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    重庆时时彩稳赚技巧大全: 一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法.pdf

    关 键 词:
    一种 缓解 油菜 幼苗 胁迫 方法
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    摘要
    申请专利号:

    CN201611092799.7

    申请日:

    2016.11.30

    公开号:

    CN106613187A

    公开日:

    2017.05.10

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):A01G 1/00申请日:20161130|||公开
    IPC分类号: A01G1/00; A01G13/00; A01N59/02; A01N59/20; A01P21/00 主分类号: A01G1/00
    申请人: 湖北工程学院
    发明人: 李春生; 崔雪梅; 李冰晖
    地址: 432000 湖北省孝感市交通大道272号
    优先权:
    专利代理机构: 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 代理人: 杨立;李蕾
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201611092799.7

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.06.06|||2017.05.10

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法,包括向施用含铜溶液的油菜幼苗施用含硒溶液的步骤。所述含铜溶液中的铜以硫酸铜形式存在,所述含硒溶液中的硒以亚硒酸钠形式存在。当施用硫酸铜浓度为0??75mg/L的含铜溶液时,所施用的含硒溶液中亚硒酸钠的浓度为0??12mg/L。当施用硫酸铜浓度为75??200mg/L的含铜溶液时,所施用的含硒溶液中亚硒酸钠的浓度为12??22mg/L。通过使用本发明的方法,能够在必要时给油菜幼苗施加一定浓度的铜的情况下(例如,使用使用含铜的杀虫剂,或使用含铜的水进行灌溉),通过使用相应浓度的硒来缓解铜的施用导致的对油菜幼苗的胁迫效应。

    权利要求书

    1.一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法,其特征在于,包括向施用含铜溶液的油菜幼苗
    施用含硒溶液的步骤。
    2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述含铜溶液中的铜以硫酸铜形式存在,
    所述含硒溶液中的硒以亚硒酸钠形式存在。
    3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,当施用硫酸铜浓度为0-75mg/L的含铜溶液
    时,所施用的含硒溶液中亚硒酸钠的浓度为0-12mg/L。
    4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,当施用硫酸铜浓度为75-200mg/L的含铜溶
    液时,所施用的含硒溶液中亚硒酸钠的浓度为12-22mg/L。

    说明书

    一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法

    技术领域

    本发明涉及油菜种植领域,更特别地,涉及一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法。

    背景技术

    铜(Cu)是植物生长发育所必需的一种微量元素,但植物正常生长所需要的Cu量很
    少,当过量Cu被植物吸收后,会对植物产生毒害作用,抑制植物的生长发育甚至死亡。目前,
    农业生产活动中使用的大量高铜杀菌剂、污水灌溉等多种原因导致土壤中Cu污染日益加
    剧。

    油菜是我国主要的油料作物,种植面积和产量均居世界首位。油菜种植不仅能收
    获菜籽生产食用油,还可以采摘菜薹作蔬菜,而且其饼粕富含蛋白质,可作为动物饲料,是
    一种备受青睐的作物。要菜籽和菜薹的产量高、质量好,势必关联到油菜的生长环境诸多因
    素。目前,探讨硒、铜对油菜生长的影响方面虽有报道,但多集中在单独一种元素对油菜生
    长的影响上,王波等在恒温箱培养条件下研究了铜胁迫对油菜种子萌发期生理生化指标的
    影响,结果表明低浓度的铜对油菜有促进作用,而高浓度产生了抑制作用;张驰等应用土培
    与水培相结合的盆栽方式,研究了硒对油菜苗期生长和生理生化指标的影响,结果表明硒
    能明显地影响油菜的生长发育,适量的补硒处理都具有明显的增产效果。然而,现有技术中
    尚未研究通过施用硒来缓解高浓度的铜对油菜的胁迫。

