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    重庆时时彩后三组六杀号技巧: 一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法及应用.pdf

    关 键 词:
    一种 基于 负载 硫化铜 纳米 夹心 免疫 传感器 制备 方法 应用
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    摘要
    申请专利号:

    CN201710075049.7

    申请日:

    2017.02.13

    公开号:

    CN106770529A

    公开日:

    2017.05.31

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 27/26申请日:20170213|||公开
    IPC分类号: G01N27/26; G01N27/327; G01N27/48; G01N33/574 主分类号: G01N27/26
    申请人: 山东理工大学
    发明人: 李月云; 吕慧; 张晓波; 高增强; 冯金慧; 董云会
    地址: 255086 山东省淄博市高新技术开发区高创园A座313室
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201710075049.7

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2019.02.15|||2017.06.23|||2017.05.31

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明属于新型功能材料与生物传感检测技术领域,提供了一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法及应用;具体是采用银负载的硫化铜纳米线作为检测抗体标记物,实现了肺癌癌标志物CA125、CA153、SCCA的检测,具有特异性强,灵敏度高,检测限低,对肺癌的早期检测具有重要的科学意义和应用价值。

    权利要求书

    1.一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,其特征在于,步骤
    如下:
    (1)将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨,超纯水清洗干净;
    (2)取6 μL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的[email protected]滴涂到电极表面,室温下晾干,用超纯水冲洗
    电极表面,晾干;
    (3)继续将6 μL、10 ~ 15 μg/mL的肿瘤标志物捕获抗体滴加到电极表面,超纯水冲洗,
    4°C冰箱中干燥;
    (4)继续将3 μL、2.0~ 3.0 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中晾干;
    (5)滴加6 μL、0.1pg ~ 30 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中干燥;
    (6)将6 μL、1 ~ 3 mg/mL的银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液,滴涂于电极表
    面上,置于4°C冰箱中晾干,制得一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器。
    2.如权利要求1所述的一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方
    法,所述[email protected] 的制备,步骤如下:
    取25 mL,2 mmoL.L-1的L-半胱氨酸L-cys于烧杯中,边搅拌边依次加入1 ~ 3 mL质量分
    数为1%的聚乙烯吡咯烷酮PVP,1 ~ 3 mL、0.1 moL.L-1的抗坏血酸和2 ~ 4 mL、0.1 moL.L-1
    的AgNO3溶液,室温下磁力搅拌10 min;离心分离,超纯水洗涤三次,65°C真空干燥6 ~10h,
    制得[email protected]。
    3.如权利要求1所述的一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方
    法,所述银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备,步骤如下:
    (1)硫化铜纳米线的合成
    称取1 ~ 3 mmol CuCl2溶解于50 ml水中,边搅拌边依次加入1 ~ 3 mmol的十六烷基胺
    和0.2 g葡萄糖,溶解后转移到100 mL高压反应釜中60°C反应4 ~ 5 h,升温到120°C反应3
    ~ 4 h,离心分离;将分离得到的固体分散到50 mL 、0.2 moL.L-1 的Na2S溶液中,加入6 ~
    10 mg PVP,继续搅拌30 min后转移到高压反应釜中,在120°C下反应2 ~ 3 h,冷却到室温,
    在12000 rpm离心10min,超纯水洗涤三次,50°C真空干燥箱中干燥12 ~ 14 h,制得硫化铜
    纳米线;
    (2)银负载硫化铜纳米线的合成
    将0.1 ~ 0.3 g硫化铜纳米线分散于100 mL超纯水中,搅拌条件下加入10 mL、0.1
    moL.L-1的AgNO3溶液和1.5 mL、质量分数为1%的PVP溶液,搅拌10 min后,加入10 mL,0.1
    moL.L-1的抗坏血酸,搅拌30 min,离心分离,超纯水洗涤三次,60°C真空干燥箱中干燥12 ~
    14 h,制得银负载硫化铜纳米线;
    (3)银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备
    将2~ 4 mg的银负载硫化铜纳米线溶于1 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中,震荡溶解,
    再加入100 μL、80 ~ 120 μg/mL的肿瘤标志物检测抗体溶液和900 μL、50 mmol/L的pH 7.4
    的磷酸盐缓冲溶液,4°C恒温振荡培养箱中振荡,孵化12 h,制得银负载硫化铜纳米线检测
    抗体孵化物溶液,4°C下保存备用。
    4.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传
    感器,用于肿瘤标志物的检测,检测步骤如下:
    (1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为
    辅助电极,所制备的传感器为工作电极,在10 mL、含4 mmoL.L-1的铁氰化钾和0.1 moL.L-1
    的硝酸钾溶液中进行测试;
    (2)用方波伏安法对分析物进行检测,初始电位为0 V,终止电位为0.4 V,电位增量为
    0.004 V,振幅为0.025 V,静置时间为2 s,记录电流变化。
    5.如权利要求1、3或4所述的一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制
    备方法及应用,其特征在于,所述肿瘤标志物选自下列之一: CA125、CA153、SCCA。

