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    重庆时时彩旧时时彩: 抗25?羟基维生素D3单克隆抗体及其制备细胞株和方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201610999897.2

    申请日:

    2016.11.14

    公开号:

    CN106381289A

    公开日:

    2017.02.08

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):C12N 5/20申请日:20161114|||公开
    IPC分类号: C12N5/20; C07K16/44; G01N33/82; G01N33/577; C12R1/91(2006.01)N 主分类号: C12N5/20
    申请人: 刘玲
    发明人: 刘玲
    地址: 646321 四川省泸州市纳溪区丰乐镇新建街117号附73号
    优先权:
    专利代理机构: 北京科石知识产权代理有限公司 11595 代理人: 高元吉;朱春野
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201610999897.2

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.03.08|||2017.02.08

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明提供抗25?羟基维生素D3单克隆抗体及其制备细胞株和方法。通过优化杂交瘤细胞制备过程,和/或优化单克隆细胞株的筛选过程,从而得到产生抗25?羟基维生素D3单克隆抗体的细胞株及单克隆抗体。本发明优化了制备细胞株或抗体的制备步骤,减少了筛选次数,提高了抗25?羟基维生素D3单克隆抗体细胞株的制备效率,降低了生产成本。另外,本发明的单克隆抗体的亲和力大于3.84×109,其与25?羟基维生素D2的交叉反应低于10%。

    权利要求书

    1.一种细胞株的制备方法,其中所述细胞株产生抗25-羟基维生素D3单克隆抗体,所述
    方法包括:
    a)用免疫抗原免疫动物的步骤,其中所述免疫抗原为通过使作为载体的大分子蛋白质
    与作为半抗原的25-羟基维生素D3经由交联基团偶联制得的非水溶性抗原,且所述大分子
    蛋白质与所述25-羟基维生素D3的偶联摩尔比为1:80至1:100;
    b)细胞融合步骤,使所述动物的脾细胞与同系骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞;
    c)利用筛选抗原筛选阳性细胞株的步骤,其中所述筛选抗原不包含所述交联基团。
    2.根据权利要求1所述的制备方法,其中所述大分子蛋白质为血清白蛋白。
    3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中所述交联基团为多元羧酸酯键。
    4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中所述筛选抗原不包含多元羧酸酯键。
    5.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中所述筛选抗原为大分子蛋白质与25-羟基
    维生素D3氨基衍生物的偶联分子。
    6.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中步骤a)中使用所述免疫抗原与用于将其分
    离的凝胶的混合物直接免疫动物。
    7.一种细胞株,其通过根据权利要求1-6任一项所述的制备方法获得。
    8.一种生产抗25-羟基维生素D3单克隆抗体的方法,其包括根据权利要求1-6任一项所
    述的制备方法作为其中的步骤,或者包括培养根据权利要求7所述的细胞株的步骤。
    9.一种单克隆抗体,其与25-羟基维生素D3的亲和力大于3.84×109,且其与25-羟基维
    生素D2的交叉反应低于10%。
    10.一种胶体金试纸条,其包含根据权利要求9所述的单克隆抗体。

    关 键 词:
    25 羟基 维生素 D3 单克隆抗体 及其 制备 细胞株 方法
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