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    重庆时时彩大小公式: N羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201510962487.6

    申请日:

    2015.12.21

    公开号:

    CN105606594A

    公开日:

    2016.05.25

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/76申请日:20151221|||公开
    IPC分类号: G01N21/76 主分类号: G01N21/76
    申请人: 中国科学院长春应用化学研究所
    发明人: 徐国宝; 萨祺礡·穆罕默德; 李素萍
    地址: 130022 吉林省长春市朝阳区人民大街5625号
    优先权:
    专利代理机构: 长春菁华专利商标代理事务所 22210 代理人: 李外
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201510962487.6

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2019.01.01|||2016.06.22|||2016.05.25

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明提供一种N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,属于化学发光分析方法技术领域。该N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂可用于检测Co2+,鲁米诺和NHS。本发明的检测方法灵敏度高、操作简单、分析速度快。本发明的NHS作为一种新的高效的鲁米诺化学发光共反应剂,能够产生比鲁米诺-H2O2化学发光体系强约22倍的化学发光信号,且该鲁米诺-NHS化学发光体系在Co2+存在下能够选择性地增强发光,因此可被应用于高效选择性地检测Co2+、鲁米诺和NHS。

    权利要求书

    1.N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用。
    2.根据权利要求1所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测NHS。
    3.根据权利要求2所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的检测NHS的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管路分别进样鲁米诺的碳酸
    氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,打开IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵,再向进样
    阀中加入NHS水溶液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度与NHS浓度呈线性关系,
    实现NHS的检测。
    4.根据权利要求2所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的NHS水溶液的浓度为10-10000μM。
    5.根据权利要求1所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测鲁米诺。
    6.根据权利要求5所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的检测鲁米诺的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管路分别进样NHS水溶液
    和碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,打开IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵,再向进样阀中加入鲁
    米诺溶液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度与鲁米诺浓度呈线性关系,实现鲁
    米诺的检测。
    7.根据权利要求5所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的鲁米诺溶液的浓度为0.01-20000nM。
    8.根据权利要求1所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测Co2+。
    9.根据权利要求8所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,所
    述的检测Co2+的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管路分别进样鲁米诺的碳酸
    氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,打开IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵,再向进样
    阀中加入NHS溶液和Co2+溶液的混合液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度与Co2
    +浓度呈线性关系,实现Co2+的检测。
    10.根据权利要求9所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,其特征在于,
    所述的混合溶液中Co2+的浓度为0.1-5000nM。

    说明书

    N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用

    技术领域

    本发明属于化学发光分析方法技术领域,具体涉及N-羟基丁二酰亚胺作为发光共
    反应剂的应用。

    背景技术

    化学发光分析是一种常用的分析检测方法,具有高灵敏度、线性范围宽、所用仪器
    设备简单、操作方便、分析速度快、背景噪声小、价廉等优点。已广泛应用于药物分析、生物
    分析检测、环境监测、食品科学和临床医学等诸多领域。

    基于鲁米诺的化学发光体系需要氧化剂和激活剂用于化学发光。一些经典的氧化
    剂如过氧化氢、高锰酸钾、铁氰化物、高碘酸盐以及氧气等,而经典的激活剂包括过氧化物
    酶、过氧化氢酶、细胞色素c、血红蛋白、臭氧分子、过渡金属离子及其配合物等。

    N-羟基丁二酰亚胺(NHS)由于其反应活性高、亲水性好、产量高、易形成肽键以及
    商业可用性等优点在有机和生物有机合成领域被广泛用作激活剂或?;ぜ?。例如,它可被
    用作温和的氧化剂用于辅助氧化反应、活化反应剂选择性还原以及作为Passerini反应的
    添加剂加速反应等。(BiosensBioelectron,2014,61,45-50;ChemRev,2004,104,3003-
    3036;ChemSocRev,2015,44,3117-3142.;AnalChem,2014,86,3484-3492.;Chem
    Commun,2015,51,1620-1623;Phys.Chem.,1928,136,321-330;JAmChemSoc,1964,86,
    1839-1842;JAmChemSoc,1963,85,3039-3039;JAmChemSoc,2006,128,4936-4937.)

