芬兰)、HH-2型电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司)、SHZ-D循环水式真空泵(巩义予华仪器有限公司)、QL-901Vortex震荡混匀器(海门其林贝尔仪器制造有限公司)、LG冰箱、优普纯水机(成都优普纯水设备有限公司)。
    1.3方法
    1.3.1动物及实验设计
    动物ICR小鼠(8-10周龄),SPF级,(20-24)g,雌、雄各半,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,动物使用许可证:SYXK(陕)2012-005。实验组以1mg/kg尾静脉注射mmLDL,第1次注射即开始计时,以后每12h重复一次,并分别于24h(0h,12h各注射一次)、48h(0h,12h,24h,36h各注射一 次)、72h(0h,12h,24h,36h,48h,60h各注射一次)、96h(0h,12h,24h,36h,48h,60h,72h,84h各注射一次)将小鼠颈部脱臼处死后观察mmLDL对血管EDR的影响??疾靘mLDL对血管EDR影响的量效关系时,设立0.5mg/kg、1mg/kg、2rmg/kg mmLDL组。实验设2个对照组,分别为尾静脉注射生理盐水组或者LDL组。
    1.3.2血管环收缩、舒张功能检测
    小鼠脱臼处死后,迅速取出含有肠系膜动脉的组织,浸入冷Na+-Krebs液(含mmol/L:NaCl119、NaHCO315、KCl4.6、MgCl21.2、NaH2PO41.2、无水CaCl21.5和葡萄糖5.5)中,在显微镜下剔除肠系膜动脉周围的结缔组织,将处理好的血管剪切成约1-2mm长的圆筒环,并在显微镜下将动脉环套在DMT的两根金属丝上,其中一根连接张力换能器,另一根连接微调装置(可调节负荷张力),通过张力换能器与PowerLab系统相连,记录血管收舒曲线。血管环置于充满Na+-Krebs液的37℃恒温水浴槽中,并持续接通混合气体(95%O2,5%CO2),使氧饱和,pH维持在7.4[15]。保持静息张力为1mN,每隔20min更换一次Krebs液,平衡1.5h。加K+-Krebs液(含mmol/L:NaCl60、NaHCO315、KCl63.5、MgCl21.2、NaH2PO41.2、CaCl21.5和葡萄糖5.5)检验血管环的收缩活性,冲洗3次后,重复上一步骤。当两次收缩高度大于1mN并且两次收缩幅度相差在10%以内者才可用于后续实验。
    浓度累加法加入5-HT(10-9~10-4mol/L),考察mmLDL对5-HT收缩血管功能的影响。预实验显示与对照组比较,mmLDL基本不影响5-HT诱导的收缩量效曲线,而且20μmol/L5-HT可以引起血管强而稳定的收缩达1h,我们选择5-HT为预收缩剂。20μmol/L5-HT预收缩血管环,浓度累加法加入ACh(3×10-10~10-4mol/L)可诱导血管环产生EDR,当舒张值低于预收缩值的85%时,认为血管EDR受损。浓度累加法加入硝普钠(sodium nitroprusside,SNP3×10-11~10-5mol/L)诱导血管非内皮依赖性舒张,考察血管平滑肌的舒张功能。
    为考察mmLDL影响血管EDR的作用机制,我们使用了三条途径的拮抗剂。在浴槽中预先加入PGI2途径抑制剂Indo(10-5mol/L)、NO途径抑制剂L-NAME(10-4mol/L)、大电导和中电导钙激活钾通道抑制剂ChTX(5×10-8mol/L)、小电导钙激活钾通道抑制剂apamin(10-6mol/L)可以完全阻断累加ACh引起的血 管EDR[15-17]。在浴槽中预先分别加入通路抑制剂,孵育30min,加入5-HT预收缩,浓度累加法加入ACh,分别考察NO-、PGI2-和EDHF途径介导的内皮舒张功能;并考察EDHF途径中SKca,IKca和BKca介导的舒张功能。
    1.4血管内皮完整性的形态学检查
    mmLDL组和生理盐水组肠系膜动脉取出、分离后切开,立即放置在2.5%的戊二醛固定液中,并于4℃环境中固定6h。0.1M磷酸缓冲液洗涤,1%四氧化锇固定2h后洗涤、脱水;70%乙醇醋酸双氧铀块染色过夜后环氧丙烷置换;环氧树脂Epon812浸透、包埋,聚合后作半超薄切片1-2μ,美兰染色后光学显微镜下定位,用透射电镜(日本日立H-600)观察、拍照。
    1.5统计学分析
    用Rmax(最大松弛百分率)和pICs0(产生一半最大松弛百分率时所需要ACh浓度的负对数)来描述EDR反应的特征性。