    说明书

    一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法及应用

    技术领域

    本发明属于免疫分析和生物传感技术领域,提供了一种基于银负载硫化铜纳米线
    的夹心型免疫传感器的制备方法及应用。

    背景技术

    在许多国家和地区,肺癌的发病率占恶性肿瘤的首位,对人类的健康产生极大危
    害。肺癌肿瘤标志物的灵敏检测,在临床上对于肿瘤的早期发现,肿瘤高危人群的筛选、良
    性和恶性肿瘤的鉴别诊断、肿瘤发展程度的判断,肿瘤的治疗效果的观察和评价及肿瘤复
    发和预后的预测产生极大的影响。

    目前电化学免疫传感器已经广泛用于肺癌及各种肿瘤标志物的检测,夹心型电化
    学免疫传感器结合了高特异性的免疫分析技术和高灵敏的电化学分析技术,具有灵敏度
    高、制备简单、检测快速、成本低等优点,在临床检验、环境监测、食品安全控制、生物监测等
    领域都有重要的应用价值。

    本发明中使用的硫化铜的形貌为纳米线,具有良好的稳定性和催化性能,具有更
    多的结合位点,能有效吸附固载肿瘤标志物抗体。硫化铜纳米线通过S-Ag键可以与银纳米
    粒子稳定的结合,由于二者的协同催化作用有助于提高材料的电化学性质。

    发明内容

    本发明提供了一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法及
    应用,实现了对肺癌标志物的超灵敏检测。

    本发明的目的之一是提供一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的
    制备方法。

    本发明的目的之二是将所制备的一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传
    感器应用于肺癌标志物的高灵敏、特异性检测。

    本发明的技术方案,包括以下步骤。

    1. 一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,步骤如下:

    (1)将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨,超纯水清洗干净;

    (2)取6 μL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的[email protected]滴涂到电极表面,室温下晾干,用超纯水冲洗
    电极表面,晾干;

    (3)继续将6 μL、10 ~ 15 μg/mL的肿瘤标志物捕获抗体滴加到电极表面,超纯水冲洗,
    4°C冰箱中干燥;

    (4)继续将3 μL、2.0~ 3.0 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中晾干;

    (5)滴加6 μL、0.1pg ~ 30 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中干燥;

    (6)将6 μL、1 ~ 3 mg/mL的银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液,滴涂于电极表
    面上,置于4°C冰箱中晾干,制得一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器。

    2.一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,所述[email protected]
    的制备,步骤如下:

    取25 mL,2 mmoL.L-1的L-半胱氨酸L-cys于烧杯中,边搅拌边依次加入1 ~ 3 mL质量
    分数为1%的聚乙烯吡咯烷酮PVP,1 ~ 3 mL、0.1 moL.L-1的抗坏血酸和2 ~ 4 mL、0.1
    moL.L-1的AgNO3溶液,室温下磁力搅拌10 min;离心分离,超纯水洗涤三次,65°C真空干燥6
    ~10h,制得[email protected];

    3.一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,所述银负载硫化铜
    纳米线检测抗体孵化物溶液的制备,步骤如下:

    (1)硫化铜纳米线的合成

    称取1 ~ 3 mmol CuCl2溶解于50 ml水中,边搅拌边依次加入1 ~ 3 mmol的十六烷基
    胺和0.2 g葡萄糖,溶解后转移到100 mL高压反应釜中60°C反应4 ~ 5 h,升温到120°C反应
    3 ~ 4 h,离心分离;将分离得到的固体分散到50 mL 、0.2 moL.L-1 的Na2S溶液中,加入6 ~
    10 mg PVP,继续搅拌30 min后转移到高压反应釜中,在120°C下反应2 ~ 3 h,冷却到室温,
    在12000 rpm离心10min,超纯水洗涤三次,50°C真空干燥箱中干燥12 ~ 14 h,制得硫化铜
    纳米线;

