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    重庆时时彩后二计划手机软件: 一种光催化可视化现场检测水样中HGSUP2/SUP方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410215456.X

    申请日:

    2014.05.21

    公开号:

    CN103983637A

    公开日:

    2014.08.13

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/78申请日:20140521|||公开
    IPC分类号: G01N21/78 主分类号: G01N21/78
    申请人: 成都理工大学
    发明人: 张信凤; 刘微微; 许淑霞; 张惠
    地址: 610059 四川省成都市成华区二仙桥东三路1号
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410215456.X

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2016.10.05|||2014.09.10|||2014.08.13

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    一种光催化可视化现场检测水样中Hg2+方法,主要是利用Hg2+与胸腺嘧啶(T)特异性结合形成T-Hg2+-T结构,使两条富T的寡核苷酸链错配形成双链。溴化乙锭(EB)可嵌入该双链中,在绿色LED灯的照射下氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)成蓝色。通过观察溶液的颜色变化,实现对汞离子的半定量分析。该法用肉眼可检测水样中低至0.05ngmL-1Hg2+,可满足生活饮用水、农田灌溉水等水样中Hg2+的测定要求(<1ngmL-1)。本发明具有良好的选择性、极高的灵敏度、无需复杂的分离富集过程,可直接用于Hg2+的现场分析。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种光催化可视化现场检测水样中Hg2+的方法,其特征在于包括以下三个步骤:
    (1)在干净的培养板中依次加入适配体溶液、磷酸二氢钾(PBS)缓冲溶液、溴化乙锭溶液(EB)、Hg2+标准溶液/环境水样,在室温下避光孵育一段时间;
    (2)在(1)所述的混合溶液中加入3, 3', 5, 5'-四甲基联苯胺(TMB)溶液,用LED灯照射一段时间,实现光催化氧化TMB显色;
    (3)?。?)所述的溶液进行观察,对比环境水样与标准系列的颜色,得到水样中Hg2+的浓度,从而判断环境水样中的Hg2+否超过国家标准规定值。

    2.   按权利要求1所述的方法,其特征在于所选错配适配体序列分别为5’-CGCATTCAGGATTCTCTACTCGTA-3’,5’-TTCGTGTTGTGTTTCC TGTTTGCG-3’。

    3.  按权利要求1所述的方法,其特征在于避光孵育时间为10-40 min。

    4.  按权利要求1所述的方法,其特征在于光照时溶液的pH为3.5-5.0。

    5.  按权利要求1所述的方法,其特征在于LED灯颜色为绿色,光照时间为10-40 min。

    说明书

    说明书一种光催化可视化现场检测水样中Hg2+方法
    技术领域
    本发明涉及一种水样中Hg2+的现场可视化检测方法,属于环境分析、生物传感技术领域。
    背景技术
    Hg2+是高毒性的重金属离子之一,摄入高浓度的Hg2+会对大脑、神经系统、内分泌系统及其它器官造成严重的损伤。传统的汞离子检测方法主要有原子吸收法、原子发射法、原子荧光法、电感耦合等离子质谱法等。然而,这些方法涉及使用昂贵的仪器、无法现场分析Hg2+。近年来,研究表明Hg2+能特异性地与寡核苷酸链中的胸腺嘧啶(T)共价结合形成稳定的T-Hg2+-T结构?;贖g2+的这一特性,已发展金纳米粒子可视化法测定Hg2+(Li L., Li B. X., Qi Y. Y., Jin Y., Anal Bioanal Chem, 2009, 393, 2051 -2057)、脱氧核酶催化显色法(Li T., Li B., Wang E., Dong S., Chem. Commun. 2009, 24, 3551-3553)。这些方法虽简便、快速且具有极高的选择性,但灵敏度不高,难以直接用于野外/现场分析水样中Hg2+含量是否超标。
    发明内容
    本发明的目的在于利用溴化乙锭可嵌入T-Hg2+-T错配双链DNA中,形成的溴化乙锭-双链DNA复合物具有极高的光催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)能力这一特性,提供一种高灵敏、高选择性地现场检测的环境水样中Hg2+的方法。
      本发明的技术方案如下:
    (1)在干净的培养板中依次加入两条序列为5’-CGCATTCAGGATTCTCTACTCGTA-3’,5’-TTCGTGTTGTGTTTCC TGTTTGCG-3’的DNA溶液、汞溶液、pH4.0的PBS缓冲溶液、溴化乙锭溶液(EB),在室温下避光孵育15 min;
    (2)在上述混合溶液中加入TMB溶液,用绿色LED灯照射15 min,进行光催化氧化TMB,产生蓝色的溶液;
    (3)取光照后的溶液进行观察,对比环境水样与标准系列的颜色,得到水样中Hg2+的浓度,判断环境水样是中的Hg2+否超过国家标准规定值。
    本发明中也可以选用紫外-可见分光光度计测量溶液的吸光度,实现准确测定水样中Hg2+的浓度。
     
