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    重庆时时彩组选走势图: 一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201210579111.3

    申请日:

    2012.12.28

    公开号:

    CN103897060A

    公开日:

    2014.07.02

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 专利实施许可合同备案的生效IPC(主分类):C07K 16/40合同备案号:2017320000010让与人:中国人民解放军南京军区南京总医院受让人:南京黎明生物制品有限公司发明名称:一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途申请日:20121228申请公布日:20140702授权公告日:20160217许可种类:独占许可备案日期:20170215|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C07K 16/40申请日:20121228|||公开
    IPC分类号: C07K16/40; C12N5/20; C12N15/53; C12N15/63; C12N9/02; G01N33/577; C12R1/91(2006.01)N 主分类号: C07K16/40
    申请人: 中国人民解放军南京军区南京总医院
    发明人: 史利宁; 李芳秋
    地址: 210002 江苏省南京市中山东路305号
    优先权:
    专利代理机构: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 夏平;傅婷婷
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201210579111.3

    授权公告号:

    |||||||||

    法律状态公告日:

    2017.03.15|||2016.02.17|||2014.07.30|||2014.07.02

    法律状态类型:

    专利实施许可合同备案的生效、变更及注销|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途。该单克隆抗体是由保藏于CGMCC保藏号为CGMCC?No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体;该制备方法通过克隆烟曲霉蛋白的基因;将克隆的基因插入表达载体,构建重组表达载体;用重组表达载体转化感受态大肠杆菌,诱导表达,亲和层析,得到纯化的该烟曲霉蛋白的重组蛋白;用该重组蛋白接种小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,建立杂交瘤细胞系,从中筛选出分泌该烟曲霉蛋白抗体最稳定、抗体活性最高的杂交瘤细胞株,它们所产生的抗体即为所需的单克隆抗体;该单克隆抗体可制备曲霉病诊断试剂。该单克隆抗体的具有高度特异性和强亲和力,制备方法简单高效。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种烟曲霉蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体是由保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

    2.  根据权利要求1所述的单克隆抗体,其抗原结合片段保持该单克隆抗体的结合特征。

    3.  分泌权利要求1所述单克隆抗体的杂交瘤细胞Anti-TR1,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6606,保藏日期为2012年9月24日。

    4.  权利要求1所述的单克隆抗体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
    a、克隆烟曲霉的一种蛋白的基因;
    b、将克隆的烟曲霉蛋白的基因插入表达载体,构建成重组表达载体;
    c、将构建的重组表达载体转化感受态大肠杆菌,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导获得该烟曲霉蛋白高效表达产物,再经亲和层析,得到纯化的该烟曲霉蛋白的重组蛋白;
    d、用纯化的该重组蛋白接种小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,建立杂交瘤细胞系;
    e、从上述杂交瘤细胞系中筛选分泌该烟曲霉蛋白抗体的杂交瘤细胞株,选出最稳定、抗体活性最高的细胞株,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6606,该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体即为权利要求1所述的单克隆抗体。

    5.  根据权利要求4所述的单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述烟曲霉蛋白的基因是用逆转录PCR法从烟曲霉mRNA中扩增出烟曲霉硫氧还蛋白还原酶的cDNA。

    6.  根据权利要求4所述的单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述表达载体优选pET-28a(+)。

    7.  一种用于诊断曲霉病的试剂组合物,其特征在于所述的试剂组合物含有作为活性成分的有效量的权利要求1所述的单克隆抗体。

    8.  权利要求1所述的单克隆抗体在制备曲霉病诊断试剂中的应用。

    9.  权利要求3所述的杂交瘤细胞系在制备曲霉病诊断试剂中的应用。

    关 键 词:
    一种 曲霉 蛋白 单克隆抗体 及其 制备 方法 用途
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