    (2)银负载硫化铜纳米线的合成

    将0.1 ~ 0.3 g硫化铜纳米线分散于100 mL超纯水中,搅拌条件下加入10 mL、0.1
    moL.L-1的AgNO3溶液和1.5 mL、质量分数为1%的PVP溶液,搅拌10 min后,加入10 mL,0.1
    moL.L-1的抗坏血酸,搅拌30 min,离心分离,超纯水洗涤三次,60°C真空干燥箱中干燥12 ~
    14 h,制得银负载硫化铜纳米线;

    (3)银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备

    将2~ 4 mg的银负载硫化铜纳米线溶于1 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中,震荡溶解,
    再加入100 μL、80 ~ 120 μg/mL的肿瘤标志物检测抗体溶液和900 μL、50 mmol/L的pH 7.4
    的磷酸盐缓冲溶液,4°C恒温振荡培养箱中振荡,孵化12 h,制得银负载硫化铜纳米线检测
    抗体孵化物溶液,4°C下保存备用。

    4.一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器,用于肿瘤标志物的检测,
    步骤如下:

    (1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为
    辅助电极,所制备的传感器为工作电极,在10 mL,含4 mmoL.L-1的铁氰化钾和0.1 moL.L-1
    的硝酸钾溶液中进行测试;

    (2)用方波伏安法对分析物进行检测,初始电位为0 V,终止电位为0.4 V,电位增量为
    0.004 V,振幅为0.025 V,静置时间为2 s,记录电流变化。

    上述所述肿瘤标志物选自下列之一:CA125、CA153、SCCA。

    本发明所用原材料均可在化学试剂公司或生物制药公司购买。

    本发明的有益成果

    (1)本发明使用了L-半胱氨酸负载银纳米粒子[email protected]作为基底,纳米粒子具有大的
    比表面积,且L-半胱氨酸是亲水性物质,在水中有优越的分散性,且羧基能与肿瘤标志物抗
    体上的氨基有效结合,使得结合更加牢固,可增加与抗体结合数目及稳定性,;

    (2)采用银负载的硫化铜纳米线作为捕获抗体标记物,具有大的比表面积,Ag纳米粒子
    具有良好的催化性能,银负载的硫化铜纳米线具有良好的稳定性和催化性能,能有效吸附
    固载肿瘤标志物抗体。硫化铜纳米线通过S-Ag键可以与银纳米粒子稳定的结合,由于二者
    的协同催化作用有助于实现了放大电化学信号的作用,从而提高了传感器的灵敏度,降低
    了检测限;

    (3)一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器用于对肺癌标志物的检测,其
    对SCCA检测的线性范围0.1pg ~ 30 ng/mL,检测限最低0.03 pg/mL,对CA125检测的线性范
    围0.1pg ~ 20 ng/mL,检测限最低0.03 pg/mL,对CA153检测的线性范围0.5pg ~ 30 ng/
    mL,检测限最低0.17 pg/mL,表明一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器可以
    达到准确测定的目的。

    具体实施方式

    现将本发明通过具体实施方式进一步说明,但不限于此。

    实施例1一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,步骤如
    下:

    (1)将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨,超纯水清洗干净;

    (2)取6 μL、1.0 mg/mL的[email protected]滴涂到电极表面,室温下晾干,用超纯水冲洗电极表
    面,晾干;

    (3)继续将6 μL、10 μg/mL的肿瘤标志物捕获抗体滴加到电极表面,超纯水冲洗,4°C冰
    箱中干燥;

    (4)继续将3 μL、2.0 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面,超纯水冲洗电极
    表面,4°C冰箱中晾干;

    (5)滴加6 μL、0.1pg ~ 30 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中干燥;

    (6)将6 μL、1mg/mL的银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液,滴涂于电极表面上,
    置于4°C冰箱中晾干,制得一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器。

    实施例2 一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,步骤
    如下:

    (1)将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨,超纯水清洗干净;

    (2)取6 μL、2.0 mg/mL的[email protected]滴涂到电极表面,室温下晾干,用超纯水冲洗电极表
    面,晾干;

    (3)继续将6 μL、12 μg/mL的肿瘤标志物捕获抗体滴加到电极表面,超纯水冲洗,4°C冰
    箱中干燥;

    (4)继续将3 μL、2.5 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面,超纯水冲洗电极
    表面,4°C冰箱中晾干;