    发明内容

    本研究拟采用不同浓度的Se、Cu溶液处理盆栽油菜幼苗,处理结束后测定幼苗叶
    绿素、丙二醛、硝态氮、可溶性糖、蛋白质等指标的含量及过氧化物酶活性、淀粉酶活性,以
    揭示Se、Cu交互胁迫下油菜的生理响应规律,以期找出最佳的Se、Cu供应比例,为油菜的品
    质的改善和产量的提高提供参考。

    基于此,本发明提供了一种缓解油菜幼苗的铜胁迫的方法,包括向施用含铜溶液
    的油菜幼苗施用含硒溶液的步骤。

    进一步地,所述含铜溶液中的铜以硫酸铜形式存在,所述含硒溶液中的硒以亚硒
    酸钠形式存在。

    进一步地,当施用硫酸铜浓度为0-75mg/L的含铜溶液时,所施用的含硒溶液中亚
    硒酸钠的浓度为0-12mg/L。

    进一步地,当施用硫酸铜浓度为75-200mg/L的含铜溶液时,所施用的含硒溶液中
    亚硒酸钠的浓度为12-22mg/L。

    通过使用本发明的方法,能够在必要时给油菜幼苗施加一定浓度的铜的情况下
    (例如,使用使用含铜的杀虫剂,或使用含铜的水进行灌溉),通过使用相应浓度的硒来缓解
    铜的施用导致的对油菜幼苗的胁迫效应。

    附图说明

    图1为不同Se、Cu处理下油菜幼苗总叶绿素含量柱状统计图;

    图2为不同Se、Cu处理下油菜幼苗丙二醛浓度柱状统计图;

    图3为不同Se、Cu处理下油菜幼苗蛋白质含量柱状统计图;

    图4为不同Se、Cu处理下油菜幼苗油菜的POD活性柱状统计图;

    图5为不同Se、Cu处理下油菜幼苗硝态氮含量柱状统计图;

    图6为不同Se、Cu处理下油菜幼苗淀粉酶活性柱状统计图;

    图7为不同Se、Cu处理下油菜幼苗油菜可溶性糖含量柱状统计图。

    具体实施方式

    以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并
    非用于限定本发明的范围。

    1.油菜幼苗的培育以及铜和硒的施用

    本实验于2015年10月至2016年1月在湖北工程学院生科楼进行。油菜种子用1%的
    次氯酸钠溶液给消毒15min,然后用无菌水冲洗5次,再用蒸馏水浸泡24h,让其充分吸水后
    挑选沉于下方的籽粒饱满的种子若干;将选好的种子均匀撒在铺有两层滤纸的白色托盘
    内,用适量蒸馏水湿润滤纸(水量保持滤纸湿润,但不宜流动)。将托盘放入MJX-250B-Z型恒
    温箱进行催芽,温度设置为25℃,期间每天向托盘中添加适量的等量蒸馏水,3天后种子露
    白,再移入花盆中进行土培实验。

    取养分贫瘠的沙土,用筛子筛出沙土中较大的石砾等杂质。将土均匀的分到45个
    盆中,浇适量等量蒸馏水保持土壤湿润。

    将发芽后的油菜种子移至花盆中,每盆十株,均匀分布。将花盆放在向阳通风处,
    每天浇两次等量Hoagland’s营养液。待油菜幼苗长至4-5片叶之后,将45盆油菜随机分成3
    组,每组三个重复,向油菜幼苗施用含铜溶液和含硒溶液。

    实验中含铜溶液的中的铜为CuSO4,浓度分别为0、25mg/L、75mg/L、100mg/L、
    200mg/L,含硒溶液的中的硒为Na2SeO3,浓度分别为:0、12mg/L、22mg/L。

