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    重庆时时彩每天直播: 一种基于TIOSUB2/SUBFESUB3/SUBOSUB4/SUB与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器,其制备方法以及用途.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410166673.4

    申请日:

    2014.04.23

    公开号:

    CN103913500A

    公开日:

    2014.07.09

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 27/416申请日:20140423|||公开
    IPC分类号: G01N27/416 主分类号: G01N27/416
    申请人: 安徽师范大学
    发明人: 王广凤; 陈玲; 朱艳红
    地址: 241000 安徽省芜湖市弋江区花津南路安徽师范大学
    优先权:
    专利代理机构: 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 代理人: 朱圣荣
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410166673.4

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2016.01.13|||2014.08.06|||2014.07.09

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及一种基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器,其制备方法以及用途,使用水热法合成了[email protected]纳米复合物,利用一端磷酸化DNA与TiO2之间的特异性结合作用,利用DNA序列之间碱基的互补配对作用,制备出基于[email protected]与DNA的树状聚合物电化学生物传感器,此传感器实现了对目标DNA分子灵敏性、特异性、稳定性的检测。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
    (1)DNA序列:巯基化:S1、目标DNA:S2、一端羟基化:S3,分别溶解在缓冲溶液中,并保存备用;
    (2)将含有探针S1的缓冲溶液滴涂到金电极上,培养,通过Au-S共价键作用自组装S1修饰的金电极;
    (3)与步骤(2)同时,在含有探针S3的缓冲溶液中加入T4PNK、ATP并培养此混合溶液,
    得到磷酸化的S3;
    (4)加入制备好的[email protected]复合材料,继续培养,得到[email protected]生物复合物;
    (5)将S1修饰的金电极放入到含有S2和[email protected]生物复合物的缓冲溶液中培养,利用DNA之间的碱基互补配对作用,基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物组装电化学生物传感器制备成功。

    2.  如权利要求1所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,步骤(4)中所述[email protected]纳米复合材料的制备包括如下步骤:
    (4-1)利用水热合成法,合成出尺寸均匀的Fe3O4纳米颗粒;
    (4-2)将制备成功的Fe3O4纳米颗粒利用水热合成法在其表面包覆一层TiO2涂层;
    (4-3)复合材料结合核Fe3O4的生物催化性能和壳TiO2的生物特异性。

    3.  如权利要求1或2所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,将DNA序列分别溶解在0.05M Tris-HCl(pH7.4)缓冲溶液中,并在4℃下保存备用。

    4.  如权利要求1-3中任一项所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述金电极在步骤(2)之前进行抛光和清洗。

    5.  如权利要求4所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,所述抛光和清洗包括如下步骤:将金电极先依次用0.3和0.5mm的铝粉进行抛光处理;依次放入HNO3:H2O(v/v)=1:1溶液、乙醇溶液、超纯水中,进行超声波清洗,超声清洗的时间分别为3~5min。

    6.  如权利要求1-5中任一项所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,步骤(2)中培养6-10h,通过Au-S共价键作用自组装S1修饰的金电极;和/或,步骤(3)在含有探针S3的缓冲溶液中加入T4PNK、ATP并培养此混合溶液 3-5h,得到磷酸化的S3;和/或,步骤(4)加入制备好的[email protected]复合材料,继续培养1-3h,得到[email protected]生物复合物。

    7.  如权利要求6所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,步骤(2)中培养h,通过Au-S共价键作用自组装S1修饰的金电极;步骤(3)在含有探针S3的缓冲溶液中加入T4PNK、ATP并培养此混合溶液5h,得到磷酸化的S3;步骤(4)加入制备好的[email protected]复合材料,继续培养3h,得到[email protected]生物复合物。

    8.  一种基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器,其特征在于,采用权利要求1-7所述的制备方法制备得到。

    9.  一种如权利要求8所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的用途,其特征在于,用于对目标DNA分子的检测。

    10.  如权利要求9所述的基于[email protected]与DNA构成的树状聚合物电化学生物传感器的用途,其特征在于,S2的浓度不同,组装的[email protected]生物复合物的量不同,实现不同浓度目标DNA S2进行定量检测。

    关 键 词:
    一种 基于 TIOSUB2 SUBFESUB3 SUBOSUB4 SUB DNA 构成 树状 聚合物 电化学 生物 传感器 制备 方法 以及 用途
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