• 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
    • / 8
    • 下载费用:30 金币  

    重庆时时彩什么样彩票: 一种三七含量检测及优化提取纯化方法.pdf

    关 键 词:
    一种 三七 含量 检测 优化 提取 纯化 方法
      专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    摘要
    申请专利号:

    CN201510113069.X

    申请日:

    2015.03.16

    公开号:

    CN104697950A

    公开日:

    2015.06.10

    当前法律状态:

    驳回

    有效性:

    无权

    法律详情: 发明专利申请公布后的驳回IPC(主分类):G01N 21/33申请公布日:20150610|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/33申请日:20150316|||公开
    IPC分类号: G01N21/33; G01N1/34 主分类号: G01N21/33
    申请人: 刘旭
    发明人: 刘旭
    地址: 山东省青岛闽江路22号中国人民解放军401医院制药厂
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201510113069.X

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2018.05.11|||2015.08.26|||2015.06.10

    法律状态类型:

    发明专利申请公布后的驳回|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种三七含量检测及优化提取纯化方法,包括仪器药品与试剂的准备、标准曲线的制备、进行稳定性试验、进行精密度试验、进行重现性试验、进行回收率试验、计算分析得出结论;利用热浸法进行提取、对大孔树脂进行预处理、用大孔树脂进行纯化、用洗脱剂洗脱、蒸馏干燥后成品。本发明提供的三七含量检测及优化提取纯化方法简单、时间短,成本低,检测结果准确,提取物质量和纯度高,不存在重金属污染和有机溶剂毒性残留,提取效果好。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于,该三七含量检测 步骤流程包括仪器药品与试剂的准备、标准曲线的制备、进行稳定性试验、进 行精密度试验、进行重现性试验、进行回收率试验、计算分析得出结论;该优 化提取纯化方法步骤流程包括利用热浸法进行提取、对大孔树脂进行预处理、 用大孔树脂进行纯化、用洗脱剂洗脱、蒸馏干燥后成品。

    2.  如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于, 所述的仪器药品与试剂的准备是指选择仪器药品与试剂,采用UV-2201分光光 度计、三七总皂苷对照品、三七药材,浓硫酸、乙醇和甲醇均为分析纯。

    3.  如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于, 所述的标准曲线的制备是指精密称取在60℃减压干燥至恒重的三七总皂苷对 照品10.2mg,加甲醇稀释至100ml,制成对照品溶液,精密量取 0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml分别置于10ml容量瓶中,挥干溶剂,加人浓硫酸1ml, 于80℃恒温水浴中加热反应1h,立即置于冰水中冷却5min,分别加甲醇稀释 至10ml刻度,摇匀,放置30min,以试剂空白作对照,按照分光光度法,在 276nm波长处测定吸光度(A),以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准 曲线,各浓度(C)相应的吸光度(A)经统计处理,求得回归方程为:
    A=0.06531+0.03304C,r=0.99960;
    所述的进行稳定性试验是指精密吸取供试品溶液1.0ml,按照标准曲线制备 项下操作,放置0,1,2,3,4,5,6h后测定,结果RSD为2.16%,表明供试品溶液 在6h内稳定。

    4.  如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于, 所述的进行精密度试验是指精密吸取三七总皂苷对照品溶液2.0ml,按标准曲 线制备项下操作,测定吸光度,重复5次,RSD为0.83%,表明精密度良好;
    所述的进行重现性试验是指平行取同一供试品5份,分别按样品测试条件 测定,结果RSD为1.78%,重现性符合要求;
    所述的进行回收率试验是指取已知含量的样品5份,精密称定,分别加入 一定量的三七总皂苷对照品,按照标准曲线制备项下操作,分别测定,结果回 收率为100.72%,RSD为2.05%。

    5.  如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于, 所述的计算分析得出结论是指精密量取供试品溶液40密置10ml具塞试管中, 于水浴中挥干溶剂,按照标准曲线制备项下方法自“加入浓硫酸1ml”起,依 法测定吸光度,并用回归方程计算分析结果,得出结论:各因素对提取效果影 响最大的是乙醇浓度,其次为热浸时间和热浸温度,乙醇用量在所考察的范围 内影响最小,确定三七最优提取条件为:乙醇浓度80%,浸出时间160min,温 度65℃,溶剂量为药材量的12倍。

