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    重庆时时彩将输改赢: 一种鉴别农产品产地的方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201410008909.1

    申请日:

    2014.01.08

    公开号:

    CN104764864A

    公开日:

    2015.07.08

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/15申请日:20140108|||公开
    IPC分类号: G01N33/15; G01N30/02; G01N27/62 主分类号: G01N33/15
    申请人: 中国科学院沈阳应用生态研究所
    发明人: 李国琛; 王颜红; 王世成
    地址: 110164辽宁省沈阳市沈北新区蒲河新城裕农路72号
    优先权:
    专利代理机构: 沈阳科苑专利商标代理有限公司21002 代理人: 周秀梅; 李颖
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201410008909.1

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2016.08.17|||2015.08.05|||2015.07.08

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及判别方法,具体的说是一种鉴别农产品产地的方法,主要适用于五味子的产地鉴别。通过定性和/或定量的测定粉碎后的五味子样品中自变量因子,利用自变量因子模型回归后,根据因变量的高低判定样品的归属产地;所述自变量因子(Xj)为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量、Sr含量。以五味子为示范开展产地溯源技术研究,筛选出有效指示五味子产地来源的“地理标签”,不仅有助于保障消费者药食安全,实现道地药材的原产地?;?,而且为五味子优化种植提供理论依据。该技术还可推广应用于我国农产品的质量安全和控制,具有广阔的应用前景。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种鉴别农产品五味子产地的方法,其特征在于:通过定性和/或定量的测定粉碎后的五味子样品中自变量因子,利用自变量因子模型回归后,根据因变量的高低判定样品的归属产地;
    所述自变量因子(Xj)为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量、Sr含量。

    2.  按权利要求1所述的鉴别五味子产地的方法,其特征在于:采集五味子果实干样粉碎后定性和/或定量的测定其δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量和Sr含量,而后分别带入模型通用公式中,通过模型公式所得的最大的Yi值确定五味子样品的来源省份。

    3.  按权利要求2所述的鉴别五味子产地的方法,其特征在于:所述模型通用公式如下:
    Yi=Σj=17(Cij×Xj)+Ci0]]>    公式(1)
    其中i=1-7,Y1,Y2,Y3……Y7分别为Y1(辽宁)、Y2(吉林)、Y3(黑龙江)、Y4(陕西)、Y5(湖北)、Y6(湖南)、Y7(广西);j=1-7,X1,X2,X3……X7分别为某一样品的δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr的测定值;Cij是指第i个类别的第j项自变量因子的系数;Ci0是指第i个类别的常数项。

    4.  按权利要求1或2所述的鉴别五味子产地的方法,其特征在于:
    (1)五味子样品的采集:采集待测五味子样品的果实干样,清洗后,烘干至恒重并将其粉碎,待用;
    (2)五味子样品的处理:定性和/或定量的测定上述样品的自变量因子;自变量因子为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量、Sr含量;
    (3)结果的处理:将δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr共7个参数的测定值,作为自变量X1,X2……X7);分别带入模型通用公式中,计算得出待测样品的Yi值;
    (4)结果的评价:根据模型通用公式计算的Yi值,选取最大的Yi值,最大值对应的省份就判定为该样品来源省份,进而确定五味子样品产地。

    5.  按权利要求4所述的鉴别五味子产地的方法,其特征在于:所述模型通用公式中Ci0是指第i个类别的常数项,Ci1-Ci7是指第i个类别的第j(j=1,2,3……7)项自变量因子的系数,取值具体为:


    6.  按权利要求4所述的鉴别五味子产地的方法,其特征在于:所述步骤1)五味子样品的采集:采集五味子果实干样,清洗、晾干后,70℃下烘干至恒重,粉碎后过100目筛,待用。