    2.叶绿素含量的测定

    叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,是反应植物叶片光合作用能力的一个很
    重要的指标。胁迫处理结束后,测定油菜叶片总叶绿素含量。结果如图1所示,1)单独喷施Cu
    液时,油菜幼苗总叶绿素含量随着Cu浓度的增加先增加后降低。当Cu浓度达75mg/L时,总叶
    绿素含量达最高值,而Cu浓度过高(200mg/L)时,则产生一定的抑制作用;同样,单独喷施
    Se,供Se 12mg/L时,总叶绿素含量最高,而Se浓度为22mg/L时,总叶绿素含量低于对照。由
    此可知低Se、低Cu对油菜合成叶绿素有促进作用,而高浓度Se、高浓度Cu则是产生抑制作
    用。(2)Se、Cu同时供应时,低Cu(小于等于75mg/L)、低Se(12mg/L)配施,油菜叶绿素含量均
    高于对照和高硒组。当Cu浓度超过100mg/L时,高Se(22mg/L)组总叶绿素含量均高于对照和
    低Se组。说明适量的Se和Cu对叶绿素含量有促进作用,当环境中Cu浓度高于100mg/L时,喷
    施高浓度的Se对Cu胁迫有较好的缓解作用。

    对叶绿素含量进一步进行双因素方差分析,结果如表1所示,对叶绿素含量进行双
    因素方差分析,结果见表3,由表3可知:(1)Se浓度为差异源时,F>F crit,说明Se对油菜中
    总叶绿素含量影响的差异性达到显著水平;(2)Cu浓度为差异源时,F>F crit,说明Cu对油
    菜总叶绿素影响的差异性也达到显著水平;(3)差异源是Se、Cu的交互作用时,F>F crit,说
    明Se和Cu的交互作用达到显著水平,即Se和Cu在共同影响油菜总叶绿素含量方面有明显的
    交互作用。

    表1总叶绿素含量变化方差分析


    注:α为0.05;SS为方差,df为自由度,MS为均方,F为检验统计量F值,Fcrit为F的临
    界值。下同。

    3.丙二醛含量的测定

    丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在植物衰老生理和抗性生理研究中MDA含
    量是一个常用指标,可通过MDA了解膜脂过氧化的程度,以此判断植物的膜系统受损程度及
    其抗逆性。

    胁迫处理结束后,测定油菜叶片中MDA的浓度。结果如图2所示,无论喷Se浓度为多
    少时,MDA含量均随Cu浓度的增加而呈现先减少后增加的趋势,都在Cu浓度为100mg/L时达
    到最小值,说明低浓度的Cu可以减少MDA的产生,增强了植物的抗逆性。另外,当单独供Se
    时,植物叶片中MDA含量在Se浓度为12mg/L时最低,说明低浓度的Se能增强植物抗逆性;随
    着Cu浓度小于等于100mg/L,Se浓度22mg/L时叶片中MDA含量低于对照组和低Se组,说明当
    环境中Cu浓度较低时,高浓度的Se对油菜的Cu胁迫缓解效果较好;而当Cu浓度为200mg/L
    时,则表现为12mg/L的Se浓度缓解效果更佳,说明低Se对高浓度的Cu胁迫缓解效果更佳。

    对丙二醛含量进一步进行双因素方差分析,结果如表2所示,(1)Se浓度为差异源
    时,F>Fcrit,说明Se对油菜中MDA浓度影响的差异性达到显著水平;(2)Cu浓度为差异源时,
    F>Fcrit,说明喷Cu对油菜MDA浓度影响的差异性也达到显著水平;(3)差异源是Se、Cu交互
    作用时,F>F crit,说明Se和Cu的交互作用达到显著水平,即Se和Cu对油菜MDA浓度影响方
    面有明显的交互作用。

    表2丙二醛浓度变化方差分析


    4.蛋白质含量的测定

    胁迫处理结束后,测定油菜叶片中蛋白质的含量。结果如图3所示,(1)当单独供Cu
    时,油菜中蛋白质含量随Cu浓度的升高而呈现先增加后减少的趋势,在Cu浓度为75mg/L时
    达到最大值。说明低浓度的Cu对油菜合成蛋白质有一定促进作用,铜浓度为200mg/L时,蛋
    白质含量明显低于对照组,高浓度的Cu产生抑制作用。(2)无论是单独供Se还是Se、Cu同时
    供应,都表现为低Se(12mg/L)供应下蛋白质含量最高,说明低Se(12mg/L)对Cu胁迫油菜有
    一定的促进作用。这种促进作用在Cu浓度为25mg/L时达到最佳效果。铜浓度为200mg/L时,
    供Se都一定程度的缓解了高浓度铜的胁迫。