    所有数据都以均值±标准误表示。舒张剂的浓度-效应曲线根据迭代最小二乘法契合出的Hill方程(GraphPad Prism5.0统计软件)估算其Rmax和pIC50值。双向方差分析(ANOVA)和Bonferroni后检验用于比较两条曲线在相同浓度处产生的舒张值之间的差异。SPSS18.0统计软件进行数据分析,非配对Students′t检验和Welch′s校正用于比较Rmax或pIC50值在不同组别间的差异。P<0.05被认为差异有统计学意义。
    本发明的优点在于:本发明方法灵敏高效,操作简单,且对环境友好。
    具体实施方式
    1mmLDL影响EDR的时效和量效关系
    考察mmLDL影响肠系膜动脉EDR的时间-效应关系,实验组按1mg/kg的剂量尾静脉注射mmLDL。结果显示,与对照组相比,随着时间的延长mmLDL对EDR影响越明显,表明mmLDL对血管EDR的影响呈时间依赖性。在24h,EDR略有降低;48h降低加重,但均无统计学意义;72h,EDR出现显著性降低;96h,EDR进一步降低,但与72h比较,没有统计学意义。
    进一步考察mmLDL(剂量分别为0.5mg/kg,1mg/kg,2mg/kg)72h后,mmLDL对肠系膜动脉EDR的剂量-效应关系,结果显示,在实验组,mmLDL尾静脉注射对EDR的影响随着剂量的增大而加强,表明mmLDL对血管EDR的影响呈剂量依赖性。与对照组相比,0.5mg/kg剂量组EDR略有降低,无统计学意义;1mg/kg剂量组出现显著性降低;2mg/kg剂量组EDR进一步降低,但与1mg/kg剂量组相比无统计学意义。尾静脉注射1mg/kg LDL可以略降低EDR,但是与对照组比无统计学意义。故选择剂量为1mg/kg,时间点为72h来考察mmLDL对小鼠肠系膜EDR的影响,实验结果表明Rmax和pIC50较对照组均显著降低(P<0.001,P<0.01)。
    2mmLDL对血管收缩反应和舒张反应影响
    mmLDL组,生理盐水组血管环对63.5mmol/L K+的收缩值分别为3.88±0.67mN和3.91±0.69mN(P>0.05,n=8)。mmLDL组对5-HT诱导的Emax值(1024-9)%,pEC506.60±0.05,对照组Emax值(1064±8)%,pEC506.57+0.06,(P>0.05,P>0.05,n=8)两组收缩量效曲线几乎重合。浓度累加法加入SNP得到的浓度舒张量效曲线显示,mmLDL不影响SNP诱导的非内皮依赖性舒张。
    3mmLDL对PGI2途径的影响
    使用L-NAME,ChTX和apamin孵育浴槽中动脉环30min,考察mmLDL对PGI2途径的影响。与对照组相比,mmLDL组PGI2途径介导的舒张曲线略有左移,但Rmax值和pIC50均没有显著性差异。
    4mmLDL对EDHF途径的影响
    用L-NAME和Indo孵育浴槽中动脉环30min,考察mmLDL对EDHF途径的影响。与对照组相比,mmLDL组EDHF介导的EDR显著降低,舒张曲线明显非平行右移,Rmax值和pIC50显著降低(P<0.001,P<0.001,n=8)。
    5mmLDL对NO途径的影响
    用Indo,ChTX和apamin孵育浴槽中动脉环30min,考察mmLDL对NO途径的影响。相对于对照组,mmLDL组NO介导的EDR显著降低,Rmax值和pIC50明显降低(P<0.05,P<0.01,n=8)。
    6mmLDL对SKca通道的影响
    用Indo,L-NAME和ChTX孵育血管环30min,考察mmLDL对SKca通道的影响。与对照组相比,mmLDL组SKca通道介导的舒张作用显著降低,Rmax值和pIC50明显降低(P<0.001,P<0.001,n=8)。
    7mmLDL对IKca和BKca途径的影响
    用Indo,L-NAME和apamin孵育浴槽中动脉环30min,考察mmLDL对BKca和IKca通道的影响。与对照组相比,mmLDL组BKca和IKca通道共同介导的舒张作用显著降低,Rmax值和pIC50明显降低(P<0.001,P<0.01,n=8)。
    8mmLDL对肠系膜动脉内皮细胞超显微结构的影响
    透射电镜结果显示,生理盐水组血管内皮细胞超微结构正常;mmLDL组的血管内皮细胞细胞质内有空泡形成,且内皮细胞与弹力膜逐渐分离,局部弹力层有断裂现象。
    讨论