    自1928年Albrecht报道鲁米诺的发光性质后,关于鲁米诺的研究受到广泛关注。
    鲁米诺-H2O2体系的化学发光反应能够被多种底物如金属离子、金属复合物以及过氧化物酶
    等催化,因此该发光体系已被广泛应用于各种分析应用中。然而,多种金属离子及其复合物
    能够与H2O2发生反应导致了鲁米诺-H2O2体系的稳定性和选择性较差。因此,发展稳定性好、
    选择性高的鲁米诺化学发光的高效共反应剂仍是解决问题的关键,它能克服这些限制,并
    拓宽鲁米诺化学发光的应用。

    发明内容

    本发明提供一种N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,该N-羟基丁二酰亚
    胺作为发光共反应剂用于Co2+,鲁米诺和NHS的分析检测。

    本发明提供一种N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用。

    优选的是,所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测NHS。

    优选的是,所述的检测NHS的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管路分
    别进样鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵,再向进样阀中加入NHS水溶液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度
    与NHS浓度呈线性关系,实现NHS的检测。

    优选的是,所述的NHS水溶液的浓度为10-10000μM。

    优选的是,所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测鲁米诺。

    优选的是,所述的检测鲁米诺的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管
    路分别进样NHS水溶液和碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,打开IFIS-C模式智能流动注射蠕动
    泵,再向进样阀中加入鲁米诺溶液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度与鲁米诺
    浓度呈线性关系,实现鲁米诺的检测。

    优选的是,所述的鲁米诺溶液的浓度为0.01-20000nM。

    优选的是,所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测Co2+。

    优选的是,所述的检测Co2+的方法为:在第一样品流通管路和第二样品流通管路分
    别进样鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵,再向进样阀中加入NHS溶液和Co2+溶液的混合液,化学发光检测仪记录发光强
    度信号,发光强度与Co2+浓度呈线性关系,实现Co2+的检测。

    优选的是,所述的混合溶液中Co2+的浓度为0.1-5000nM。

    本发明的有益效果

    本发明提供一种N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用,该N-羟基丁二酰亚
    胺作为发光共反应剂可用于检测Co2+,鲁米诺和NHS。和现有技术相对比,本发明的检测方法
    灵敏度高、操作简单、分析速度快。实验结果表明:本发明的NHS作为一种新的高效的鲁米诺
    化学发光共反应剂,能够产生比鲁米诺-H2O2化学发光体系强约22倍的化学发光信号,且该
    鲁米诺-NHS化学发光体系在Co2+存在下能够选择性地增强发光,因此可被应用于高效选择
    性地检测Co2+、鲁米诺和NHS。

    附图说明

    图1为本发明流动注射-化学发光分析装置的示意图;

    图2为本发明实施例1-3发光强度与NHS浓度的线形关系曲线图;

    图3为本发明实施例4-6发光强度与鲁米诺浓度的线形关系曲线图;

    图4为本发明实施例7-9发光强度与Co2+浓度的线形关系曲线图。

    具体实施方式

    本发明提供一种N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂的应用。

    按照本发明,所述的N-羟基丁二酰亚胺作为发光共反应剂用于检测NHS、鲁米诺和
    Co2+。优选采用流动注射-化学发光分析方法对NHS、鲁米诺和Co2+进行检测,如图1所示,图1
    为本发明流动注射-化学发光分析装置的示意图。

    按照本发明,所述的检测NHS的方法优选为:在第一样品流通管路A和第二样品流
    通管路B分别进样鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,所述的第一样品
    流通管路A和第二样品流通管路B进样速度相同,优选为1-2mL/min,打开IFIS-C模式智能流
    动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入NHS溶液,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发光强
    度与NHS浓度呈线性关系,实现NHS的检测,检测完成后,废液用废液池F回收。所述的样品基
    底二次水为二次水,所述的鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液中,鲁米诺的浓度优选为
    10-100μM,碳酸氢钠-碳酸钠的浓度优选为0.10M,pH值优选为8.5-13.5;所述的NHS溶液的
    浓度优选为10-10000μM,更优选为10-5000μM。

    按照本发明,所述的检测鲁米诺的方法优选为:在第一样品流通管路和第二样品
    流通管路分别进样NHS水溶液和碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,所述的第一样品流通管路A和
    第二样品流通管路B进样速度相同,优选为1-2mL/min,打开IFIS-C模式智能流动注射蠕动
    泵,再向进样阀中加入鲁米诺溶液,化学发光检测仪记录发光强度信号,发光强度与鲁米诺
    浓度呈线性关系,实现鲁米诺的检测。所述的NHS水溶液的浓度优选为5-20mM,碳酸氢钠-碳
    酸钠缓冲溶液的浓度优选为0.10M,pH值优选为8.5-13.5;所述的鲁米诺溶液的浓度优选为
    0.01-20000nM,更优选为0.01-10000nM。