    对丙二醛含量进一步进行双因素方差分析,结果如表3所示,(1)Se浓度为差异源
    时,F<F crit,说明Se对油菜中蛋白质影响的差异性没有达到显著水平;(2)Cu浓度为差异
    源时,F=<F crit,说明Cu对油菜中蛋白质含量影响的差异性也没有达到显著水平;(3)差
    异源是Se、Cu交互作用时,F<Fcrit,说明Se和Cu对油菜中蛋白质含量影响的交互作用不明
    显。

    表3蛋白质含量方差分析


    5.过氧化物酶活性的测定

    植物体中含有大量过氧化物酶(POD),是活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合
    作用及生长素的氧化等都有关系。胁迫处理结束后,测定油菜叶片中POD的活性。结果如图4
    所示,Se浓度为0和高Se(22mg/L)时,随Cu浓度的增加,油菜中POD的活性逐渐降低;低Se
    (12mg/L)时,油菜中POD活性随Cu浓度增加呈现先降低后升高再降低的趋势。说明适量Se对
    Cu胁迫下油菜POD活性有一定缓解作用。

    对蛋白质含量进行双因素方差分析,结果如表4所示,(1)Se浓度为差异源时,F<
    Fcrit,说明Se对油菜POD活性影响的差异性没有达到显著水平;(2)Cu浓度为差异源时,F>F
    crit,说明喷Cu对油菜POD活性影响的差异性达到了显著水平;(3)差异源是Se、Cu交互作用
    时,F>Fcrit,说明Se和Cu在共同影响油菜POD活性的交互作用较为明显。由此可见,Se对POD
    活性影响较小,而Cu对POD活性的影响较显著。

    表4油菜POD活性方差分析


    6.硝态氮含量测定

    测定植物体内的硝态氮含量,能反映出植物的氮素营养状况,还可为鉴定蔬菜及
    其加工品的品质提供依据。胁迫处理结束后,测定油菜叶片中硝态氮的含量。结果如图5所
    示,不供Se时,油菜中硝态氮含量随Cu浓度的增加而逐渐升高,当Cu的浓度小于等于75mg/L
    时,硝态氮变化不明显,在Cu浓度高于100mg/L时开始急剧增加。说明低浓度的Cu对油菜的
    硝态氮含量影响较小。高浓度Cu会促进油菜硝态氮的累积。Se、Cu同时供应,硝态氮含量均
    为先增加后降低,在Se 12mg/L、Cu 100mg/L组合时硝态氮含量最低。当Cu浓度为200mg/L
    时,低Se组和高Se组油菜的硝态氮含量都明显低于对照,说明Se能明显缓解高浓度Cu胁迫
    下硝态氮的含量。

    对硝态氮含量进一步进行双因素方差分析,结果如表5所示,(1)Se浓度为差异源
    时,F>Fcrit,说明Se对油菜中硝态氮含量影响的差异性没有达到显著水平;(2)Cu浓度为差
    异源时,F>Fcrit,说明Cu对油菜硝态氮含量影响的差异性达到了显著水平;(3)差异源是
    Se、Cu交互作用时,F>F crit,说明Se和Cu的交互作用达到显著水平,即Se和Cu在共同影响
    油菜硝态氮含量方面的交互作用非常明显。