    心血管疾病的发生常常与危险因子引起内皮功能障碍密切相关。ACh介导的血管EDR反应主要是通过NO-、PGI2-和EDHF这三条途径介导。有研究报道,这三条途径在不同管径的血管中作用有所不同,如PGI2途径在不同血管中的作用都比较轻微;NO途径则在像胸主动脉这一类大血管中作用突出;而EDHF途径却在小血管中占主导作用[18]。You等研究大鼠大脑中动脉三级分支,发现随着脑血管管径逐渐变细,NO介导的舒张效应逐渐减弱,而EDHF作用逐渐占优势[19]。Bolz等观察EDHF对微循环的影响,结果显示ACh介导的舒张主要靠EDHF调节[20]。
    mmLDL在动脉粥样硬化初期起非常重要的作用[21],它作用于内皮细胞激活蛋白激酶A可使内皮细胞和单核细胞的粘附作用增强[22]。我们近期发现,mmLDL显著增强大鼠脑基底动脉、冠状动脉ETBR介导的收缩反应,并上调ETBR的mRNA水平和蛋白水平,此作用与细胞内信号转导途径有关[13,14]。本实验考察mmLDL对血管内皮的影响,结果表明尾静脉注射mmLDL组和生理盐水组,对63.5mmol/L K+和5-HT诱导的血管环收缩基本无差异,说明mmLDL不影响K+和5-HT诱导的血管收缩。浓度累加法加入SNP,也发现mmLDL不影响由SNP诱导的非内皮依赖性舒张,表明mmLDL不影响血管平滑肌细胞介导的舒张功能。尾静脉注射mmLDL可以损伤阻力血管肠系膜动脉EDR,并且这一作用存在时间依赖和剂量依赖效应。借助透射电镜发现mmLDL引起血管内皮细胞出现水肿、脱落,局部区域还出现弹力层断裂的现象。以上实验结果从功能学和形态学方面说明了mmLDL对肠系膜动脉内皮细胞的损伤作用。
    本实验使用通路拮抗剂将三条通道全部阻断后,ACh在mmLDL组和生理盐水组基本不引起舒张反应,表明小鼠肠系膜动脉内皮依耐性舒张由PGI2-,NO-和EDHF途径共同介导,这与文献报道一致。使用通路拮抗剂考察这3条途径介导的舒张功能。实验结果显示PGI2途径在生理盐水组和mmLDL组小鼠肠系膜动脉仅引起微弱的舒张反应,仅占总舒张效应的10%左右,并且两组间没有明显差异,表明mmLDL对内皮依赖性舒张的影响不通过内皮环氧合酶系统。生理盐水组NO介导的内皮依赖性舒张约占总舒张效应的45%,尾静脉注射mmLDL后,NO介导的舒张反应降低到约占总舒张率的30%,且pIC50也显著降低,说明了mmLDL对血管内皮依赖性舒张功能的影响涉及到了NO途径。生理盐水组EDHF介导ACh诱导的内皮依赖性舒张约占总舒张效应的63%,尾静脉注射mmLDL后,EDHF介导的舒张反应降低到约占总舒张率的30%,且pIC50也显著降低,降低幅度超过30%,远远大于NO途径降低幅度,表明mmLDL主要通过降低EDHF途径损伤内皮舒张功能。
    文献报道EDHF主要调节微血管和阻力血管。采用微血管荧光造影技术观察狗的冠状动脉对ACh的反应,发现在直径大于100μm冠脉中,舒张作用由NO介导;直径小于100tm冠脉中,舒张作用由NO、EDHF共同调节[23]。我们发现生理盐水组NO途径和EDHF途径介导的内皮依赖性舒张之和超过总的舒张 率,约为110%;而尾静脉注射mmLDL组NO途径和EDHF途径介导的内皮依赖性舒张之和却小于总的舒张率;说明在小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张主要由NO途径和经典及非经典EDHF途径共同介导,当NO途径阻断后,血管中的许多内源性舒张因子(如NO、EETs等)可能并没有被完全清除,它直接作用于血管平滑肌细胞,增强血管的舒张作用[24,25]。mmLDL主要通过抑制NO-和EDHF途径损伤内皮舒张功能,对EDHF途径损伤作用更为明显。由此,我们进一步考察了mmLDL对SKca、BKca和IKca通道的影响。使用apamin阻断EDHF途径中SKca通道,同时考察BKca和IKca通道,实验数据表明,生理盐水组BKca和IKca通道介导的内皮依赖性舒张约占总舒张效应的29%,尾静脉注射mmLDL后,BKca和IKca通道介导的舒张反应显著降低,约占总舒张率的9%,且pIC50显著降低,表明mmLDL损伤EDHF途径与抑制BKca和/或IKca通道有关,其具体作用位点还有待做更进一步的研究??疾靘mLDL对SKca通道的影响,使用ChTX同时阻断EDHF途径中BKca和IKca通道,结果显示生理盐水组SKca通道介导EDHF途径约占总舒张效应的42%,尾静脉注射mmLDL后,SKca通道介导的舒张反应显著降低,约占总舒张率的20%,且pIC50也显著降低,表明正常小鼠EDHF途径主要由SKca通道介导,而mmLDL明显损伤SKca通道。
