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    重庆时时彩后一稳赚的技巧: 一种中药涩味评价模型的造模方法.pdf

    关 键 词:
    一种 中药 涩味 评价 模型 方法
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    摘要
    申请专利号:

    CN201710041521.5

    申请日:

    2017.01.20

    公开号:

    CN106771018A

    公开日:

    2017.05.31

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/15申请日:20170120|||公开
    IPC分类号: G01N33/15; G01N1/28 主分类号: G01N33/15
    申请人: 成都中医药大学附属医院
    发明人: 林俊芝; 张定堃; 李晖; 韩丽; 韩雪; 姜红
    地址: 610000 四川省成都市金牛区十二桥路39号
    优先权:
    专利代理机构: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 李高峡;全学荣
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201710041521.5

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.06.23|||2017.05.31

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明提供了一种中药涩味评价模型的造模方法,它包括如下步骤:a、选择鞣酸作为涩味标准物,溶于去离子水中;b、采用双瓶喜好实验测定偏好指数;c、将偏好指数与鞣酸浓度拟合,得到Log2P2模型,浓度??偏好指数方程为Y=ln(1.6826??0.44166X),其中Y为偏好指数,X为鞣酸浓度。本发明提供了一种中药涩味的统一量化评价方法,通过以鞣酸作为涩味标准物,统一量化中药的涩味,准确度高,该方法的建立,为中药涩味的精准量化以及掩味效果的客观评价提供了可靠的工具,也为药品、食品领域其他味觉的量化评价提供了新的思路与范例。

    权利要求书

    1.一种中药涩味评价模型的造模方法,其特征在于:它包括如下步骤:
    a、选择鞣酸作为涩味标准物,溶于去离子水中;
    b、采用双瓶喜好实验测定偏好指数;
    c、将偏好指数与鞣酸浓度拟合,得到Log2P2模型,浓度-偏好指数方程为Y=ln
    (1.6826-0.44166X),其中Y为偏好指数,X为鞣酸浓度。
    2.根据权利要求1所述的造模方法,其特征在于:所述的鞣酸浓度为0~1mg·mL-1。
    3.根据权利要求1所述的造模方法,其特征在于:b步骤所述的偏好指数的测定方法为:
    1)将SD大鼠单独隔开饲养于25℃的恒温环境7天,正常喂食及去离子水;
    2)实验时,在饲养笼盖两边放置分别装有样品和去离子水的水瓶,观察记录24h内两瓶
    的消耗体积;
    3)调换双瓶的位置,再次记录24h内双瓶的消耗量;
    4)测定样品溶液消耗量、消耗总量;
    5)计算偏好指数:

    4.根据权利要求3所述造模方法,其特征在于:所述的SD大鼠为雌性大鼠。
    5.根据权利要求4所述造模方法,其特征在于:所述的SD雌性大鼠的体重在140-180g。
    6.一种中药涩度的评价方法,其特征在于:它包括如下步骤:
    a、取待检中药材,粉碎成粗颗粒,加水浸泡,加热回流,放冷,过滤,定容;
    b、采用双瓶喜好实验测偏好指数;
    c、将偏好指数代入权利要求1-5任意一项所述的鞣酸浓度-偏好指数方程,换算得到与
    样品涩度相当的鞣酸浓度,通过换算的鞣酸浓度判断药材涩度。

    说明书

    一种中药涩味评价模型的造模方法

    技术领域

    本发明涉及一种中药涩味评价模型的造模方法,具体地,是涉及一种中药涩味的
    统一量化评价方法。

    背景技术

    涩味,作为药物的真实滋味,是中药常见的不良口感之一,在中药中具有一定的普
    遍性,是影响中药制剂口感的重要因素。

    为了区分涩味程度,前人经验性地将涩味分级为极涩、涩、微涩或稍涩等。然而,这
    种分类主要依赖受试者的个人感官认知,具有高度的主观性与模糊性,缺少统一、客观、量
    化的评价指标,不利于涩味程度的精准表征,也制约了对掩味效果的客观评价。

    现有的涩味评价主要包括体内实验与体外实验。在体实验主要采用志愿者口尝为
    主,该法最突出的优点在于能真实反映人体对味道的感知,但对受试人员的经验要求较高,
    操作繁琐费时,且受试人员主观性强、个体差异明显,此外,部分样品可能存在一定的毒性
    或刺激性,使得该法的应用受到诸多限制,主要用于定性分类鉴别,定量效果较差。

    为了解决定量问题,一些经验性、半定量的数学模型及评价方法被提出。依据多酚
    对蛋白质的沉淀作用,提出用明胶指数表征涩味,即通过透过率和浊度表示涩味强度,但明
    胶的质量随来源、生产工艺的影响很大,性质不稳定,不是理想的标准物质。

