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    重庆时时彩玩法群: 一种用于直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410154389.5

    申请日:

    2014.04.17

    公开号:

    CN103954749A

    公开日:

    2014.07.30

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/53申请日:20140417|||公开
    IPC分类号: G01N33/53; C07K14/795; C07K14/77; C07K14/765; C07K16/44 主分类号: G01N33/53
    申请人: 华南农业大学
    发明人: 孙远明; 刘凤银; 徐振林; 沈玉栋; 雷红涛; 王弘; 杨金易; 肖治理
    地址: 510642 广东省广州市天河区五山路483号
    优先权:
    专利代理机构: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 林丽明
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410154389.5

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2015.11.11|||2014.08.27|||2014.07.30

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种用于直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法,包括AMOZ半抗原、人工抗原、抗体等的制备及其应用。所述AMOZ半抗原具有式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示分子结构,所述AMOZ人工抗原具有式(Ⅲ)或式(Ⅳ)所示分子结构。采用本发明抗原得到的抗体可以特异性识别AMOZ,抗体的效价为1:64000,最低检测限为0.852ng/mL,半抑制浓度为15.26ng/mL,可以直接用于AMOZ的检测,克服传统酶联免疫方法需要对AMOZ进行衍生化的特点,更简便、快速及低成本。本发明的抗原及抗体在食品中AMOZ的残留检测上具有广泛的应用前景。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种直接检测呋喃它酮代谢物AMOZ的快速免疫检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
    S1.将具有式(Ⅲ)所示分子结构的AMOZ人工抗原作为免疫原免疫动物制备AMOZ的多克隆抗体;
    S2将具有式(Ⅳ)所示分子结构的AMOZ人工抗原作为包被原包被在微孔板上,将步骤S1制备得到的AMOZ的多克隆抗体加入微孔板中;
    S3.采用竞争ELISA测定待测样品中AMOZ的含量;
    。

    2.  根据权利要求1所述快速免疫检测方法,其特征在于,式(Ⅲ)所示分子结构的AMOZ人工抗原是由式(Ⅰ)所示分子结构的AMOZ半抗原与载体蛋白偶联得到,式(Ⅳ)所示分子结构的AMOZ人工抗原是由式(Ⅱ)所示分子结构的包被半抗原与载体蛋白偶联得到;。

    3.  根据权利要求2所述快速免疫检测方法,其特征在于,式(Ⅰ)所示分子结构的AMOZ半抗原的制备方法,包括如下步骤:将AMOZ和乙醛酸分别溶于无水乙醇中,搅拌过程中将乙醛酸的乙醇溶液滴加到AMOZ的乙醇溶液中,AMOZ和乙醛酸的摩尔比为1:1.2;室温搅拌过夜,反应结束,真空抽滤,依次用乙醇和乙醚洗涤2次,取沉淀、干燥获得式(Ⅰ)所示AMOZ半抗原。

    4.  根据权利要求2所述快速免疫检测方法,其特征在于,式(Ⅱ)所示分子结构的包被半抗原的制备方法,包括如下步骤:将AMOZ和顺丁烯二酸酐分别溶于无水乙醇中,搅拌过程中将顺丁烯二酸酐的乙醇溶液滴加到AMOZ的乙醇溶液中,AMOZ和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1:1.2;室温搅拌过夜,反应结束,真空抽滤,依次用乙醇和乙醚洗涤2次,取沉淀、干燥获得式(Ⅱ)所示包被半抗原。

    5.  根据权利要求2所述快速免疫检测方法,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清蛋白、匙孔血蓝蛋白或卵清蛋白。

    6.  根据权利要求1所述快速免疫检测方法,其特征在于,S1所述AMOZ的多克隆抗体的效价为1:64000,最低检测限为0.852 ng/mL,半抑制浓度为15.26 ng/mL。

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