    6.  如权利要求1所述的三七含量检测及优化提取纯化方法,其特征在于, 所述的利用热浸法进行提取是指将三七粉碎为20~40目的粗粉,在75%乙醇 中浸泡12h,在温度60℃下热浸提3次,每次浸提时间约1h,收集合并滤液, 减压浓缩后进行真空干燥;
    所述的对大孔树脂进行预处理是指由苯乙烯、二乙烯苯及致孔剂悬浮聚合, 去致孔剂得到新树脂,新树脂含有杂质,必须经过前处理,否则产品中残留有 害物质,会影响药品的安全性,用95%的乙醇处理后,再经5%的HCL和5% NaOH反复处理,蒸馏水洗至pH中性,有效去除有害杂质,挥去溶剂后保存 备用;
    所述的用大孔树脂进行纯化是指将稠膏粗制品水溶液加至已处理好的大孔 树脂层析柱的上端进行纯化过程,大孔树脂使用量为原料量的2倍;
    所述的用洗脱剂洗脱是指先用原料5倍量蒸馏水过柱,将产品中的多糖成 分去除,至多糖反应呈阴性,弃去水洗脱液,再用20%乙醇原料5倍量洗脱, 弃去洗脱液,最后用70%乙醇原料量10倍量洗脱,收集洗脱液;
    所述的蒸馏干燥后成品是指将收集的洗脱液经旋转蒸发仪减压蒸馏,并回 收乙醇,至样品呈稠膏状,将稠膏样产品真空干燥约5h,温度不超过60℃,真 空度大于0.1MPa,得到提取物成品。

