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    重庆时时彩开奖爱彩网: 一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒及其制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201610792065.3

    申请日:

    2016.08.31

    公开号:

    CN106405103A

    公开日:

    2017.02.15

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/68申请日:20160831|||公开
    IPC分类号: G01N33/68; G01N33/531 主分类号: G01N33/68
    申请人: 杨世东
    发明人: 杨世东
    地址: 262199 山东省潍坊市安丘市健康路259号
    优先权:
    专利代理机构: 贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙) 52110 代理人: 管宝伟
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201610792065.3

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.03.15|||2017.02.15

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明提供了一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,所述试剂盒由包括试纸条、微孔条、微孔试剂和微孔塞,所述试纸条由样品吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC底板相互粘贴制成;所述硝酸纤维素膜上包被有检测线1、检测线2、检测线3和一条质控线,所述检测线1包被有抗RA33特异性抗体,所述检测线2包被有抗角蛋白特异性抗体(AKA),所述检测线3包被有抗免疫球蛋白IgG抗体,所述质控线包被有羊抗鼠IgM单克隆抗体;所述微孔试剂为冻干的纳米金标记的抗RA33特异性抗体、纳米金标记的抗角蛋白特异性抗体(AKA)和纳米金标记的抗免疫球蛋白IgG抗体;本发明操作简单、特异性强、灵敏度高,可对类风湿关节炎进行快速诊断,具有很好的临床意义。

    权利要求书

    1.一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在于,包括试纸条、微孔
    条、微孔试剂和微孔塞,所述试纸条由样品吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC底板相互粘
    贴制成;所述硝酸纤维素膜上包被有检测线1、检测线2、检测线3和一条质控线,所述检测线
    1包被有抗RA33特异性抗体,所述检测线2包被有抗角蛋白特异性抗体(AKA),所述检测线3
    包被有抗免疫球蛋白IgG抗体,所述质控线包被有羊抗鼠IgM单克隆抗体;所述微孔试剂为
    冻干的纳米金标记的抗RA33特异性抗体、纳米金标记的抗角蛋白特异性抗体(AKA)和纳米
    金标记的抗免疫球蛋白IgG抗体。
    2.根据权利要求1所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,所述微孔条底部含有冻干的纳米金标记的抗RA33特异性抗体、纳米金标记的抗角蛋白
    特异性抗体(AKA)和纳米金标记的抗免疫球蛋白IgG抗体的微孔试剂,所述微孔条上具有微
    孔塞,所述微孔塞能够紧密地塞在微孔条中。
    3.根据权利要求1所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,所述抗RA33特异性抗体为来自HeLa细胞的单克隆抗体,所述抗角蛋白特异性抗体(AKA)
    为角蛋白与载体蛋白偶联物为免疫原制备的单克隆抗体,所述抗免疫球蛋白IgG抗体为抗
    免疫球蛋白的单克隆抗体。
    4.根据权利要求3所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或人血清白蛋白。
    5.根据权利要求1所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,所述样品吸收垫经处理液处理,所述处理液是由1.5g牛血清蛋白(BSA)和1.2g氯化钠,
    1g的海藻糖用0.01mol/LPBS定容至100mL。
    6.根据权利要求1所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,所述的胶体金标记抗体的制备方法为:
    a.所述胶体金溶液的制备方法为:将质量浓度为0.01%的氯金酸溶液200ml,加热至沸
    腾后迅速加入2ml浓度为1%的柠檬酸三钠水溶液,加热煮沸10min,冷却后以蒸馏水恢复到
    原体积,得到胶体金溶液;
    b.将制备好的胶体金溶液取出10mL的量共3份,取抗RA33特异性抗体、抗角蛋白特异性
    抗体(AKA)和抗免疫球蛋白IgG抗体各40μg分别加入上述所取的三份胶体金溶液中,搅拌,
    再分别加入质量浓度为5%的胎牛血清,其加入量为使总溶液最终浓度为0.9%,先以350r/
    min的转速低速离心,再以2000r/min的转速高速离心,取上清液,4℃下保存,即得到纯化的
    胶体金标记的抗RA33特异性抗体、胶体金标记的抗角蛋白特异性抗体(AKA)和抗胶体金标
    记的免疫球蛋白IgG抗体。
    7.根据权利要求1所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒,其特征在
    于,所述硝酸纤维素膜的包被方法为:在硝酸纤维素膜特定位置上划出检测线1,检测线2,
    检测线3和质控线的位置,检测线1上喷涂包被有胶体金标记的抗RA33单克隆抗体,检测线2
    上喷涂包被有胶体金标记的抗角蛋白单克隆抗体,检测线3上喷涂包被有胶体金标记的抗
    免疫球蛋白IgG单克隆抗体,质控线上喷涂包被有羊抗鼠IgM单克隆抗体。
    8.根据权利要求1-7所述的一种检测类风湿关节炎的胶体金免疫层析试剂盒的制备方
    法为:
    (1)分别制备冻干有纳米金标记的抗RA33特异性抗体、纳米金标记的抗角蛋白特异性
    抗体(AKA)和纳米金标记的抗免疫球蛋白IgG抗体的微孔试剂,包括以下方法:a.所述胶体
    金溶液的制备方法为:将质量浓度为0.01%的氯金酸溶液200ml,加热至沸腾后迅速加入
    2ml浓度为1%的柠檬酸三钠水溶液,加热煮沸10min,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,得到
    胶体金溶液;b.将制备好的胶体金溶液取出10mL的量共3份,取抗RA33特异性抗体、抗角蛋
    白特异性抗体(AKA)和抗免疫球蛋白IgG抗体各40μg分别加入上述所取的三份胶体金溶液
    中,搅拌,再分别加入质量浓度为5%的胎牛血清,其加入量为使总溶液最终浓度为0.9%,
    先以350r/min的转速低速离心,再以2000r/min的转速高速离心,取上清液,4℃下保存,即
    得到纯化的胶体金标记的抗RA33特异性抗体、胶体金标记的抗角蛋白特异性抗体(AKA)和
    抗胶体金标记的免疫球蛋白IgG抗体,对其进行冻干处理即得;
    (2)样品吸收垫的制备方法:样品吸收垫经处理液处理,所述处理液是由1.5g牛血清蛋
    白(BSA)和1.2g氯化钠,1g的海藻糖用0.01mol/LPBS定容至100mL;
    (3)所述硝酸纤维素膜的包被方法为:在硝酸纤维素膜特定位置上划出检测线1,检测
    线2,检测线3和质控线的位置,检测线1上喷涂包被有胶体金标记的抗RA33单克隆抗体,检
    测线2上喷涂包被有胶体金标记的抗角蛋白单克隆抗体,检测线3上喷涂包被有胶体金标记
    的抗免疫球蛋白IgG单克隆抗体,质控线上喷涂包被有羊抗鼠IgM单克隆抗体;
    (4)试纸条制备:将样品吸收垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC底板相互粘贴制成试纸条,
    干燥处理即得;
    (5)将微孔试剂、微孔条、微孔塞和试纸条组装成试剂盒。

    关 键 词:
    一种 检测 类风湿 关节炎 胶体 免疫 层析 试剂盒 及其 制备 方法
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