    表5硝态氮含量方差分析


    7.淀粉酶含量的测定

    植物的能量来源主要是淀粉,所以需要淀粉酶来分解淀粉获得能量,提供组织生
    长需要以及完成各种生理活动。淀粉酶活性高低常作为植物抗逆性的生化指标。胁迫处理
    结束后,测定油菜幼苗中淀粉酶的活性。结果如图6所示,当单独供Se时,油菜淀粉酶活性随
    着Se浓度的增加而增加,说明Se对油菜淀粉酶活性有促进作用。单独供Cu时,随着Cu浓度的
    增加,淀粉酶活性先增加后降低,在Cu浓度为75mg/L时达到最高值,此后虽然有降低,但仍
    高于对照组,说明在此浓度范围内,Cu对油菜淀粉酶活性均有促进作用,且低浓度的Cu促进
    作用效果更明显。Se、Cu同时供应时,表现为高Se(22mg/L)与低浓度的Cu(小于75mg/L)组合
    下淀粉酶活性最高。低Se对高浓度的Cu胁迫下淀粉酶活性有一定的缓解作用。

    对淀粉酶活性进一步进行双因素方差分析,结果如表6所示,(1)Se浓度为差异源
    时,F<Fcrit,说明Se对油菜中淀粉酶活性影响的差异性没有达到显著水平;(2)Cu浓度为差
    异源时,F>Fcrit,说明Cu对油菜淀粉酶活性影响的差异性达到了显著水平;(3)差异源是
    Se、Cu交互作用时,F>F crit,说明Se和Cu的交互作用达到显著水平,即Se和Cu在共同影响
    油菜淀粉酶的活性方面的交互作用比较明显。

    表6淀粉酶活性方差分析


    8.可溶性糖含量的测定

    糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
    蔬菜作物中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定作物品质的高低。胁迫处理结束后,测定油菜
    叶片中可溶性糖的含量。结果如图7所示,(1)单独供Cu时,油菜可溶性糖含量随Cu浓度增加
    呈现先降后升再降的变化趋势。在Cu浓度为100mg/L时达到最大值,浓度为200mg/L时,可溶
    性糖含量明显低于对照,说明低浓度的Cu对油菜有促进作用,高浓度则产生抑制。(2)单独
    供Se时,油菜可溶性糖含量呈下降趋势。Se、Cu同时供应时,低浓度的Se(12mg/L)与低浓度
    的Cu(75mg/L)会提高可溶性糖含量,随着Cu浓度的增加,则表现为高Se(22mg/L)与高Cu组
    合会提高可溶性糖的含量。说明低浓度Se与低浓度的Cu对油菜可溶性糖含量有促进作用。
    而高Se能有效缓解高浓度的Cu胁迫。

    对可溶性糖含量进一步进行双因素方差分析,结果如表7所示,(1)Se浓度为差异
    源时,F<F crit,说明Se对油菜中可溶性糖含量影响的差异性没有达到显著水平;(2)Cu浓
    度为差异源时,F<Fcrit,说明Cu对油菜可溶性糖含量影响的差异性也没有达到显著水平;
    (3)差异源是Se、Cu交互作用时,F<F crit,说明Se和Cu的交互作用没有达到显著水平,即Se
    和Cu在共同影响油菜可溶性糖方面的交互作用不明显。

    表7可溶性糖含量方差分析


    从以上数据可看出,单独喷施Cu溶液,Cu浓度达75mg/L时,油菜生理指标的综合影
    响较好;而Cu浓度达200mg/L时,所有指标均低于对照,说明低浓度的Cu对油菜生长有促进
    作用,高浓度则产生抑制。单独喷施Se溶液时,与对照相比,供Se组各项指标都较好,说明适
    量的Se对油菜有促进作用。硒、铜同时供应时,低硒(12mg/L)与低铜(75mg/L)的组合,高硒
    (22mg/L)与高铜(100mg/L)的组合对油菜生理指标的综合影响较好。说明低浓度的硒、铜配
    施,对油菜各项生理指标均有促进作用,而较高浓度的硒(22mg/L)能有效缓解高浓度铜对
    油菜的胁迫作用。

    以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和
    原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的?;し段е?。

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