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    重庆时时彩账号注册: 一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法.pdf

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    一种 检测 灵效 鲁米诺 化学 发光 体系 方法
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    摘要
    申请专利号:

    CN201510102412.0

    申请日:

    2015.03.09

    公开号:

    CN104677891A

    公开日:

    2015.06.03

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/76申请日:20150309|||公开
    IPC分类号: G01N21/76 主分类号: G01N21/76
    申请人: 山西大学
    发明人: 耿红; 宋雨姮; 杨振华; 张月霞; 卢铁彦
    地址: 030006山西省太原市坞城路92号
    优先权:
    专利代理机构: 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙)11368 代理人: 郭官厚
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201510102412.0

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2018.08.21|||2015.11.11|||2015.06.03

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法,该鲁米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水,该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。该鲁米诺化学发光体系的化学发光在一定质量范围内与化学发光强度呈良好的线性关系,可用于过氧碳酸钠的检测,其检测限为3mg-5mg,线性关系良好,R2为0.9986,满足检测要求;检测鱼浮灵效价的方法快速简便、灵敏度较高、易操作,检测结果准确、明了,试剂用量少;可掌握鱼浮灵用量,缓解养殖过程中鱼类浮头泛塘等缺氧现象的发生,又可避免由于鱼浮灵的用量过多,导致对人体造成不必要的损害。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系,其特征在于,该鲁 米诺化学发光体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水, 该鲁米诺化学发光体系的总体积为2mL。

    2.  如权利要求1所述的一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系, 其特征在于,所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠配置而成的pH值 为10.1的碱性缓冲液。

    3.  如权利要求1所述的一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系, 其特征在于,所述硫酸钴溶液为0.1mol/L的硫酸钴溶液。

    4.  如权利要求1所述的一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系, 其特征在于,所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5的氢氧化钠溶液配 置成0.02mol/L的鲁米诺工作液。

    5.  一种检测鱼浮灵效价的方法,其特征在于,包括如下步骤:
    (1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比;
    发光测量仪参数为:高压1000V,标准光源14C,每秒发光强度 1500,背景值6cps,测量温度25℃;
    (2)在反应杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁 米诺工作液0.2ml,水0.2ml,制备鲁米诺化学发光体系,且总体积 为2ml,然后加入待检测的鱼浮灵4mg,迅速混匀后放入样品室中, 放下盖子,使反应溶液处于完全黑暗状态下开始计数,每0.5s计数 一次,计数时间为100s,通过发光测量仪记录发光强度。
    (3)根据100s内平均发光值,经线性回归方程式计算出样品中过 氧碳酸钠的质量。