    (5)滴加6 μL、0.1pg ~ 30 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中干燥;

    (6)将6 μL、2 mg/mL的银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液,滴涂于电极表面上,
    置于4°C冰箱中晾干,制得一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器。

    实施例3一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法,步骤如
    下:

    (1)将直径为4mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨,超纯水清洗干净;

    (2)取6 μL、3.0 mg/mL的[email protected]滴涂到电极表面,室温下晾干,用超纯水冲洗电极表
    面,晾干;

    (3)继续将6 μL、15 μg/mL的肿瘤标志物捕获抗体滴加到电极表面,超纯水冲洗,4°C冰
    箱中干燥;

    (4)继续将3 μL、3.0 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面,超纯水冲洗电极
    表面,4°C冰箱中晾干;

    (5)滴加6 μL、0.1pg ~ 30 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液,超纯水冲
    洗电极表面,4°C冰箱中干燥;

    (6)将6 μL、3 mg/mL的银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液,滴涂于电极表面上,
    置于4°C冰箱中晾干,制得一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器。

    实施例4 [email protected] 的制备,步骤如下:

    取25 mL,2 mmoL.L-1的L-半胱氨酸L-cys于烧杯中,边搅拌边依次加入1 mL质量分数
    为1%的聚乙烯吡咯烷酮PVP,1mL、0.1 moL.L-1的抗坏血酸和2 mL、0.1 moL.L-1的AgNO3溶液,
    室温下磁力搅拌10 min;离心分离,超纯水洗涤三次,65°C真空干燥6 h,制得[email protected]。

    实施例5 [email protected] 的制备,步骤如下:

    取25 mL,2 mmoL.L-1的L-半胱氨酸L-cys于烧杯中,边搅拌边依次加入2 mL质量分数
    为1%的聚乙烯吡咯烷酮PVP,2 mL、0.1 moL.L-1的抗坏血酸和3 mL、0.1 moL.L-1的AgNO3溶
    液,室温下磁力搅拌10 min;离心分离,超纯水洗涤三次,65°C真空干燥8 h,制得[email protected]。

    实施例6 [email protected] 的制备,步骤如下:

    取25 mL,2 mmoL.L-1的L-半胱氨酸L-cys于烧杯中,边搅拌边依次加入3 mL质量分数
    为1%的聚乙烯吡咯烷酮PVP,3 mL、0.1 moL.L-1的抗坏血酸和4 mL、0.1 moL.L-1的AgNO3溶
    液,室温下磁力搅拌10 min;离心分离,超纯水洗涤三次,65°C真空干燥10 h,制得[email protected]
    Ag。

    实施例7银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备,步骤如下:

    (1)硫化铜纳米线的合成

    称取1 mmol CuCl2溶解于50 ml水中,边搅拌边依次加入1 mmol的十六烷基胺和0.2 g
    葡萄糖,溶解后转移到100 mL高压反应釜中60°C反应4 h,升温到120°C反应3 h,离心分离;
    将分离得到的固体分散到50 mL 、0.2 moL.L-1 的Na2S溶液中,加入6 mg PVP,继续搅拌30
    min后转移到高压反应釜中,在120°C下反应2 h,冷却到室温,在12000 rpm离心10min,超纯
    水洗涤三次,50°C真空干燥箱中干燥12 h,制得硫化铜纳米线;

    (2)银负载硫化铜纳米线的合成

    将0.1g硫化铜纳米线分散于100 mL超纯水中,搅拌条件下加入10 mL、0.1 moL.L-1的
    AgNO3溶液和1.5 mL、质量分数为1%的PVP溶液,搅拌10 min后,加入10 mL,0.1 moL.L-1的抗
    坏血酸,搅拌30 min,离心分离,超纯水洗涤三次,60°C真空干燥箱中干燥12 h,制得银负载
    硫化铜纳米线;

    (3)银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备

    将2 mg的银负载硫化铜纳米线溶于1 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中,震荡溶解,再
    加入100 μL、80 μg/mL的肿瘤标志物检测抗体溶液和900 μL、50 mmol/L的pH 7.4的磷酸盐
    缓冲溶液,4°C恒温振荡培养箱中振荡,孵化12 h,制得银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化
    物溶液,4°C下保存备用。

    实施例8 银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备,步骤如下:

    (1)硫化铜纳米线的合成

    称取2 mmol CuCl2溶解于50 ml水中,边搅拌边依次加入2 mmol的十六烷基胺和0.2 g
    葡萄糖,溶解后转移到100 mL高压反应釜中60°C反应4.5 h,升温到120°C反应3.5 h,离心
    分离;将分离得到的固体分散到50 mL 、0.2 moL.L-1 的Na2S溶液中,加入8 mg PVP,继续搅
    拌30 min后转移到高压反应釜中,在120°C下反应2.5h,冷却到室温,在12000 rpm离心
    10min,超纯水洗涤三次,50°C真空干燥箱中干燥13 h,制得硫化铜纳米线;

    (2)银负载硫化铜纳米线的合成

    将0.2 g硫化铜纳米线分散于100 mL超纯水中,搅拌条件下加入10 mL、0.1 moL.L-1的
    AgNO3溶液和1.5 mL、质量分数为1%的PVP溶液,搅拌10 min后,加入10 mL,0.1 moL.L-1的抗
    坏血酸,搅拌30 min,离心分离,超纯水洗涤三次,60°C真空干燥箱中干燥13 h,制得银负载
    硫化铜纳米线;

    (3)银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备

    将3 mg的银负载硫化铜纳米线溶于1 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中,震荡溶解,再
    加入100 μL、100 μg/mL的肿瘤标志物检测抗体溶液和900 μL、50 mmol/L的pH 7.4的磷酸
    盐缓冲溶液,4°C恒温振荡培养箱中振荡,孵化12 h,制得银负载硫化铜纳米线检测抗体孵
    化物溶液,4°C下保存备用。

    实施例9 银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备,步骤如下:

    (1)硫化铜纳米线的合成

    称取3 mmol CuCl2溶解于50 ml水中,边搅拌边依次加入3 mmol的十六烷基胺和0.2 g
    葡萄糖,溶解后转移到100 mL高压反应釜中60°C反应5 h,升温到120°C反应4 h,离心分离;
    将分离得到的固体分散到50 mL 、0.2 moL.L-1 的Na2S溶液中,加入10 mg PVP,继续搅拌30
    min后转移到高压反应釜中,在120°C下反应3 h,冷却到室温,在12000 rpm离心10min,超纯
    水洗涤三次,50°C真空干燥箱中干燥14 h,制得硫化铜纳米线;

    (2)银负载硫化铜纳米线的合成

    将0.3 g硫化铜纳米线分散于100 mL超纯水中,搅拌条件下加入10 mL、0.1 moL.L-1的
    AgNO3溶液和1.5 mL、质量分数为1%的PVP溶液,搅拌10 min后,加入10 mL,0.1 moL.L-1的抗
    坏血酸,搅拌30 min,离心分离,超纯水洗涤三次,60°C真空干燥箱中干燥14 h,制得银负载
    硫化铜纳米线;

    (3)银负载硫化铜纳米线检测抗体孵化物溶液的制备

    将4 mg的银负载硫化铜纳米线溶于1 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液中,震荡溶解,再
    加入100 μL、120 μg/mL的肿瘤标志物检测抗体溶液和900 μL、50 mmol/L的pH 7.4的磷酸
    盐缓冲溶液,4°C恒温振荡培养箱中振荡,孵化12 h,制得银负载硫化铜纳米线检测抗体孵
    化物溶液,4°C下保存备用。

    实施例10肿瘤标志物CA125的检测,步骤如下:

    (1)使用电化学工作站以三电极体系进行测试,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为
    辅助电极,所制备的传感器为工作电极,在10 mL、含4 mmoL.L-1的铁氰化钾和0.1 moL.L-1
    的硝酸钾溶液中进行测试;

    (2)用方波伏安法对分析物进行检测,初始电位为0 V,终止电位为0.4 V,电位增量为
    0.004 V,振幅为0.025 V,静置时间为2 s,记录电流变化;

    (3)根据所得电流与CA125浓度之间的线性关系,绘制工作曲线,测得线性范围为0.1pg
    ~ 20 ng/mL,检测限最低0.03 pg/mL。

    实施例11肿瘤标志物CA153的检测

    按照实施例10的方法对CA153进行检测,其线性范围为0.5pg ~ 30 ng/mL,检测限为
    0.17 pg/mL。

    实施例12肿瘤标志物SCCA的检测

    按照实施例10的方法对SCCA进行检测,其线性范围0.1pg ~ 30 ng/mL,检测限最低
    0.03 pg/mL。

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    本文标题:一种基于银负载硫化铜纳米线的夹心型免疫传感器的制备方法及应用.pdf
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