    综上所述,尾静脉注射mmLDL能损伤血管内皮细胞超微结构,损伤血管内皮依赖性舒张,损伤机制与抑制EDHF途径和NO途径有关,并且抑制EDHF途径更为明显。抑制EDHF途径与SKca通道,BKca和/或IKca通道有关。
    参考文献
    [1]Busse R,Edwards G,Feletou M,et al.EDHF:bringing the concepts together[J].Trends Pharmacol Sci,2002,23:374-380.
    [2]Furchgott RF,Zawadzki JV.The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine[J].Nature,1980,288:373-376.
    [3]Moncada S,Gryglewski R,Bunting S,et al.Enzyme Isolated from Arteries Transforms Prostaglandin Endoperoxieds To An Unstable Substance That Inhibits Platelet-Aggregation[J].Nature,1976,263:663-665.
    [4]Palmer RM,Ashton DS,Moncada S.Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginine[J].Nature,1988,333:664-666.
    [5]Alexander SPH MA,Peters JA.Guide to Receptors and Channels(GRAC),4th Edition[J].Br J Pharmacol,2009,158Suppl1:S1-254.
    [6]Absi M,Burnham MP,Weston AH,et al.Effects of methyl beta-cyclodextrin on EDHF responses in pig and rat arteries;association between SK(Ca)channels and caveolin-rich domains[J].Br J Pharmacol,2007,151:332-340.
    [7]Dora KA,Gallagher NT,McNeish A,et al.Modulation of endothelial cell KCa3.1channels during endothelium-derived hyperpolarizing factor signaling in mesenteric resistance arteries[J].Circ Res,2008,102:1247-1255.
    [8]Sandow SL,Neylon CB,Chen MX,et al.Spatial separation of endothelial small-and intermediate-conductance calcium-activated potassium channels(K(Ca))and connexins:possible relationship to vasodilator function?[J].J Anat,2006,209:689-698.
    [9]Edwards G,Feletou M,Gardener MJ,et al.Role of gap junctions in the responses to EDHF in rat and guinea-pig small arteries[J].Br J Pharmacol,1999,128:1788-1794.
    [10]Edwards G,Feletou M,Weston AH.Endothelium-derived hyperpolarising factors and associated pathways:a synopsis[J].Pflugers Arch,2010,459:863-879.
    [11]Chen G,Suzuki H,Weston AH.Acetylcholine releases endothelium-derived hyperpolarizing factor and EDRF from rat blood vessels[J].Br J Pharmacol,1988,95:1165-1174.