    说明书

    说明书一种三七含量检测及优化提取纯化方法
    技术领域
    本发明属于三七提取的技术领域,尤其涉及一种三七含量检测及优化提取 纯化方法。
    背景技术
    三七[Panax Notoginseng(Burk.)F.H.Chen]为五加科人参属植物,是我国名 贵的传统中药材,药用主要取其根,具活血化癖和消肿止痛的功效,目前大多 用于冠心病、心绞痛等心血管系统疾病的防治。现代药理研究证明三七总皂苷 具有多方面的生物活性,主要表现在扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心 肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面.三七内含多种化学成分,其中三七总 皂苷(PNS)是其主要有效成分,含量约占三七块根的10-12%。目前从三七的不 同生长部位中分离并鉴定到20种单体皂苷成分,主要成分是三醇皂苷Rg1和二 醇皂苷Rb1等。中药制剂中,常用三七提取物(液或浸膏)与其它中药配伍制成 各种中药制剂。目前,现有的三七含量检测及优化提取纯化方法复杂、实验时 间长、费用高、检测结果不准确,三七提取方法生产成本高、周期长,提取率 较低,无法去除糖类等水溶性杂质及大部分脂溶性杂质,易存在重金属污染和 有机溶剂毒性残留,提取物的吸潮性和色泽较差,同时纯度较低,质量不稳定。 目前,现有的三七含量检测及提取方法复杂,时间长,成本高,检测结果不准 确,提取物的质量差,存在重金属污染和有机溶剂毒性残留,纯度和提取率都 较低的问题。
    发明内容
    本发明实施例的目的在于提供一种三七含量检测及优化提取纯化方法,旨 在解决传统的三七含量检测及提取方法复杂,时间长,成本高,检测结果不准 确,提取物的质量差,存在重金属污染和有机溶剂毒性残留,纯度和提取率都 较低的问题。
    本发明实施例是这样实现的,一种三七含量检测及优化提取纯化方法,该 方法步骤流程包括仪器药品与试剂的准备、标准曲线的制备、进行稳定性试验、 进行精密度试验、进行重现性试验、进行回收率试验、计算分析得出结论;
    所述的仪器药品与试剂的准备是指选择仪器药品与试剂,采用UV-2201分 光光度计、三七总皂苷对照品、三七药材,浓硫酸、乙醇和甲醇均为分析纯;
    所述的标准曲线的制备是指精密称取在60℃减压干燥至恒重的三七总皂 苷对照品10.2mg,加甲醇稀释至100ml,制成对照品溶液,精密量取 0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml分别置于10ml容量瓶中,挥干溶剂,加人浓硫酸1ml, 于80℃恒温水浴中加热反应1h,立即置于冰水中冷却5min,分别加甲醇稀释 至10ml刻度,摇匀,放置30min,以试剂空白作对照,按照分光光度法,在 276nm波长处测定吸光度(A),以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准 曲线,各浓度(C)相应的吸光度(A)经统计处理,求得回归方程为:
    A=0.06531+0.03304C,r=0.99960;
    所述的进行稳定性试验是指精密吸取供试品溶液1.0ml,按照标准曲线制备 项下操作,放置0,1,2,3,4,5,6h后测定,结果RSD为2.16%,表明供试品溶液 在6h内稳定;
    所述的进行精密度试验是指精密吸取三七总皂苷对照品溶液2.0ml,按标 准曲线制备项下操作,测定吸光度,重复5次,RSD为0.83%,表明精密度良 好;
    所述的进行重现性试验是指平行取同一供试品5份,分别按样品测试条件 测定,结果RSD为1.78%,重现性符合要求;
    所述的进行回收率试验是指取已知含量的样品5份,精密称定,分别加入 一定量的三七总皂苷对照品,按照标准曲线制备项下操作,分别测定,结果回 收率为100.72%,RSD为2.05%;
    对提取效率影响较大的4项因素:乙醇浓度、热浸时间、热浸温度和乙醇 用量。所述的计算分析得出结论是指精密量取供试品溶液40密置10ml具塞试 管中,于水浴中挥干溶剂,按照标准曲线制备项下方法自“加入浓硫酸1ml” 起,依法测定吸光度,并用回归方程计算,对各因素采用正交试验分析,得出 结论:各因素对提取效果影响最大的是乙醇浓度,其次为热浸时间和热浸温度, 乙醇用量在所考察的范围内影响最小,确定三七最优提取条件为:乙醇浓度 80%,浸出时间160min,温度65℃,溶剂量为药材量的12倍。
    一种三七优化提取纯化方法,该方法步骤流程包括利用热浸法进行提取、 对大孔树脂进行预处理、用大孔树脂进行纯化、用洗脱剂洗脱、蒸馏干燥后成 品;
    所述的利用热浸法进行提取是指将三七粉碎为20~40目的粗粉,在75% 乙醇中浸泡12h,在温度60℃下热浸提3次,每次浸提时间约1h,收集合并滤 液,减压浓缩后进行真空干燥;
