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    重庆时时彩12点封盘: 25?羟基维生素D荧光免疫层析用活化荧光乳胶微球.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201610804764.5

    申请日:

    2016.09.06

    公开号:

    CN106405072A

    公开日:

    2017.02.15

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 专利权人的姓名或者名称、地址的变更 IPC(主分类):G01N 33/533变更事项:专利权人变更前:北京华科泰生物技术有限公司变更后:北京华科泰生物技术股份有限公司变更事项:地址变更前:100070 北京市丰台区科学城海鹰路8号2号楼501室(园区)变更后:101111 北京市通州区科创东五街2号14幢4层F4E|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/533申请日:20160906|||公开
    IPC分类号: G01N33/533; G01N33/558; G01N33/577 主分类号: G01N33/533
    申请人: 北京华科泰生物技术有限公司
    发明人: 林斯
    地址: 100070 北京市丰台区科学城海鹰路8号2号楼501室(园区)
    优先权:
    专利代理机构: 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 代理人: 张秋越
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201610804764.5

    授权公告号:

    |||||||||

    法律状态公告日:

    2019.03.12|||2018.01.02|||2017.03.15|||2017.02.15

    法律状态类型:

    专利权人的姓名或者名称、地址的变更|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种25?羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用活化荧光乳胶微球及试纸条。本发明的25?羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用活化荧光乳胶微球的制备方法,包括如下步骤:1)取表面活性剂加入pH为8~10的缓冲溶液中,再加入二甲基甲酰胺、N,N’?二环己基碳二亚胺和N?羟基琥珀酰亚胺;2)取氨基表面的荧光乳胶微球的分散液,以缓冲溶液调pH至8~10后,加入到步骤1)所得的混合物中,搅拌反应,反应完毕后,离心去除上清液,得到表面活化的荧光乳胶微球;其中,所述表面活性剂含有聚乙二醇单月桂酸酯和硬脂酸钠,二者的重量比为0.5~5:1。

    权利要求书

    1.一种25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用活化荧光乳胶微球的制备方法,其特征
    在于,包括如下步骤:
    1)取表面活性剂加入pH为8~10的缓冲溶液中,再加入二甲基甲酰胺、N,N’-二环己基碳
    二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺;
    2)取氨基表面的荧光乳胶微球的分散液,以缓冲溶液调pH至8~10后,加入到步骤1)所
    得的混合物中,搅拌反应,反应完毕后,离心去除上清液,得到活化荧光乳胶微球;
    其中,所述表面活性剂含有聚乙二醇单月桂酸酯和硬脂酸钠,二者的重量比为0.5~5:
    1。
    2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述表面活性剂还含有椰油?;劝?br />酸三乙醇胺盐,聚乙二醇单月桂酸酯、硬脂酸钠和椰油?;劝彼崛掖及费蔚闹亓勘任?br />0.5~5:1:2~4。
    3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述表面活性剂为聚乙二醇单月桂酸
    酯、硬脂酸钠和椰油?;劝彼崛掖及费沃亓勘任?:1:3的混合物。
    4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述表面活性剂与所述氨基表面的荧
    光乳胶微球的质量比为500~2000:1。
    5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1)和步骤2)中所述的缓冲溶液为
    碳酸缓冲液;步骤2)中的搅拌反应时间为2~4小时,温度为20~30℃;氨基表面的荧光乳胶微
    球为氨基聚苯乙烯荧光微球。
    6.权利要求1~5任一项所述的制备方法得到的25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用
    活化荧光乳胶微球。
    7.权利要求6所述的25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用活化荧光乳胶微球的标记
    物工作液的制备方法,其特征在于,取25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条用活化荧光乳
    胶微球分散于微球缓冲液中,得到标记物工作液;表面活化的荧光乳胶微球在标记物工作
    液中所占的比例为0.5~2wt%;
    其中,微球缓冲液的制备方法为:将BSA、生物防腐剂、雷米邦A和甜菜碱溶于0.01M、
    pH7.4的磷酸缓冲液中。
    8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于, BSA、生物防腐剂、雷米邦A和甜菜碱
    在所述微球缓冲液中的浓度均为0.1wt%。
    9.25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条的标记物垫的制备方法,其特征在于,包括如
    下步骤:
    1)活化荧光乳胶微球标记的兔IgG的制备:取权利要求7或8所述制备方法得到的标记
    物工作液,离心,弃上清液后,用标记缓冲液复溶,并且同时加入碳二亚胺和兔IgG,搅拌反
    应,然后离心,弃上清液,最后用标记稀释液复溶;
    2)活化荧光乳胶微球标记的标记用鼠抗人25-羟基维生素D单克隆抗体的制备方法:取
    权利要求7或8所述制备方法得到的标记物工作液,离心,弃上清液后用标记缓冲液复溶,并
    且同时加入碳二亚胺和标记用鼠抗人25-羟基维生素D单克隆抗体,搅拌反应,搅拌,然后离
    心,弃上清液,最后用标记稀释液复溶;
    3)取步骤1)所得分散液和步骤2)所得分散液,混合,喷涂于玻璃纤维之上,烘干;
    所述标记缓冲液的配方为:碳酸钠4.33g、碳酸氢钠2.96g,溶于1000mL水中;所述标记
    稀释液的配方为:柠檬酸三钠7.33g、柠檬酸4.44g、氢氧化钠1g,溶于1000mL水中。
    10.一种25-羟基维生素D荧光免疫层析试纸条,其特征在于,包括权利要求9所述的标
    记物垫、包被垫和吸收垫,其中所述标记物垫搭接于包被垫的一端上,吸收垫搭接于包被垫
    的另一端上,包被垫上设有质控线和检测线,质控线上包被有羊抗兔IgG的抗体,检测线上
    包被有25-羟基维生素D完全抗原。

    关 键 词:
    25 羟基 维生素 荧光 免疫 层析 活化 乳胶
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