    [12]Clark SG,Fuchs LC.Role of nitric oxide and Ca++-dependent K+channels in mediating heterogeneous microvascular responses to acetylcholine in different vascular beds[J].J Pharmacol Exp Ther,1997,282:1473-1479.
    [13]Li J,Cao YX,Liu Y,et al.Minimally modified LDL upregulates endothelin type B receptors in rat basilar artery[J].Microvasc Res,2012,83:178-184.
    [14]Jie L,Yong-Xiao C,Zu-Yi Y,et al.Minimally modified LDL upregulates endothelin type B receptors in rat coronary artery via ERK1/2MAPK and NF-kappaB pathways[J].Biochim Biophys Acta,2012,1821:582-589.
    [15]Li J,Cao YX,Liu H,et al.Enhanced G-protein coupled receptors-mediated contraction and reduced endothelium-dependent relaxation in hypertension[J].European Journal of Pharmacology,2007,557:186-194.
    [16]Li J,Cao YX,Cao L,et al.Heat stress alters G-protein coupled receptor-mediated function and endothelium-dependent relaxation in rat mesenteric artery[J].Eur J Pharmacol,2008,588:280-285.
    [17]Zhang JY,Cao YX,Xu CB,et al.Lipid-soluble smoke particles damage endothelial cells and reduce endothelium-dependent dilatation in rat and man[J].BMC Cardiovasc Disord,2006,6:3.
    [18]Shimokawa H,Yasutake H,Fujii K,et al.The importance of the hyperpolarizing mechanism increases as the vessel size decreases in endothelium-dependent relaxations in rat mesenteric circulation[J].Journal of Cardiovascular Pharmacology,1996,28:703-711.
    [19]You J,Johnson TD,Marrelli SP,et al.Functional heterogeneity of endothelial P2purinoceptors in the cerebrovascular tree of the rat[J].Am J Physiol,1999,277:H893-900.
    [20]Bolz SS,de Wit C,Pohl U.Endothelium-derived hyperpolarizing factor but not NO reduces smooth muscle Ca2+during acetylcholine-induced dilation of microvessels[J].Br J Pharmacol,1999,128:124-134.
    [21]Liao F,Berliner JA,Mehrabian M,et al.MINIMALLY MODIFIED LOW-DENSITY-LIPOPROTEIN IS BIOLOGICALLY-ACTIVE INVIVO IN MICE[J].Journal of Clinical Investigation,1991,87:2253-2257.
    [22]Honda HM,Leitinger N,Frankel M,et al.Induction of monocyte binding to endothelial cells by MM-LDL-Role of lipoxygenase metabolites[J].Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology,1999,19:680-686.
    [23]Nishikawa Y,Stepp DW,Chilian WM.In vivo location and mechanism of EDHF-mediated vasodilation in canine coronary microcirculation[J].American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology,1999,277:H1252-H1259.
    [24]Andrews KL,Irvine JC,Tare M,et al.A role for nitroxyl(HNO)as an endothelium-derived relaxing and hyperpolarizing factor in resistance arteries[J].British Journal of Pharmacology,2009,157:540-550.
    [25]Ellis A,Goto K,Chaston DJ,et al.Enalapril Treatment Alters the Contribution of Epoxyeicosatrienoic Acids but Not Gap Junctions to Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor Activity in Mesenteric Arteries of Spontaneously Hypertensive Rats[J].Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics,2009,330:413-422.

    关于本文
    本文标题:一种检测弱氧化低密度脂蛋白损伤小鼠肠系膜动脉内皮依赖性舒张功能及机制的方法.pdf
    链接地址://www.4mum.com.cn/p-6143430.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

    [email protected] 2017-2018 www.4mum.com.cn网站版权所有
    经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
     


    收起
    展开
  • 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
  • 北京pk拾稳赚技巧 内蒙古时时计划软件手机版下载 七星彩有哪些固定规律 pk10全包稳赚投注技巧冠亚和稳赚 福建时时开奖时间 pk10最牛稳赚计划软件 足彩2串1稳赚模式 pk10精准高手计划群 幸运pc28加拿大结果参考 山东时时是什么意思是什么意思是什么意思是什么 幸运飞艇稳赚技巧公式 3d两胆必下一个 三个骰子比大小怎么玩 3d两胆必下一毒胆今天 浙江31选7走势图300期 包六肖是怎样中几个算中