    所述的对大孔树脂进行预处理是指由苯乙烯、二乙烯苯及致孔剂悬浮聚合, 去致孔剂得到新树脂,新树脂含有杂质,必须经过前处理,否则产品中残留有 害物质,会影响药品的安全性,用95%的乙醇处理后,再经5%的HCL和5% NaOH反复处理,蒸馏水洗至pH中性,有效去除有害杂质,挥去溶剂后保存 备用;
    所述的用大孔树脂进行纯化是指将稠膏粗制品水溶液加至已处理好的大孔 树脂层析柱的上端进行纯化过程,大孔树脂使用量为原料量的2倍;
    所述的用洗脱剂洗脱是指先用原料5倍量蒸馏水过柱,将产品中的多糖成 分去除,至多糖反应呈阴性,弃去水洗脱液,再用20%乙醇原料5倍量洗脱, 弃去洗脱液,最后用70%乙醇原料量10倍量洗脱,收集洗脱液;
    所述的蒸馏干燥后成品是指将收集的洗脱液经旋转蒸发仪减压蒸馏,并回 收乙醇,至样品呈稠膏状,将稠膏样产品真空干燥约5h,温度不超过60℃,真 空度大于0.1MPa,得到提取物成品。
    本发明提供的三七优化提取纯化方法,系采用正交试验法优化,建立的含 量分析方法,检测速度快,灵敏度高,重现性好;选用热浸法对三七进行提取, 提取率达到85%以上,去除了糖类等水溶性杂质及大部分脂溶性杂质,降低了 提取物的吸潮性,色泽好,纯度较高,质量稳定;利用大孔树脂对三七提取液 进行纯化,设备简单,成本较低,可行性好,三七总皂苷含量较高,生产周期 短,且不存在重金属和有机溶剂毒性残留,适用于一般药厂生产。三七含量检 测及优化提取纯化方法,时间短,成本低,检测结果准确,提取物质量和纯度 高,不存在重金属污染和有机溶剂毒性残留,提取效果好。
    附图说明
    图1是本发明实施例提供的三七含量检测分析的步骤流程图;
    图2是本发明实施例提供的三七优化提取纯化方法的步骤流程图。
    具体实施方式
    为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例, 对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以 解释本发明,并不用于限定本发明。
    下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。
    如图1所示,本发明实施例是这样实现的,一种三七含量检测及优化提取 纯化方法,该方法步骤流程包括仪器药品与试剂的准备S101、标准曲线的制备 S102、进行稳定性试验S103、进行精密度试验S104、进行重现性试验S105、 进行回收率试验S106、计算分析得出结论S107;
    所述的仪器药品与试剂的准备S101是指选择仪器药品与试剂,采用 UV-2201分光光度计、三七总皂苷对照品、三七药材,浓硫酸和甲醇均为分析 纯;
    所述的标准曲线的制备S102是指精密称取在60℃减压干燥至恒重的三七 总皂苷对照品10.2mg,加甲醇稀释至100ml,制成对照品溶液,精密量取 0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml分别置于10ml容量瓶中,挥干溶剂,加人浓硫酸1ml, 于80℃恒温水浴中加热反应1h,立即置于冰水中冷却5min,分别加甲醇稀释 至10ml刻度,摇匀,放置30min,以试剂空白作对照,按照分光光度法,在 276nm波长处测定吸光度(A),以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准 曲线,各浓度(C)相应的吸光度(A)经统计处理,求得回归方程为:
    A=0.06531+0.03304C,r=0.99960;
    所述的进行稳定性试验S103是指精密吸取供试品溶液1.0ml,按照标准曲 线制备项下操作,放置0,1,2,3,4,5,6h后测定,结果RSD为2.16%,表明供试 品溶液在6h内稳定;
    所述的进行精密度试验S104是指精密吸取三七总皂苷对照品溶液2.0ml, 按标准曲线制备项下操作,测定吸光度,重复5次,RSD为0.83%,表明精密 度良好;
    所述的进行重现性试验S105是指平行取同一供试品5份,分别按样品测试 条件测定,结果RSD为1.78%,重现性符合要求;
    所述的进行回收率试验S106是指取已知含量的样品5份,精密称定,分别 加入一定量的三七总皂苷对照品,按照标准曲线制备项下操作,分别测定,结 果回收率为100.72%,RSD为2.05%;
    所述的计算分析得出结论S107是指精密量取供试品溶液40密置10ml具 塞试管中,于水浴中挥干溶剂,按照标准曲线制备项下方法自“加入浓硫酸1ml” 起,依法测定吸光度,并用回归方程计算分析结果,得出结论:各因素对提取 效果影响最大的是乙醇浓度,其次为热浸时间和热浸温度,乙醇用量在所考察 的范围内影响最小,确定三七最优提取条件为:乙醇浓度80%,浸出时间160 min,温度65℃,溶剂量为药材量的12倍。