    电子舌是近年发展起来的一种新型体外味觉评价技术。作为一种和人类味觉系统
    相仿的味道鉴别仪器,通过传感器阵列产生响应电信号,经计算机模式识别系统处理数据,
    便可得到反映该样品的特有味觉信息。电子舌最突出的优势在于其检测的灵敏与快捷,甚
    至能用于许多口尝实验无法区分的样品鉴别。但该系统对浓度要求较高,一般需稀释处理,
    避免浓度过高损伤传感器的灵敏度,降低了体内外评价的相关性。

    因此,需要一种中药涩味的统一量化评价方法。

    发明内容

    本发明的技术方案是提供了一种中药涩味评价模型的造模方法。本发明的另一技
    术方案是提供了一种中药涩度的评价方法。

    本发明提供了一种中药涩味评价模型的造模方法,它包括如下步骤:

    a、选择鞣酸作为涩味标准物,溶于去离子水中;

    b、采用双瓶喜好实验测定偏好指数;

    c、将偏好指数与鞣酸浓度拟合,得到Log2P2模型,浓度-偏好指数方程为Y=ln
    (1.6826-0.44166X),其中Y为偏好指数,X为鞣酸浓度。

    其中,所述的鞣酸浓度为0~1mg·mL-1。

    其中,b步骤所述的偏好指数的测定方法为:

    1)将SD大鼠单独隔开饲养于25℃的恒温环境7天,正常喂食及去离子水;

    2)实验时,在饲养笼盖两边放置分别装有样品和去离子水的水瓶,观察记录24h内
    两瓶的消耗体积;

    3)调换双瓶的位置,再次记录24h内双瓶的消耗量;

    4)测定样品溶液消耗量、消耗总量;

    5)计算偏好指数:


    其中,所述的SD大鼠为雌性大鼠。

    其中,所述的SD雌性大鼠的体重在140-180g。

    本发明还提供了一种中药涩度的评价方法,它包括如下步骤:

    a、取待检中药材,粉碎成粗颗粒,加水浸泡,加热回流,放冷,过滤,定容;

    b、采用双瓶喜好实验淀偏好指数;

    c、将偏好指数代入鞣酸浓度-偏好指数方程,换算得到与样品涩度相当的鞣酸浓
    度,通过换算的鞣酸浓度判断药材涩度。

    本发明提供了一种中药涩味的统一量化评价方法,通过以鞣酸作为涩味标准物,
    统一量化中药的涩味,准确度高,该方法的建立,为中药涩味的精准量化以及掩味效果的客
    观评价提供了可靠的工具,也为药品、食品领域其他味觉的量化评价提供了新的思路与范
    例。

    附图说明

    图1优化的鞣酸浓度-偏好指数曲线

    图2样品涩味定量表征,A:样品的偏好指数,B:基于鞣酸浓度-偏好指数曲线换算
    的涩味定量

    图3电子舌验证结果,A:电子舌传感器RSD%雷达图;B:验证结果PCA及欧氏距离
    图,C:欧氏距离与样品偏好指数相关性分析,D:欧氏距离与样品对应的鞣酸浓度相关性分
    析。

    具体实施方式

    实施例1:双瓶喜好实验方法学优化与验证

    双瓶喜好实验为在动物饲养笼外放置相同的2个外形一致的饮水瓶,根据受试动
    物对不同样品的饮水量(通常与对照品组相比较)及饮水时的自身反应程度(摇头、躁动等
    一些逃避反应)进行综合评价。研究表明,不同性别、体重对味觉有不同的敏感性,因而将性
    别、体重列为考察指标。测试方法参照美国Monell Chemical Senses Center的实验方法。

    1.涩味标准物的选择

    目前公认的涩味化合物主要有表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、鞣酸、硫酸铝
    钾等。而EGCG存在苦的兼味,其浓度高低对味道的表达有影响;同时其为茶叶的主要成分,
    具有成瘾性,长期摄取会对实验测量结果造成误差。硫酸铝钾的涩味主要是水解形成带正
    电的胶体状Al(OH)3,通过与带负电的蛋白质吸附沉淀而产生收敛感,与酚类化合物的涩味
    形成机制明显不同。因此,最终选择鞣酸作为酚类化学物的涩味标准物。

    2.鞣酸样品溶液的制备

    取鞣酸溶于去离子水中,分别制得浓度为0、0.25、0.5、1、2、4mg·mL-1的样品溶液。

    3.双瓶喜好实验方法学考察

    将SD大鼠单独隔开饲养于25℃的恒温环境7天,正常喂食及去离子水。实验时,在
    饲养笼盖两边放置分别装有样品和去离子水的水瓶。观察记录24h内两瓶的消耗体积。然后
    调换双瓶的位置,再次记录24h内双瓶的消耗量。测试下一样品前,将两个水瓶均装去离子
    水饲养48h。测试过程中,为了克服“饱和效应”,样品浓度由低到高进行。偏好指数计算公式
    如下:


    偏好指数大于0.5,表明实验对象对该溶液呈喜好状态;偏好指数小于0.5,则表明
    呈厌恶状态。偏好指数与0.5的差值的绝对值越大,喜好或厌恶程度越高。

    (1)性别考察

    将180~220g的SD大鼠,分为雄、雌两组,每组各10只,进行实验,比较实验结果的
    组间差异来优选动物性别。

    性别考察结果表明,雄性组的RSD%整体高于雌性组,说明雄性对涩味的反应变异
    较大,而雌性较为稳定,因而选择雌性大鼠进行后续实验。

    (2)体重考察

    根据性别考察结果,将140~180g、180~220g、220~260g的SD雌性大鼠分为三组,
    每组10只,进行实验,比较实验结果的组间差异来优选动物体重。

    体重考察结果表明,140-180g组RSD%低于180-220g组、220-260g组,说明140-
    180g范围内的大鼠对涩味反应较为稳定。因而确定140-180g范围的雌性大鼠为最优选择。

    (3)鞣酸浓度-偏好指数曲线的考察

    根据性别及体重考察结果,选择140-180g的健康雌性SD大鼠进行验证,得到鞣酸
    浓度-偏好指数曲线,结果见图1。

    鞣酸浓度与偏好指数的相关性分析结果表明,在0~1mg·mL-1浓度范围内,偏好指
    数随浓度的增加而下降,说明实验动物对高浓度鞣酸的厌恶程度明显增加。但当鞣酸浓度
    超过1mg·mL-1时,偏好指数并不随浓度的增加而继续下降,说明此时大鼠对鞣酸的厌恶程
    度已经很高。因而选择对前4个浓度鞣酸的浓度与偏好指数进行拟合,结果见表1。优选出
    Log2P2模型,浓度-偏好指数方程为Y=ln(1.6826-0.44166X),R=0.997。

    表1 鞣酸浓度与偏好指数拟合方程



    实施例2:典型药物涩味的定量表征

    将干燥的诃子、矮地茶、青果、儿茶、大腹皮粉碎成粗颗粒,分别称取各药物2g,加
    去离子水200mL,浸泡30min,加热回流1h,放冷,过滤,定容至1000mL,备用。采用双瓶喜好实
    验测定偏好指数,然后将偏好指数代入鞣酸浓度-偏好指数方程,换算得到与样品涩度相当
    的鞣酸浓度,结果见图2A、2B。

    由结果可知,2mg·mL-1诃子、矮地茶、儿茶、青果及大腹皮分别相当于0.56、0.29、
    0.34、0.24、0.25mg·mL-1鞣酸的的涩度;即1mg诃子、矮地茶、儿茶、青果及大腹皮分别相当
    于0.28、0.15、0.17、0.12、0.12mg鞣酸的涩度。诃子的涩味明显强于其他4种药物。

    实施例3:电子舌实验对双瓶喜好实验结果的验证

    双瓶喜好实验为体内实验,由于个体对涩味的敏感度不同,因而采用仿生味觉传
    感器—电子舌对结果进行体外的验证。

    1.电子舌分析方法

    信号采集参数为采集温度25℃,数据采集时间120s,采集周期1s,搅动速度1r·s
    -1。以超纯水为清洗液,每次测量样品前清洗传感器10s。将以上五种涩味中药溶液与相应的
    浓度鞣酸溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后置于50mL标配烧杯中,进行测定。每份样品按上述
    方法平行测定10次,为得到稳定可靠数据,取其中最后3次数据作为输出值;每份样品的3次
    输出值取平均值作为后期处理数据。

    2.验证结果

    验证结果显示,电子舌传感器的RSD%均小于2%,说明仪器稳定性良好。采用主成
    分分析(PCA)对电子舌结果进行分析(图2B),并采用Simca-p11.0软件作图。主成分1贡献率
    为81.47%,主成分2贡献率为11.49%,前两个主成分包含了全部变量信息的92.96%。采用
    欧氏距离(Euclidean distance,D)来表征样品的涩度。二维和三维空间中的欧氏距离的就
    是两点之间的距离。计算公式为:


    其中k表示每个样本有k个变量,xi表示第1个样本在第i个变量上的取值;yi表示第
    2个样本在第i个变量上的取值。计算结果见图3,距离(Ds)越短,表明二者涩度越相近。由欧
    氏距离推断涩味强度关系为:诃子>儿茶>矮地茶>青果>大腹皮。

    将样品的欧氏距离与偏好指数进行Pearson相关性分析(SPSS22.0软件),拟合方
    程为Y=0.3208+0.0219X,R=0.962;欧氏距离与同样品涩度相同的鞣酸浓度相关性方程为
    Y=0.6994-0.075X,R=0.973。欧氏距离与二者的相关性均较高,说明电子舌结果与动物偏
    好实验结果一致性高。电子舌实验结果证明了动物偏好实验结果的可靠性。

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