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    重庆时时彩过年停吗: 一种纳米金免疫层析毛细管的制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410112602.6

    申请日:

    2014.03.25

    公开号:

    CN103983769A

    公开日:

    2014.08.13

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/543申请日:20140325|||公开
    IPC分类号: G01N33/543 主分类号: G01N33/543
    申请人: 中国海洋大学
    发明人: 曹立民; 杜淑媛; 隋建新; 林洪; 王静雪
    地址: 266100 山东省青岛市崂山区松岭路238号
    优先权:
    专利代理机构: 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 代理人: 尉伟敏
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410112602.6

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2015.11.18|||2014.09.10|||2014.08.13

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种纳米金免疫层析毛细管的制备方法,利用化学键交联的方法对毛细玻璃管内壁进行修饰,将质控区和检测区固定在毛细管内壁的特定区域,组装了一种新型的免疫层析毛细管。本发明以玻璃材质的毛细管为基底,较硝酸纤维素膜、纸质材料和线性材料更稳定,基底材料更稳固不易脱落,更不易受环境因素的影响,可以显著地减少批间和批内差异,组装过程相对简单,且组装过程中不需要使用大型仪器,修饰、组装技术简单易掌握。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种纳米金免疫层析毛细管的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
    (1)毛细管的处理:将毛细管浸入piranha溶液中超声清洗15-20min,超纯水清洗至中性,干燥,冷却,然后将毛细管依次浸入KOH溶液、超纯水、HCl溶液、超纯水及有机溶剂中分别超声清洗10-15min,然后烘干;
    (2)毛细管的修饰:将GPTMS和三乙胺溶于无水甲苯中得修饰液,使得GPTMS的终浓度为8vol%-15vol%,三乙胺的终浓度为1vol%-2vol%,将步骤(1)处理所得毛细管浸没于修饰液中室温下干燥环境中反应18h-25h,排出毛细管内的修饰液,室温下干燥环境中保持2-3h,然后将毛细管浸入无水甲苯中上下抽动清洗5-7min,接着将毛细管浸入丙酮中上下抽动清洗5-7min,氮气气氛下干燥;
    (3)免疫层析毛细管的组装:将作为检测区的抗原和作为质控区的二抗分别注入步骤(2)处理得到的毛细管的两端,25-30℃下固定1.5-2.5 h,将毛细管浸入于PBST缓冲液中抽动清洗3-5min,重复清洗三次,1-2wt%的BSA溶液注满毛细管,在30-37℃下反应1.5-2h,将毛细管浸入于PBST缓冲液中抽动清洗3-5min,重复清洗三次,干燥后获得免疫层析毛细管。

    2.  根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中的有机溶剂为丙酮或乙醇。

    3.  根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述piranha溶液的制备方法为:95 wt %-98wt%浓硫酸与30wt%双氧水按照3-4:1的体积比混合,混合时将双氧水溶液缓慢加入浓硫酸中,不断搅拌以保持混合液的温度在80℃以下。

    4.  根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中KOH溶液浓度为0.8-1.2mol/L,HCl溶液浓度为0.8-1.2mol/L。

    5.  根据权利要求1或2或3或4所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)无水甲苯的制备方法为:甲苯中加入无水硫酸钠静置10-24h,抽滤除去无水硫酸钠,然后加入金属钠丝,同时加入二苯甲酮作为指示剂,加热回流2-3h,然后常压蒸馏,收集111±1℃的馏分得无水甲苯。

    6.  根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:无水硫酸钠用量为5-10g/100mL甲苯,金属钠丝用量为0.5-1g/100mL甲苯,二苯甲酮用量为0.1-0.5g/100mL甲苯。

    7.  根据权利要求1或2或3或4所述的制备方法,其特征在于:所述抗原为小清蛋白,二抗为羊抗兔二抗。

    8.  根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于:小清蛋白与PBS缓冲液配制成浓度0.1-0.25 mg/mL的小清蛋白溶液后注入毛细管,羊抗兔二抗与PBS缓冲液配制成浓度0.2-0.3 mg/mL的羊抗兔二抗溶液后注入毛细管。

    9.  根据权利要求8所述的组装方法,其特征在于:小清蛋白溶液注入毛细管的用量为3-6μL,羊抗兔二抗溶液注入毛细管的用量为3-6μL。

    关 键 词:
    一种 纳米 免疫 层析 毛细管 制备 方法
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