    说明书

    说明书一种鉴别农产品产地的方法
    技术领域
    本发明涉及判别方法,具体的说是一种鉴别农产品产地的方法,主要适用于五味子的产地鉴别。
    背景技术
    作为一种多功能、多用途的药食兼用型植物,五味子广泛分布于我国20多个省区。引种栽培是五味子资源扩大和再生的主要方法,由于受到气候、土壤、水质、大气等环境因素的影响,加之种植模式的不同,不同地区五味子品质差异显著。中医药界的传统观点认为北五味优于南五味子。2010版药典也将南、北五味子分开,作为不同的药材使用。目前我国五味子中药材和相应的中成药质量控制不完善,市售的五味子药材来源复杂,存在以假乱真、以此充好的现象,因此急需建立一套稳定、可靠的质量控制手段,以实现药材质量控制,确保药材的道地性和药效。
    以同位素指纹分析为代表的产地溯源技术,通过考察反映生长环境和种植模式等生境因子差异的同位素比值、化学成分组成和元素含量等指标,为食品溯源提供一种科学的、独立的、不可改变的,以及随整个食品链流动的身份鉴定信息。
    发明内容
    本发明的目的在于提供一种鉴别五味子产地的方法。
    为实现上述目的,本发明采用的技术方案为:
    一种鉴别农产品五味子产地的方法,通过定性和/或定量的测定粉碎后的五味子样品中自变量因子,利用自变量因子模型回归后,根据因变量的高低判定样品的归属产地;
    所述自变量因子(Xj)为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量、Sr含量。
    采集五味子果实干样粉碎后定性和/或定量的测定其δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量和Sr含量,而后分别带入模型通用公式中,通过模型公式所得的最大的Yi值确定五味子样品的来源省份。
    所述模型通用公式如下:
    Yi=Σj=17(Cij×Xj)+Ci0]]>    公式(1)
    其中i=1-7,Y1,Y2,Y3……Y7分别为Y1(辽宁)、Y2(吉林)、Y3(黑龙江)、Y4(陕西)、Y5(湖北)、Y6(湖南)、Y7(广西);j=1-7,X1,X2,X3……X7分别为某一样品的δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr的测定值;Cij是指第i个类别的第j项自变量因子的系数;Ci0是指第i个类别的常数项。
    具体:
    (1)五味子样品的采集:采集待测五味子样品的果实干样,清洗后,烘干至恒重并将其粉碎,待用;
    (2)五味子样品的处理:定性和/或定量的测定上述样品的自变量因子;自变量因子为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、B含量、Sr含量;
    (3)结果的处理:将δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr共7个参数的测定值,作为自变量X1,X2……X7);分别带入模型通用公式中,计算得出待测样品的Yi值;
    (4)结果的评价:根据模型通用公式计算的Yi值,选取最大的Yi值,最大值对应的省份就判定为该样品来源省份,进而确定五味子样品产地。
    所述模型通用公式中,Ci0是指第i个类别的常数项,Ci1-Ci7是指第i个类别的第j(j=1,2,3……7)项自变量因子的系数,取值具体为:

    所述步骤1)五味子样品的采集:采集五味子果实干样,清洗、晾干后,70℃下烘干至恒重,粉碎后过100目筛,待用。
    根据同位素分析、木脂素分析和元素分析的不同需求,采用不同的提取和处理方法,进行测定各个自变量因子。
    所述自变量因子为δ15N、五味子醇甲的含量、五味子酯甲的含量、五味子甲素的含量、五味子乙素的含量、五味子中的B含量、五味子中的Sr含量。
    具体测定是:
    ①同位素分析:借助EA-IRMS联用技术测定15N/14N稳定同位素比值。
    ②木脂素分析:采用HPLC测定。色谱柱,Symmetry C18柱(4.6mm×150mm,5μm,美国Waters公司);流动相,甲醇:乙腈:水三相梯度洗脱。
    ③微量元素分析:采用ICP-MS测定。
    本发明所具有的优点:
    以五味子为示范开展产地溯源技术研究,筛选出有效指示五味子产地来源的“地理标签”,不仅有助于保障消费者药食安全,实现道地药材的原产地?;?,而且为五味子优化种植提供理论依据。该技术还可推广应用于我国农产品的质量安全和控制,具有广阔的应用前景。同时本发明具有指标简单、判别准确率高、重复性好等优点。
    具体分析步骤如下:
    鉴别不同产地五味子的方法,通过检测五味子中同位素、活性成分和无机元素的含量,应用建立的统计模型,鉴别五味子来源,达到中药材质量 控制的目的。
    五味子样品的采集:采集五味子果实干样,重量不少于2Kg。样品洗净、晾干后,70℃下烘干至恒重。粉碎后过100目筛,置于密封袋内备用。
    五味子样品的处理:
    (1)用于同位素分析:采用百万分之一天平称取样品粉末约0.2mg,用锡杯紧密包裹,待测;
    (2)用于木脂素分析:称取1-3g粉末,至于50mL烧杯中,加入一定量甲醇。常温下超声1小时后,加入甲醇补足重量,用滤纸过滤。滤液过0.45μm膜后,取10μL上机。
    (3)用于元素分析:称取0.1-0.5g粉末,加入4mL4mol/L的HNO3和2mL30%(V/V)H2O2,微波消解1小时后,转移至小烧杯中置于电热板上加热赶酸,定容至20mL。
    样品的分析:
    (1)同位素分析:借助EA-IRMS联用技术测定15N/14N。EA系统氧化住填料Cr2O3/Co3O4,温度为960℃,还原柱填料为高纯Cu/CuO,温度为640℃。载气He流量为90~100mL/min,氧喷条件为175mL/min。Conflo Ⅲ He载气压力80kPa。IRMS真空度为7×10-7kPa,加速电压310kV。离子流产生的电压强度采用ISODAT2.0版本(Finnigan MAT,Bremen,Germany)处理。以大气氮作为标准物质。离子强度的线性范围2-6v,仅该范围内的结果作为最终数值。最终测定结果根据公式(1)以δ13C和δ15N值表示:
        公式(2)
    (2)木脂素分析:精确称取五味子粉末样品1.000±0.002g,准确加入甲醇30mL,称重,超声提取1h,取出,放冷,以甲醇补足减失的溶剂,滤过,取滤液20mL置于25mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。在4.3.2色谱条件下,取10μL供试溶液用HPLC测定。色谱柱,Symmetry C18柱(4.6mm×150mm,5μm,美国Waters公司);流动相,甲醇:乙腈:水三相梯度洗脱,洗脱程序见表4-1;流速,1mL/min;柱温,30℃;检测波长,254nm;进样量,1.0μL。同时配置不同浓度的标准品溶液,绘制标准曲线,计算样品五味子醇甲、五味子醇乙等木脂素的含量。
    (3)微量元素分析:准确称取五味子粉末样品0.250±0.002g于消解管中,加入4mL14mol/L HNO3和2mL H2O2(30%,v/v),置于微波消解仪中消解30min后,转移至小烧杯中,置于电热板上赶酸,挥干至溶液量约0.2mL后取下放置至室温,用去离子水转移到25ml比色管中定容。采用 ICP-MS测定B、Sr含量。仪器工作参数:射频功率1230W;载气流速1.21L/min;Babington雾化器,雾化室温度2℃;蠕动泵转速0.1r/s。用内标法进行校正。仪器调谐完毕后,将内标进样管插入1μg/mL内标溶液中(分析过程中始终进内标溶液),样品管依次插入各浓度的标准溶液(浓度依次递增)和待测样中进行测定。根据标准曲线的一次回归方程Y=ax+b,工作站自动计算出样品中多种元素的浓度。B和Sr标准溶液的回归方程的相关系数r分别为0.9998和1.000.
    结果的处理:
    分别提取δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr共7个参数的测定值,作为自变量(X)。采用SPSS软件,开展逐步判别分析(stepwise linear discriminant analysis),建立判别模型,通用公式如下:
    Yi=Σj=17(Cij×Xj)+Ci0]]>
    其中i=1,2,3……7,Y1,Y2,Y3……Y7分别为类别1(辽宁)、类别2(吉林)、类别3(黑龙江)、类别4(陕西)、类别5(湖北)、类别6(湖南)、类别7(广西)。j=1,2,3……7,X1,X2,X3……X7分别为某一样品的δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr的测定值。Cij是指第i个类别的第j项自变量因子的系数,详详见表1。Ci0是指第i个类别的常数项,详见表1。
    其中,Ci0和Cij值是通过测定不同省份的大批量五味子样本中的7个自变量因子的指标值,再借助SPSS软件的逐步判别分析而拟合获得。
    以辽宁省五味子为例,其判别公式为:
    Y1=0.820×δ15N+15.744×醇甲+0.823×酯甲-1.1847×甲素+13.800×乙素+2.340×B-0.032×Sr-82.677
    表1模型的自变量回归系数

    结果的评价:
    利用上述7个判别方程可以用于未知样品的判定,方法是,将某个样品的变量值依次代入公式(2),分别求得7个Yi(i=1,2,3……7),比较判别分值Yi的大小,7个Yi值中最大值代表的省份即为该样品的产地。
    实施例
    以辽宁(10批次样品)、黑龙江(5批次)、湖北(6批次)、湖南(3批次)、广西(6批次)共30批次的五味子样品开展了分析研究,样品采集后清洗、晾干,烘干至恒重后磨碎过筛备用。
    (1)采用EA-IRMS、HPLC和ICP-MS分别测定五味子样品中的δ15N、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、B、Sr含量,结果见表2。(2)将92批次样品作为盲样,其测定值代入建立的模型公式中,获得了相应的判别结果。判别结果与实际来源的比较见表3。由表3可知,对5个省份五味子的判别准确率均为100%,显示了良好的判别效果。
    表2五味子样品中各指标测定值

    表3判别分类结果

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