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    重庆时时彩骗局有破案: 一种Β2微球蛋白测定试剂盒及其制备方法.pdf

    关 键 词:
    一种 球蛋白 测定 试剂盒 及其 制备 方法
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    摘要
    申请专利号:

    CN201611012892.2

    申请日:

    2016.11.17

    公开号:

    CN106771228A

    公开日:

    2017.05.31

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情: 实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/68申请日:20161117|||公开
    IPC分类号: G01N33/68; G01N33/531 主分类号: G01N33/68
    申请人: 安徽同致生物工程股份有限公司
    发明人: 王海
    地址: 230041 安徽省合肥市包河区包河工业园上海路7号
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201611012892.2

    授权公告号:

    |||

    法律状态公告日:

    2017.06.23|||2017.05.31

    法律状态类型:

    实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种β2??微球蛋白测定试剂盒及其制备方法,其试剂盒包括试剂A、试剂B和校准品,其中:试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液25??30份,叠氮钠20??25份,稳定剂15??20份,表面活化剂11??16份;试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2??微球蛋白抗体的胶乳颗粒23??27份,叠氮钠21??24,缓冲液25??30份;校准品包括以下重量份的原料:β2??微球蛋白15??18份,缓冲液21??24份,稳定剂16??21份,所述缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷17??22份,去离子水30??35份,盐酸11??20份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入盐酸,调节PH值为7??9。本发明具备优异的分析灵敏度、精密度和准确度,且测定范围较大,制备简单,使用方便,成本低。

    权利要求书

    1.一种β2-微球蛋白测定试剂盒,其特征在于,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:
    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 25-30份,叠氮钠 20-25份,稳定剂 15-20份,表
    面活化剂 11-16份;
    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 23-27份,叠
    氮钠 21-24,缓冲液 25-30份;
    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 15-18份,缓冲液 21-24份,稳定剂 16-
    21份。
    2.根据权利要求1所述的一种β2-微球蛋白测定试剂盒,其特征在于,所述缓冲液包括
    以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 17-22份,去离子水 30-35份,盐酸 11-20份;其制
    备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入盐酸,调节
    PH值为7-9,制得缓冲液。
    3.根据权利要求2所述的一种β2-微球蛋白测定试剂盒,其特征在于,所述缓冲液包括
    以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 18-21份,去离子水 31-34份,盐酸 12-19份;其制
    备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入盐酸,调节
    PH值为8-9,制得缓冲液。
    4.根据权利要求1所述的一种β2-微球蛋白测定试剂盒,其特征在于,所述稳定剂包括
    胺基嚓吮二酮和氯化钠中的一种或两种的组合,且表面活化剂包括磺酸、脂肪醇聚氧乙烯
    醚硫酸钠和壬基酚聚氧乙烯中的一种或多种的组合。
    5.一种β2-微球蛋白测定试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;
    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.1-2.8h,然后进行
    离心,去除上清液,制得试剂B;
    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附1.8-2.4h,然后进行离心,去
    除上清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;
    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;
    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。
    6.根据权利要求5所述的一种β2-微球蛋白测定试剂盒的制备方法,其特征在于,所述
    S2中,将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.2-2.7h,然后进行离
    心,去除上清液,制得试剂B。
    7.根据权利要求5所述的一种β2-微球蛋白测定试剂盒的制备方法,其特征在于,所述
    S3中,用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附1.9-2.3h,然后进行离心,去除
    上清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品。

    说明书

    一种β2-微球蛋白测定试剂盒及其制备方法

    技术领域

    本发明涉及医学及生物化学技术领域,尤其涉及一种β2-微球蛋白测定试剂盒及
    其制备方法。

    背景技术

    β2微球蛋白是由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白,分子
    质量为11800,由99个氨基酸组成的单链多肽;它是细胞表面人白细胞抗原(HLA)的β链(轻
    链)部分,分子内含一对二硫键,不含糖;与免疫球蛋白稳定区的结构相似;广泛存在于血
    浆、尿液、脑脊液、唾液以及初乳中;正常人β2—微球蛋白的合成率及从细胞膜上的释放量
    相当恒定,β2—微球蛋白可以从肾小球自由滤过,99.9%在近端肾小管吸收,并在肾小管上
    皮细胞中分解破坏;故而正常情况下β2—微球蛋白的排出是很微量的。

