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    重庆时时彩开奖号码新: 以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201611249323.X

    申请日:

    2016.12.29

    公开号:

    CN106613555A

    公开日:

    2017.05.10

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):A01G 13/00申请日:20161229|||公开
    IPC分类号: A01G13/00; A01C1/08; A01C1/00; A01G1/00; A01N43/832; A01P3/00 主分类号: A01G13/00
    申请人: 福建省农业科学院植物?;ぱ芯克?
    发明人: 刘裴清; 李本金; 丁雪玲; 翁启勇; 王荣波; 陈庆河
    地址: 350013 福建省福州市晋安区新店埔垱福建省农业科学院
    优先权:
    专利代理机构: 福州元创专利商标代理有限公司 35100 代理人: 蔡学俊;陈彩芳
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201611249323.X

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.06.06|||2017.05.10

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法,该方法将配制好的苯丙噻二唑溶液以喷雾法处理上述培养好的辣椒苗,诱导处理72小时后,然后用辣椒疫霉菌游动孢休止液接种,3??5天后观察发病情况,以确定其对诱导辣椒抗疫病的效果。上述方法可以省时省力的配制适应于田间应用的苯丙噻二唑,同时对其进行抗病防卫反应激活的检测,填补了国内外辣椒抗疫病性研究中利用苯丙噻二唑做激发子激活防卫反应增强抗病性的认识,具有重大意义。

    权利要求书

    1.以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法,其特征在于:包括如下:
    (1) 苯丙噻二唑溶液配制是将纯度>99%苯丙噻二唑配成0.5-1.5 mM/L水溶液,加入
    2-3 wt.‰的Tween-20直接施用;
    (2)辣椒种子经30wt.%次氯酸钠表面消毒后,再用灭菌蒸馏水冲洗干净,在50-60℃水
    浴锅中烫种30-50分钟后,将种子播种于下垫两层纱布的搪瓷拖盘中,然后在25℃培养箱中
    黑暗避光条件下培养4-8天,直到长出细长的辣椒黄化苗,移出光照培养箱培养3-4天;
    (3)将配制好的苯丙噻二唑水溶液以喷雾法处理上述培养好的辣椒黄化苗,诱导处理
    72小时后,然后用辣椒疫霉菌游动孢子悬浮液接种,3-5天后观察发病情况,以确定其对诱
    导辣椒抗疫病的效果。
    2.根据权利要求1所述的以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法,其特征在
    于:辣椒疫霉菌游动孢子悬浮液的制备方法:将辣椒疫霉菌接种至15%V8培养基平板,于25
    ℃下黑暗培养7-10天至菌丝长满整个平板,打开封口膜在光照强度5000-8000 LUX下照射
    2-3天,加无菌水覆盖整个平板过夜,4℃处理15-20分钟促进孢子囊释放游动孢子,用无菌
    水调节游动孢子浓度为1.0×105个/mL,得到辣椒疫霉菌游动饱子悬浮液。

    说明书

    以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法

    技术领域

    本发明涉及植物?;ぜ际趿煊?,公开了以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病
    的方法。

    背景技术

    辣椒疫病是一种世界范围内普遍发生的毁灭性真菌病害,它属于植物病原卵菌。
    辣椒疫霉寄主范围广,主要侵染辣椒、番茄、茄子、南瓜等多种重要蔬菜作物。自1980年以
    来,辣椒疫病在我国蔬菜种植区域发病程度日趋加重,严重影响了蔬菜种植业的经济效益,
    给我国的蔬菜安全生产造成了巨大的经济损失。利用化学农药虽然可有效防治辣椒疫病,
    但存在农药残留和食品安全风险及生态环境隐患。而利用无毒无残留的植物激发子可诱使
    植物体内产生抗病反应,免疫激发子主要通过激发植物自身的抗病性,使其产生抗菌物质,
    从而达到抑制病原菌的目的。这种抗性具有广谱、稳定、持久等优点,可以解决化学防治存
    在病原菌抗药性、环境污染和对人畜副作用问题,实现农产品无害化生产。

    苯并噻二唑(Benzothiadiazole,BTH)作为一种植物激发子,本身及其在植物体内
    的代谢产物均无杀菌活性,但能够影响病原菌生活史中的多个环节。通过对利用苯并噻二
    唑激活辣椒抗疫病的认识的研究,可深入了解苯并噻二唑对辣椒疫霉菌的防病机制、并以
    此为靶标寻找到辣椒中与该防病机制相关的抗病基因,上述研究为弄清苯并噻二唑在辣椒
    抗病防卫反应中的作用机制提供基础。通过解析苯并噻二唑激活的辣椒抗病防卫反应的分
    子机制,可以为育种专家寻找新的抗性位点,最终为有效控制疫病的爆发提出新的策略。但
    是目前的研究表明,苯并噻二唑在辣椒抗疫病防卫反应中的分子机制解析的缺失限制了我
    们对其防病机理的深入研究。

    发明内容

    本发明目的是提供以苯丙噻二唑作为激发子诱导辣椒抗疫病的方法,即以辣椒苗
    为实验材料,通过苯丙噻二唑溶液作为激发子处理后接种辣椒疫霉菌来检测诱导抗病效
    果。