    按照本发明,所述的检测Co2+的方法优选为:在第一样品流通管路和第二样品流通
    管路分别进样鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液和样品基底二次水,所述的第一样品流
    通管路A和第二样品流通管路B进样速度相同,优选为1-2mL/min,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵,再向进样阀中加入NHS溶液和Co2+溶液混合液,化学发光检测仪记录发光强度
    信号,发光强度与Co2+浓度呈线性关系,实现Co2+的检测。所述的鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠
    缓冲溶液中,鲁米诺的浓度优选为10-100μM,碳酸氢钠-碳酸钠的浓度优选为0.10M,pH值优
    选为8.5-13.5;所述的混合液中Co2+溶液的浓度优选为0.1-5000nM,更优选为0.1-3000nM,
    混合液中NHS的浓度为1-5mM。

    下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述。

    实施例1NHS的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入10μMNHS,化学发光检测仪E记录发
    光强度信号,发光强度与NHS浓度呈一定的线性关系,实现NHS的检测。

    实施例2NHS的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入2000μMNHS,化学发光检测仪E记录
    发光强度信号,发光强度与NHS浓度呈一定的线性关系,实现NHS的检测。

    实施例3NHS的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入5000μMNHS,化学发光检测仪E记录
    发光强度信号,发光强度与NHS浓度呈一定的线性关系,实现NHS的检测。

    图2为本发明实施例1-3发光强度与NHS浓度的线形关系曲线图,其中实验条件为c
    (luminol):10μM;c(NHS):10-5000μM;光电倍增管电压:800V,该方法对NHS的检测限为3μM。

    实施例4鲁米诺的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样5mM
    NHS水溶液和0.10M浓度pH为11.5的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入0.01nM鲁米诺,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发
    光强度与鲁米诺浓度呈一定的线性关系,实现鲁米诺的检测。

    实施例5鲁米诺的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样5mM
    NHS水溶液和0.10M浓度pH为11.5的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入1000nM鲁米诺,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发
    光强度与鲁米诺浓度呈一定的线性关系,实现鲁米诺的检测。

    实施例6鲁米诺的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样5mM
    NHS水溶液和0.10M浓度pH为11.5的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液,打开IFIS-C模式智能流动
    注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入10000nM鲁米诺,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发
    光强度与鲁米诺浓度呈一定的线性关系,实现鲁米诺的检测。

    图3为本发明实施例4-6发光强度与鲁米诺浓度的线形关系曲线图,其中实验条件
    为c(NHS):5mM;c(luminol):0.01-10000nM;光电倍增管电压:900V,该方法对鲁米诺的检测
    限为7pM。

    实施例7Co2+的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入已混合1mMNHS溶液和0.1nMCo2+溶
    液的混合液,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发光强度与Co2+浓度呈一定的线性关系,
    实现Co2+的检测。

    实施例8Co2+的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入已混合1mMNHS溶液和300nMCo2+溶
    液的混合液,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发光强度与Co2+浓度呈一定的线性关系,
    实现Co2+的检测。

    实施例9Co2+的检测

    在第一样品流通管路A和第二样品流通管路B分别以1.25mL/min的流速进样10μM
    鲁米诺的碳酸氢钠-碳酸钠缓冲溶液(浓度为0.10M,pH为11.5)和样品基底二次水,打开
    IFIS-C模式智能流动注射蠕动泵C,再向进样阀D中加入已混合1mMNHS溶液和3000nMCo2+
    溶液的混合液,化学发光检测仪E记录发光强度信号,发光强度与Co2+浓度呈一定的线性关
    系,实现Co2+的检测。

    图4为本发明实施例7-9发光强度与Co2+浓度的线形关系曲线图,I代表加入Co2+后
    的CL强度,I0代表对照样品的CL强度,(I-I0)/I0代表加入Co2+后CL的增强效率。其中实验条
    件为c(NHS):1mM;c(luminol):10μM;c(Co2+):0.1-3000nM;光电倍增管电压:800V,该方法对
    Co2+的检测限为0.01nM。

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    羟基 丁二酰 亚胺 作为 发光 反应 应用
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