    申请号为201010139410.6的专利文件公开了一种纳米微球免疫比浊法检测β2-微
    球蛋白试剂盒,用于提供一种无需稀释、操作简单、准确度高、重复性好,适用于各种类型的
    全自动生化分析仪的纳米微球免疫比浊法检测β2-微球蛋白试剂盒,但是,其分析灵敏度较
    低,测定范围较小,精密度和准确度较低,不方便使用,使用范围有限,因此,我们提出了一
    种β2-微球蛋白测定试剂盒及其制备方法。

    发明内容

    基于背景技术存在的技术问题,本发明提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒及其
    制备方法。

    本发明提出的一种β2-微球蛋白测定试剂盒,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:

    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 25-30份,叠氮钠 20-25份,稳定剂 15-20份,表
    面活化剂 11-16份;

    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 23-27份,叠
    氮钠 21-24,缓冲液 25-30份;

    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 15-18份,缓冲液 21-24份,稳定剂 16-
    21份。

    优选地,所述缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 17-22份,去离子
    水 30-35份,盐酸 11-20份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混
    合,搅拌均匀后,加入盐酸,调节PH值为7-9,制得缓冲液。

    优选地,所述缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 18-21份,去离子
    水 31-34份,盐酸 12-19份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混
    合,搅拌均匀后,加入盐酸,调节PH值为8-9,制得缓冲液。

    优选地,所述稳定剂包括胺基嚓吮二酮和氯化钠中的一种或两种的组合,且表面
    活化剂包括磺酸、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠和壬基酚聚氧乙烯中的一种或多种的组合。

    本发明还提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒的制备方法,包括以下步骤:

    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;

    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.1-2.8h,然后进行
    离心,去除上清液,制得试剂B;

    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附1.8-2.4h,然后进行离心,去
    除上清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;

    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;

    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。

    优选地,所述S2中,将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附
    2.2-2.7h,然后进行离心,去除上清液,制得试剂B。

    优选地,所述S3中,用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附1.9-
    2.3h,然后进行离心,去除上清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品。

    本发明中,所述一种β2-微球蛋白测定试剂盒及其制备方法通过以缓冲液和叠氮
    钠为主料制得的试剂A、以胶乳颗粒和缓冲液为主料制得的试剂B、以缓冲液和β2-微球蛋白
    为主料制得的校准品使得试剂盒具备良好的分析灵敏度、精密度和准确度,通过加入稳定
    剂和表面活化剂能够有助于保持试剂的分散稳定性,扩大测定范围,通过加入叠氮钠能够
    提高分析灵敏度、精密度和准确度,本发明具备优异的分析灵敏度、精密度和准确度,且测
    定范围较大,制备简单,使用方便,成本低。

    具体实施方式

    下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。

    实施例一

    本实施例提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:

    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 25份,叠氮钠 20份,稳定剂 15份,表面活化剂
    11份;

    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 23份,叠氮钠
    21,缓冲液 25份;

    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 15份,缓冲液 21份,稳定剂 16份。

    其制备方法包括以下步骤:

    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;

    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.1h,然后进行离心,
    去除上清液,制得试剂B;

    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附1.8h,然后进行离心,去除上
    清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;

    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;

    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。

    缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 17份,去离子水 30份,盐酸
    11份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入
    盐酸,调节PH值为7,制得缓冲液。

    实施例二

    本实施例提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:

    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 27份,叠氮钠 22份,稳定剂 17份,表面活化剂
    13份;

