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    重庆时时彩是骗局吗: 一种糖化白蛋白校准品的制备方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201510112265.5

    申请日:

    2015.03.13

    公开号:

    CN104764638A

    公开日:

    2015.07.08

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 专利权的转移 IPC(主分类):G01N 1/28登记生效日:20190131变更事项:专利权人变更前权利人:温州医科大学变更后权利人:浙江夸烨生物科技有限公司变更事项:地址变更前权利人:325000 浙江省温州市茶山高教园区温州医科大学环境与公共卫生学院变更后权利人:312000 浙江省绍兴市杭州湾上虞经济技术开发区|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 1/28申请日:20150313|||公开
    IPC分类号: G01N1/28 主分类号: G01N1/28
    申请人: 温州医科大学
    发明人: 连国军
    地址: 325000浙江省温州市茶山高教园区温州医科大学环境与公共卫生学院
    优先权:
    专利代理机构: 北京精金石专利代理事务所(普通合伙)11470 代理人: 刘晔
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201510112265.5

    授权公告号:

    |||||||||

    法律状态公告日:

    2019.02.26|||2016.09.07|||2015.08.05|||2015.07.08

    法律状态类型:

    专利申请权、专利权的转移|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种糖化白蛋白校准品的制备方法。包括:配制pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液,其中含有一定量的糖基化加速剂、氯化钠、EDTA、叠氮钠、葡萄糖,加入重组人血清白蛋白,糖基化反应一段时间;将所制备的溶液转移至切向流过滤系统,脱除糖化多肽、糖化氨基酸、葡萄糖;稀释至所需校准品浓度,加入赋形剂,分装后冷冻干燥。按该法制备出的糖化白蛋白校准品,不含糖化多肽、糖化氨基酸、葡萄糖,适合糖化白蛋白校准品的批量生产。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于,在含糖基化加速剂的缓冲液中用葡萄糖将白蛋白快速糖基化,采用切向流过滤方法快速去除糖化多肽等物质,从而获得糖化白蛋白校准品。

    2.  根据权利要求1所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于,包括以下制备步骤:
    (1)、配制含有糖基化加速剂、氯化钠、EDTA、叠氮钠、葡萄糖的pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液,加入重组人血清白蛋白,在25-37℃反应12-36小时;
    (2)、将步骤(1)所制备的溶液转移至切向流过滤系统,选择合适的中空纤维膜组件、泵速;进行浓缩操作,在30分钟内将溶液浓缩到设定的浓缩倍数;进行洗脱操作,在120分钟内用含有氯化钠、EDTA、叠氮钠的pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液洗脱至设定的洗脱倍数;
    (3)、用HPLC法准确测定步骤(2)所制备溶液的糖化白蛋白浓度,用白蛋白稀释液稀释至所需校准品浓度,再次用HPLC法测定糖化白蛋白含量;
    (4)向步骤(3)稀释好的校准品溶液中加入赋形剂,经1ml/瓶分装、低温预冻、冷冻干燥,制成冻干粉再用去离子水1ml/瓶复溶、HPLC法定值后即可使用。

    3.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液含有的糖化加速剂为1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇其中的一种。

    4.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液浓度为20-200mmol/L,糖化加速剂的浓度为50-150ml/L、氯化钠的浓度为9g/L、EDTA浓度为0.5-5mmol/L、叠氮钠的浓度为0.2-2g/L、葡萄糖的浓度为20-50g/L、重组人血清白蛋白的浓度为20-50g/L。

    5.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述的中空纤维膜组件由中空纤维膜过滤器和超滤膜组成,超滤膜设置在中空纤维膜过滤器内部,超滤膜为改性聚醚砜膜,截留分子量为60KD;所述的泵速为50-80ml/min;所述的浓缩倍数为3-5倍。

    6.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述的的pH7.0-8.0磷酸盐缓冲液浓度为20-200mmol/L,氯化钠的浓度为9g/L、EDTA浓度为0.5-5mmol/L、叠氮钠的浓度为0.2-2g/L;所述的洗脱倍数为10-20倍。

    7.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述的白蛋白稀释液为含有氯化钠、EDTA、叠氮钠的pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液,氯化钠的浓度为9g/L、EDTA浓度为0.5-5mmol/L、叠氮钠的浓度 为0.2-2g/L、pH 7.0-8.0磷酸盐缓冲液的浓度为20-200mmol/L。

    8.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的赋形剂为甘露醇、天门冬氨酸钠的组合,甘露醇的浓度为50-150g/L、天门冬氨酸钠的浓度为10-30g/L。

    9.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的低温预冻时温度为-50至-80度,预冻时间为6-24小时。

    10.  根据权利要求2所述的一种糖化白蛋白校准品的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的冷冻干燥时冷肼温度为-50至-80度,真空度为≤30Pa,干燥时间为24-72小时。

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    一种 糖化 白蛋白 校准 制备 方法
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