    6.  如权利要求5所述的一种检测鱼浮灵效价的方法,其特征在 于,所述线性回归方程式为:y=91972x-170962,相关系数R2为 0.9986。

    7.  如权利要求5所述的一种检测鱼浮灵效价的方法,其特征在于, 所述发光测量仪为BPCL型微弱发光测量仪。

    说明书

    说明书一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系及方法
    技术领域
    本发明涉及检测鱼浮灵效价领域,具体为一种检测鱼浮灵效价的 鲁米诺化学发光体系及方法。
    背景技术
    鱼浮灵是由中国科学院水生生物研究所和武汉农药厂联合开发 的一种高效化学增氧剂,其主要成分是过碳酸钠,通常情况下为颗粒 状的固体。遇水后能够快速分解,使水中的溶解氧含量增加。鱼浮灵 在鱼类养殖过程中应用较为广泛,当发现鱼类浮头泛塘等缺氧现象 时,将鱼浮灵加入水中后可以使将要死亡的鱼类重新活跃起来,缓解 了因水中缺氧而引起水中鱼类死亡的现象,鱼浮灵在此起的主要作用 就是直接增加水中溶解氧含量。
    化学发光法是分子发光光谱法的一类,指物质在化学反应时,吸 收了化学能,使产物分子激发跃迁至激发态,受激分子由激发态回到 基态时,发出一定波长的光。根据其化学发光强度或总量来确定组分 含量的分析方法叫化学发光分析法。常见的化学发光反应体系有:鲁 米诺化学发光反应体系、光泽精化学发光反应体系等。本发明中使 用的是鲁米诺化学发光体系。鲁米诺体系在碱性溶液中可被氧化剂氧 化处于激发态,激发态发射蓝光回到基态时产生化学发光。鲁米诺可 与各种氧化剂如过氧化氢、氧气、次氯酸盐、碘、高锰酸钾等反应产 生化学发光。
    发明内容
    本发明的目的在于提供一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光 体系及方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
    为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
    一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系,该鲁米诺化学发光 体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水,该鲁米诺化 学发光体系的总体积为2mL。
    作为本发明进一步的方案,所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠 配置而成的pH值为10.1的碱性缓冲液。
    作为本发明进一步的方案,所述硫酸钴溶液为0.1mol/L的硫酸钴 溶液。
    作为本发明进一步的方案,所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5 的氢氧化钠溶液配置成0.02mol/L的鲁米诺工作液。
    一种检测鱼浮灵效价的方法,包括如下步骤:
    (1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比;
    发光测量仪参数为:高压1000V,标准光源14C,每秒发光强度 1500,背景值6cps,测量温度25℃;
    (2)在反应杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米 诺工作液0.2ml,水0.2ml,制备鲁米诺化学发光体系,且总体积为 2ml,然后加入待检测的鱼浮灵4mg,迅速混匀后放入样品室中,放 下盖子,使反应溶液处于完全黑暗状态下开始计数,每0.5s计数一 次,计数时间为100s,通过发光测量仪记录发光强度。
    (3)根据100s内平均发光值,经线性回归方程计算出样品中过氧 碳酸钠的质量。
    所述线性回归方程式为:y=91972x-170962,相关系数R2为 0.9986。所述发光测量仪为BPCL型微弱发光测量仪。
    与现有技术相比,本发明的优点:该鲁米诺化学发光体系的化学 发光在一定质量范围内与化学发光强度呈良好的线性关系,可用于过 氧碳酸钠的检测,其检测限为3mg-5mg,线性关系良好,R2为0.9986, 满足检测要求;检测鱼浮灵效价的方法快速简便、灵敏度较高、易操 作,检测结果准确、明了,试剂用量少;可以检测鱼浮灵投入水中后 的产生氧的能力;根据鲁米诺化学发光体系发光强度检测市售鱼浮灵 中过氧碳酸钠的含量,鉴定各品牌鱼浮灵的优劣,并为鱼贩提供较优 的鱼浮灵用量,既可缓解养殖过程中鱼类浮头泛塘等缺氧现象的发 生,又可避免由于鱼浮灵的用量过多,导致对人体造成不必要的损害。
    附图说明
    图1为分别只加入H2O2和Na2CO3的两个对照组实验图;
    图2是过氧碳酸钠固体颗粒质量递增对体系发光强度的影响示意图; 以前10s内和100s内总发光强度平均值表示;
    图3为标准工作曲线图;
    图4为对过氧碳酸钠固体颗粒为30mg的实验组进行延长测量时间, 测量时间延长至1000s得到的光谱图。
    具体实施方式
    下面结合附图及实施例对本发明作进一步阐述。
    一种检测鱼浮灵效价的鲁米诺化学发光体系,该鲁米诺化学发光 体系包括碱性缓冲液、硫酸钴溶液、鲁米诺工作液及水,该鲁米诺化 学发光体系的总体积为2mL。所述碱性缓冲液是由硼砂及氢氧化钠配 置而成的pH值为10.1的碱性缓冲液。所述硫酸钴溶液为0.1mol/L 的硫酸钴溶液。所述鲁米诺工作液为用pH值为12.5的氢氧化钠溶液 配置成0.02mol/L的鲁米诺工作液。