    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 24份,叠氮钠
    22,缓冲液 27份;

    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 16份,缓冲液 22份,稳定剂 17份。

    其制备方法包括以下步骤:

    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;

    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.3h,然后进行离心,
    去除上清液,制得试剂B;

    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附2.0h,然后进行离心,去除上
    清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;

    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;

    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。

    缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 18份,去离子水 31份,盐酸
    12份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入
    盐酸,调节PH值为8,制得缓冲液。

    实施例三

    本实施例提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:

    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 29份,叠氮钠 24份,稳定剂 19份,表面活化剂
    15份;

    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 26份,叠氮钠
    23,缓冲液 29份;

    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 17份,缓冲液 23份,稳定剂 20份。

    其制备方法包括以下步骤:

    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;

    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.7h,然后进行离心,
    去除上清液,制得试剂B;

    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附2.2h,然后进行离心,去除上
    清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;

    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;

    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。

    缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 21份,去离子水 34份,盐酸
    19份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入
    盐酸,调节PH值为8,制得缓冲液。

    实施例四

    本实施例提出了一种β2-微球蛋白测定试剂盒,包括试剂A、试剂B和校准品,其中:

    试剂A包括以下重量份的原料:缓冲液 30份,叠氮钠 25份,稳定剂 20份,表面活化剂
    16份;

    试剂B包括以下重量份的原料:结合有抗人β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒 27份,叠氮钠
    24,缓冲液 30份;

    校准品包括以下重量份的原料:β2-微球蛋白 18份,缓冲液 24份,稳定剂 21份。

    其制备方法包括以下步骤:

    S1:将缓冲液、叠氮钠、稳定剂和表面活化剂混合,搅拌均匀后,制得试剂A;

    S2:将胶乳颗粒、叠氮钠和缓冲液混合,搅拌均匀后室温振荡吸附2.8h,然后进行离心,
    去除上清液,制得试剂B;

    S3:用缓冲液稀释β2-微球蛋白,混合均匀后室温振荡吸附2.4h,然后进行离心,去除上
    清液,接着加入稳定剂,搅拌均匀后,制得校准品;

    S4:分装试剂A、试剂B和校准品;

    S5:组装为成品,制得β2-微球蛋白测定试剂盒。

    缓冲液包括以下重量份的原料:三羟甲基氨基甲烷 22份,去离子水 35份,盐酸
    20份;其制备方法包括以下步骤:将三羟甲基氨基甲烷和去离子水混合,搅拌均匀后,加入
    盐酸,调节PH值为9,制得缓冲液。

    对实施例一至实施例四制得的试剂盒和常规试剂盒进行测试,测试结果如下:


    实施例一
    实施例二
    实施例三
    实施例四
    常规试剂盒
    分析灵
    敏度
    ≥0.035L/mg
    ≥0.05L/mg
    ≥0.032L/mg
    ≥0.043L/mg
    ≥0.02L/mg
    精密度
    批内CV≤5%、批间相
    对极差≤7%
    批内CV≤4.5%、批间相
    对极差≤5.6%
    批内CV≤5.5%、批间相
    对极差≤7.2%
    批内CV≤3.6%、批间相
    对极差≤6.1%
    批内CV≤6.0%、批间相
    对极差≤8.0%
    准确度
    相对偏差≤7.9%
    相对偏差≤8.8%
    相对偏差≤7.2%
    相对偏差≤8%
    相对偏差≤10%
    测定范

    0.15~23.2mg/L
    0.18~24.5mg/L
    0.12~22.5mg/L
    0.09~25.6mg/L
    0.30~21.5mg/L

    由上表可知,本发明制得的试剂盒的分析灵敏度、精密度、准确度和测定范围比较常规
    试剂盒的分析灵敏度、精密度、准确度和测定范围均具有明显提高。

    以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的?;し段Р⒉痪窒抻诖?,
    任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其
    发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的?;し段е?。

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