    本发明的利用苯丙噻二唑溶液激活辣椒抗疫病防卫反应的方法及应用步骤如下:

    ⑴ 苯丙噻二唑配制是将纯度>99%苯丙噻二唑配成0.5-1.5 mM L-1水溶液,加入2-3
    ‰的Tween-20可直接施用;

    ⑵ 辣椒种子经30%次氯酸钠表面消毒后,再用灭菌蒸馏水冲洗干净,在50-60℃水浴锅
    中烫种30-50分钟后,将种子播种于下垫两层纱布的搪瓷拖盘中(20 * 40 cm),然后在25
    ℃培养箱中黑暗避光条件下培养4-8天,直到长出细长的辣椒黄化苗,移出光照培养箱培养
    3-4天;

    ⑶将配制好的苯丙噻二唑以喷雾法处理上述培养好的辣椒苗,诱导处理72小时后,然
    后用辣椒疫霉菌游动孢子悬浮液接种,3-5天后观察发病情况,以确定其对诱导辣椒抗疫病
    的效果。

    辣椒疫霉菌游动孢子悬浮液的制备方法是:将辣椒疫霉菌(LT1534)接种至15% V8
    培养基((15mlV8蔬菜汁溶于85ml去离子水)平板,于25℃下黑暗培养7-10天至菌丝长满整
    个平板,打开封口膜在光照强度5000-8000 LUX下照射2-3天,加无菌水覆盖整个平板过夜,
    4℃处理15-20分钟促进孢子囊释放游动孢子,用无菌水调节游动孢子浓度为1.0×105个/
    mL,得到辣椒疫霉菌游动饱子悬浮液。

    本发明的有益效是,本发明解决了利用苯丙噻二唑激活辣椒抗疫病防卫反应的问
    题,用上述辣椒苗为试材检测苯丙噻二唑诱导抗病防卫反应的效果,具有实验周期短、不受
    外界环境条件影响、实验重复性好、接种症状表现明显、易于分级和实验观察等优点。通过
    解析苯丙噻二唑激活的辣椒抗疫病防卫反应的分子机制,可以为育种专家寻找新的抗性位
    点,最终为有效控制疫病的爆发提出新的策略。但是目前的研究表明,苯丙噻二唑在辣椒抗
    疫病防卫反应中的分机机制解析的缺失限制了我们对其防病机理的深入研究。

    具体实施方式

    将纯度>99%苯丙噻二唑配成0.5-1.5 mM L-1水溶液,加入2-3 ‰的Tween-20,辣
    椒种子经消毒后诱导产生辣椒苗,最后检测苯丙噻二唑激发子诱导辣椒抗疫病防卫反应效
    能。

    实施例1:

    将纯度>99%苯丙噻二唑配成1 mM L L-1水溶液,加入3 ‰的Tween-20可直接施用;湘
    研7号和美国西元椒种子经30%次氯酸钠表面消毒后,再用灭菌蒸馏水冲洗干净,在55℃水
    浴锅中烫种40分钟后,将种子播种于下垫两层纱布的搪瓷拖盘中(20 * 40 cm),然后在25
    ℃培养箱中黑暗避光条件下培养6天,直到长出细长的辣椒黄化苗,移出光照培养箱培养4
    天;最后是苯丙噻二唑激发子诱导辣椒抗疫病的检测方法,将配制好的苯丙噻二唑以喷雾
    法处理上述培养好的辣椒苗,诱导处理72小时后,然后用辣椒疫霉菌游动孢休止液接种,4
    天后观察发病情况,以确定其对诱导辣椒抗疫病的效果,同时以喷雾清水作为对照。实验结
    果统计分析发现苯丙噻二唑诱导抗辣椒疫病的效果是80.14%。

    实施例2

    将纯度>99%苯丙噻二唑配成1.5 mM L-1水溶液,加入2 ‰的Tween-20可直接施用;湘
    研7号和美国西元椒种子经30%次氯酸钠表面消毒后,再用灭菌蒸馏水冲洗干净,在50℃水
    浴锅中烫种30分钟后,将种子播种于装有营养土的辣椒穴盘,然后在25℃培养箱中光照条
    件下培养12天,直到长出有6片叶子的辣椒苗;苯丙噻二唑激发子诱导辣椒抗疫病评价方法
    是,首先,将配制好的苯丙噻二唑以喷雾法处理上述培养好的辣椒苗,诱导处理48小时后,
    然后用辣椒疫霉菌游动孢休止液(107个/mL)接种辣椒苗(每穴20 mL),6天后观察发病情
    况,以确定其诱导一个社会抗疫病的效果,同时以喷雾清水作为对照。实验结果统计分析发
    现苯丙噻二唑诱导抗病的效果是82.17%。

    上述结果表明,通过利用苯丙噻二唑作为激发子激活辣椒的抗疫病,能显著提高
    辣椒苗的抗病能力,这对推动辣椒的抗疫病机理研究及抗性育种研究具有重要意义。

    以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与
    修饰,皆应属本发明的涵盖范围。

    关 键 词:
    苯丙噻二唑 作为 激发 诱导 辣椒 疫病 方法
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