    一种检测鱼浮灵效价的方法,包括如下步骤:
    (1)调整发光测量仪参数保证其最佳信噪比;
    所述发光测量仪为BPCL型微弱发光测量仪。
    发光测量仪参数为:高压1000V,标准光源14C,每秒发光强度 1500,背景值6cps,测量温度25℃;
    (2)在反应杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米 诺工作液0.2ml,水0.2ml,制备鲁米诺化学发光体系,且总体积为 2ml,然后加入待检测的鱼浮灵4mg,迅速混匀后放入样品室中,放 下盖子,使反应溶液处于完全黑暗状态下开始计数,每0.5s计数一 次,计数时间为100s,通过发光测量仪记录发光强度。
    (3)根据100s内平均发光值,经回归方程式计算出样品中过氧碳 酸钠的质量。所述线性回归方程式为:y=91972x-170962,相关系 数R2为0.9986。
    下面以实验说明,用不同质量过氧碳酸钠固体颗粒对鲁米诺化学 体系发光的影响。
    在样品杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺 工作液0.2ml,水0.2ml,再加入过氧碳酸钠固体颗粒,混匀后迅速放 入样品室中进行测量,反应体系总体积为2ml,反应温度为25℃,每 0.5s计数一次,计数时间为100s。通过改变过碳酸钠质量由3mg—3mg 递增。
    表1 不同质量固体过碳酸钠实验组试剂配比
    编号 缓冲液 CoSO4 鲁米诺 H2O 过碳酸钠 总体积 a 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 3.03mg 2mL b 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 3.51mg 2ml c 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 4.06mg 2mL d 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 4.50mg 2ml e 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 5.02mg 2mL f 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 6.05mg 2mL g 1.2mL 0.4mL 0.2mL 0.2mL 8.03mg 2mL
    如图1(a)和(b)是分别只加入H2O2和Na2CO3的两个对照组实验。 由图(a)可以看出,在鲁米诺体系中只有双氧水时,鲁米诺体系发光 强度平缓上升,在100s时上升接近30万。由图(b)中由于未加双氧 水,基本没有发光,这与实际相符。
    图2是过氧碳酸钠固体颗粒质量递增对体系发光强度的影响,以 前10s内和100s内发光强度平均值表示。由图可以看出,随着过氧 碳酸钠固体颗粒质量的增加,发光强度增加,并在5mg时达到最大 值30万,在质量达到8mg后开始下降。在3mg-5mg质量范围内,100s 内化学发光平均值与过氧碳酸钠固体颗粒质量呈良好的线性关系。由 于10s测量时间短,且前10s内发光值变化幅度大,有较大波动,故 以100s内总平均发光值与过氧碳酸钠的质量绘制工作曲线如图3, 其线性回归方程式为y=91972x-170962,相关系数R2为0.9986。
    延长过氧碳酸钠固体颗粒为30mg的实验组的发光时间,观察其 长效发光规律
    在样品杯中依次加入缓冲液1.2ml、硫酸钴溶液0.4ml、鲁米诺 工作液0.2ml,水0.2ml再加入过碳酸钠固体颗粒30mg,混匀后迅速 放入样品室中进行测量,反应体系总体积为2ml,反应温度为25℃, 每0.5s计数一次,计数时间为1000s。
    如图4为对过氧碳酸钠固体颗粒为30mg的实验组进行延长测量 时间,测量时间延长至1000s得到的光谱。发现200s内发光强度总 体呈上升趋势,期间出现一个较小的波动,但随后发光强度又再上升 至30万,并保持稳定??杉?,在过氧碳酸钠质量超出检测限后,仍 可在200s左右快速检测出其稳定发光值。
    取市售鱼浮灵样品,按所提供检测方法进行检测(6次重复测 定),测得样品中过氧碳酸钠质量(平均值),测定结果的相对标准偏 差为3.2%,做加标试验,测定加标后测出量(3次重复测定),计算 回收率为95%。表明该方法满足检测要求,且精密度较好。
    本发明运用化学发光技术,建立了一种测定鱼浮灵效价的简便方 法,该方法快速简便,灵敏度较高。该鲁米诺体系的化学发光在一定 质量范围内与化学发光强度呈良好的线性关系,可用于过氧碳酸钠的 检测。该方法的检测限为3mg-5mg,线性关系良好,R2为0.9986,满 足检测要求。本方法可以根据体系发光强度检测市售鱼浮灵中过氧碳 酸钠的含量,鉴定各品牌鱼浮灵的优劣,并为鱼贩提供较优的鱼浮灵 用量,既可缓解养殖过程中鱼类浮头泛塘等缺氧现象的发生,又可避 免由于鱼浮灵的用量过多,导致对人体造成不必要的损害。
    以上实施例仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,有关 技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下, 还可以做出各种变化和变型,因此所有等同的技术方案也属于本发明 的范畴,本发明的专利?;し段вτ扇ɡ笙薅?。

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