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    重庆时时彩官wang: 一种控制桡足类携带的总细菌数的方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410269824.9

    申请日:

    2014.06.17

    公开号:

    CN104126529A

    公开日:

    2014.11.05

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):A01K 61/00申请日:20140617|||公开
    IPC分类号: A01K61/00; C02F3/34; A61K35/74; C12N1/20; C12R1/01(2006.01)N; A61P31/04(2006.01)N 主分类号: A01K61/00
    申请人: 华南理工大学
    发明人: 蔡俊鹏; 孙秋平; 郭衍彪
    地址: 510640 广东省广州市天河区五山路381号
    优先权:
    专利代理机构: 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人: 裘晖
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410269824.9

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2016.08.24|||2014.12.10|||2014.11.05

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开一种控制桡足类携带的总细菌数的方法。该方法的步骤为:制备浓度为2×102~2×105PFU/mL的蛭弧菌稀释液,再将蛭弧菌稀释液与谷氨酸钠和蔗糖的混合溶液按体积比1:1混合,得到蛭弧菌制剂;将蛭弧菌制剂与预处理过的含桡足类的水样进行混合。本发明提供的方法简单易行,适于工业化大批量生产,其中所含有的谷氨酸钠和蔗糖,对水体及桡足类本身无毒副作用,并不会引起水体的污染和桡足类等有益水生浮游生物的死亡。通过本发明的方法可有效控制桡足类携带的总菌,在24h内即可控制总菌数在103cfu/mL以内,并在较长时间内减缓其再生。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于包括以下步骤:
    (1)制备蛭弧菌稀释液;
    (2)将步骤(1)制备的蛭弧菌稀释液与?;ぜ两谢旌?,即得到蛭弧菌制剂;
    (3)含桡足类的水样的预处理;
    (4)将步骤(2)蛭弧菌制剂与步骤(3)的含桡足类的水样进行混合。

    2.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    所述的蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDS02,为2009年8月7日保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 209170。

    3.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    所述的蛭弧菌稀释液的浓度为2×102~2×105PFU/mL。

    4.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    所述的?;ぜ廖柿刻寤?~25%谷氨酸钠和质量体积比5~25%蔗糖的混合溶液。

    5.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    步骤(2)中所述的蛭弧菌稀释液与?;ぜ两谢旌习凑镇位【∈鸵河氡;ぜ两刑寤?:1混合。

    6.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    所述的含桡足类的水样中的桡足类数目在3~4个/mL。

    7.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    步骤(4)中所述的混合是将蛭弧菌制剂与含桡足类的水样按照体积比1:(10~100)混合。

    8.  根据权利要求1所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    所述的蛭弧菌稀释液通过以下步骤获得:
    ①宿主菌浓缩液的制备:挑取大肠杆菌单菌落,接种于营养肉汤液体培养基中,培养,得到培养液,然后将培养液离心,弃上清,每100mL培养液收集的沉淀用2~3mL DNB液体培养基悬浮,得到宿主菌浓缩液,4℃保存备用;
    ②蛭弧菌稀释液的制备:按照蛭弧菌:宿主浓缩液:DNB液体培养基的体积比1:1:50的比例进行混合,恒温培养,每24h添加一次宿主浓缩液,培养48h, 得到培养液;将培养液离心,取上清液过滤,滤液使用质量体积比1.5%盐度的灭菌蒸馏水调整其浓度,制备得到2×102~2×105PFU/mL的蛭弧菌稀释液。

    9.  根据权利要求8所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    步骤①中所述的营养肉汤液体培养基为营养肉汤18g/L,pH7.2,121℃高压灭菌15min后保存备用;
    步骤①中所述的培养的条件为200rpm、28℃培养18h;
    步骤①中所述的离心的条件为4℃、6000rpm离心20min;
    步骤②中所述的恒温培养的条件为230rpm、28℃培养;
    步骤②中所述的将培养液离心的条件为6000rpm、4℃离心20min;
    步骤②中所述的过滤为用0.45μm醋酸纤维素膜进行过滤;
    步骤②中所述的质量体积比1.5%盐度的灭菌蒸馏水用海水晶制备得到。

    10.  根据权利要求8所述的控制桡足类携带的总细菌数的方法,其特征在于:
    步骤①和②中所述的DNB液体培养基,通过如下步骤制备:称取0.8g/L的营养肉汤,0.5g/L的酪蛋白酸水解物和0.1g/L的酵母提取物,15g/L海水晶,用蒸馏水溶解混匀,调pH值至7.2~7.6,121℃0.1MPa条件下处理20min保存备用。

    关 键 词:
    一种 控制 桡足类 携带 细菌 方法
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