    发明效果
    与现有技术相比,本发明具有如下优点:
    (1)测定过程方法无需标记、方法简单、快速;
    (2)利用LED灯进行催化氧化,无需外加氧化剂(如H2O2);
    (3)灵敏度极高,可实现对低至0.05 μg L-1 Hg2+的可视化检测;
    (4)无需复杂的分离、富集步骤,可直接用于判断水体中Hg2+是否超过国家标准规定值。
     
    具体实施方式  
    实施例1
           在干净的培养板中依次加入10 μL浓度为10 μmol L-1的DNA溶液(序列为5’-CGCATTCAGGATTCTCTACTCGTA-3’,5’-TTCGTGTTGTGTTTCCTGTTTGCG-3’)、1mL不同浓度的Hg2+标准溶液/环境水样、100 μL浓度为2 mmol L-1溴化乙锭溶液(最终浓度为100 μM)、0.89 mL 浓度为0.2 mol L-1的PBS缓冲溶液(pH=4.0),在室温下避光孵育15 min;之后,向混合溶液中加入40 μL 浓度为10 mg mL-1的 TMB溶液,用绿色LED灯照射15 min,光催化氧化TMB显色;对比环境水样与标准系列的颜色,得到水样中Hg2+的浓度范围,判断环境水样中的Hg2+是否超过国家标准规定值。
     
    实施例2
           在干净的培养板中依次加入10 μL 浓度为10 μM DNA溶液(序列为5’-CGCATTCAGGATTCTCTACTCGTA-3’,5’-TTCGTGTTGTGTTTCCTGTTTGCG-3’)、1mL不同浓度的Hg2+标准溶液/环境水样、0.89 mL 浓度为0.2 mol L-1的PBS缓冲溶液(pH=4.5)、100 μL浓度为4 mM的溴化乙锭溶液(最终浓度为50 μM),,在室温下避光孵育30 min;加入40 μL 浓度为10 mg mL-1的TMB溶液,用绿色LED灯照射30 min;对比环境水样与标准系列的颜色,得到水样中Hg2+的浓度范围,判断环境水样中的Hg2+是否超过国家标准规定值。
     
      采用实施例1、2测得饮用水、自来水、灌溉水、标准水样(GSBZ 50016-90)中Hg2+的浓度见表1,与原子荧光法测定值或标准水样参考值吻合良好,表明测定结果可靠。而且,测定的饮用水、自来水、东风渠水中的Hg2+浓度均小于1 ng mL-1,符合生活饮用水国家标准(GB5749)、农田灌溉水国家标准(GB5084)。
     
    表1 实际样品中汞离子的检测检测结果
    样品可视化法(ng mL-1)原子荧光法测定值或参考值(ng mL-1)饮用水< 1 0.37 ± 0.06自来水< 1 0.58 ± 0.07东风渠水< 1 0.78 ± 0.08GSBZ 50016-90标准水样1-10 5.02 ± 0.51

    关 键 词:
    一种 光催化 可视化 现场 检测 水样 HGSUP2 SUP 方法
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