    如图2所示,一种三七优化提取纯化方法,该方法步骤流程包括利用热浸 法进行提取S201、对大孔树脂进行预处理S202、用大孔树脂进行纯化S203、 用洗脱剂洗脱S204、蒸馏干燥后成品S205;
    所述的利用热浸法进行提取S201是指将三七粉碎为20~40目的粗粉,在 75%乙醇中浸泡12h,在温度60℃下热浸提3次,每次浸提时间约1h,收集合 并滤液,减压浓缩后进行真空干燥;
    所述的对大孔树脂进行预处理S202是指由苯乙烯、二乙烯苯及致孔剂悬浮 聚合,去致孔剂得到新树脂,新树脂含有杂质,必须经过前处理,否则产品中 残留有害物质,会影响药品的安全性,用95%的乙醇处理后,再经5%的HCL 和5%NaOH反复处理,蒸馏水洗至pH中性,有效去除有害杂质,挥去溶剂后 保存备用;
    所述的用大孔树脂进行纯化S203是指将稠膏粗制品水溶液加至已处理好 的大孔树脂层析柱的上端进行纯化过程,大孔树脂使用量为原料量的2倍;
    所述的用洗脱剂洗脱S204是指先用原料5倍量蒸馏水过柱,将产品中的多 糖成分去除,至多糖反应呈阴性,弃去水洗脱液,再用20%乙醇原料5倍量洗 脱,弃去洗脱液,最后用70%乙醇原料量10倍量洗脱,收集洗脱液;
    所述的蒸馏干燥后成品S205是指将收集的洗脱液经旋转蒸发仪减压蒸馏, 并回收乙醇,至样品呈稠膏状,将稠膏样产品真空干燥约5h,温度不超过60℃, 真空度大于0.1MPa,得到提取物成品。
    工作原理
    如图1、2所示,一种三七含量检测及优化提取纯化方法,检测原理主要是 人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水形成糠醛衍生物,该方法步骤流程 包括仪器药品与试剂的准备S101、标准曲线的制备S102、进行稳定性试验S103、 进行精密度试验S104、进行重现性试验S105、进行回收率试验S106、计算分 析得出结论S107;一种三七优化提取纯化方法步骤流程包括利用热浸法进行提 取S201、对大孔树脂进行预处理S202、用大孔树脂进行纯化S203、用洗脱剂 洗脱S204、蒸馏干燥后成品S205;所述的利用热浸法进行提取S201是指将三 七粉碎为20~40目的粗粉,在75%乙醇中浸泡12h,在温度60℃下热浸提3 次,每次浸提时间约1h,收集合并滤液,减压浓缩后进行真空干燥;所述的对 大孔树脂进行预处理S202是指由苯乙烯、二乙烯苯及致孔剂悬浮聚合,去致孔 剂得到新树脂,新树脂含有杂质,必须经过前处理,否则产品中残留有害物质, 会影响药品的安全性,用95%的乙醇处理后,再经5%的HCL和5%NaOH反 复处理,蒸馏水洗至pH中性,有效去除有害杂质,挥去溶剂后保存备用;所 述的用大孔树脂进行纯化S203是指将稠膏粗制品水溶液加至已处理好的大孔 树脂层析柱的上端进行纯化过程,大孔树脂使用量为原料量的2倍;所述的用 洗脱剂洗脱S204是指先用原料5倍量蒸馏水过柱,将产品中的多糖成分去除, 至多糖反应呈阴性,弃去水洗脱液,再用20%乙醇原料5倍量洗脱,弃去洗脱 液,最后用70%乙醇原料量10倍量洗脱,收集洗脱液;所述的蒸馏干燥后成 品S205是指将收集的洗脱液经旋转蒸发仪减压蒸馏,并回收乙醇,至样品呈稠 膏状,将稠膏样产品真空干燥约5h,温度不超过60℃,真空度大于0.1MPa, 得到提取物成品。
    以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发 明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明 的?;し段е?。

    关于本文
    本文标题:一种三七含量检测及优化提取纯化方法.pdf
    链接地址://www.4mum.com.cn/p-5890870.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

    [email protected] 2017-2018 www.4mum.com.cn网站版权所有
    经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
     


    收起
    展开
  • 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
  • 七星彩前四位秘密公式 pc蛋蛋如何稳赚不赔 时时二星直选 快三二不同号稳赚技巧 中网内蒙古时时开奖结果 新彊福彩时时彩走势图 北京pk拾单双稳赚技巧 北京pk拾赛车全天计划 浙江快乐时时走势图 六肖三期必开一期稳赚 谁知道在哪下载幸运飞艇计划软件 hi时时彩计划软件 大乐透基本走势图2000 pk10稳赢技巧 极速时时开奖统计表 排3组六6码最大遗漏