• 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
    • / 7
    • 下载费用:30 金币  

    重庆时时彩看走势: 一种东南亚型Α地中海贫血检测试剂盒.pdf

    关 键 词:
    一种 东南亚 地中海贫血 检测 试剂盒
      专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    摘要
    申请专利号:

    CN201110098786.1

    申请日:

    2011.04.20

    公开号:

    CN102253225A

    公开日:

    2011.11.23

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/96申请日:20110420|||公开
    IPC分类号: G01N33/96; G01N33/68 主分类号: G01N33/96
    申请人: 珠海经济特区海泰生物制药有限公司
    发明人: 陈爽; 汤汉文
    地址: 519085 广东省珠海市唐家湾镇港湾大道创新四路18号
    优先权:
    专利代理机构: 广州三辰专利事务所 44227 代理人: 范钦正
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201110098786.1

    授权公告号:

    102253225B||||||

    法律状态公告日:

    2013.07.10|||2012.01.04|||2011.11.23

    法律状态类型:

    授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明涉及一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒,用于检测东南亚型α地中海贫血,它公开了该试剂盒的样品处理液,该样品处理液内氯化铵含量W/V在0.83%,酪蛋白要求含量W/V在0.2%~0.8%,甘油含量V/V在4%~6%。本发明能方便、有效地检测出Zeta链蛋白,能辅助诊断东南亚型α地中海贫血。

    权利要求书

    1.一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒,它包括单抗Zeta链包被板,单抗Zeta链酶标记物,阳性对照,阴性对照,临界对照,显色液A,显色液B,浓缩洗涤液,终止液,其特征是有样品处理液,在所述处理液内氯化铵含量W/V在0.83%,酪蛋白要求含量W/V在0.2%~0.8%,甘油含量V/V在4%~6%。2.根据权利要求1所述的一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒,其特征是样品处理液中氯化铵含量W/V在0.83%,酪蛋白含量W/V在0.2%,甘油含量V/V在4%。3.?一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒应用于,0.5岁以上人群东南亚型α地中海贫血的辅助诊断。

    说明书

    一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒

    技术领域

    本发明涉及检测东南亚型α地中海贫血检测试剂盒及其应用。

    背景技术

    地中海贫血分为α型与β型。α型中的东南亚型基因携带者在东南亚及我国南方分布最为广泛,是造成潜在危害的主要类型。虽然这种携带者大部分无明显症状,但如男女双方同为携带者,其子女就有出现巴氏水肿胎和血红蛋白H病的可能性,给家庭和社会带来沉重负担。

    已知血红蛋白Zeta链存在于正常人的胎儿期,出生后3个月即不能检出,但东南亚型α地中海贫血基因携带者的血液中终生存在Zeta链。因此,Zeta链可作为辅助诊断东南亚型α-地中海贫血的标志蛋白。

    同类试剂盒在国外已有上市,但未公布其样品处理液配方,本试剂盒是国内首个批准注册产品。

    发明内容

    本发明的目的是提供一种东南亚型α地中海贫血检测试剂盒,利用该样品处理液的试剂盒能方便、有效地检测出Zeta链,能辅助诊断东南亚型α地中海贫血的标志蛋白。

    本发明的技术解决方案是它包括单抗Zeta链包被板,单抗Zeta链酶标记物,阳性对照,阴性对照,临界对照,显色液A,显色液B,浓缩洗涤液,终止液。本发明特别是有样品处理液,在所述样品处理液内氯化铵(NH4Cl)含量W/V在0.83%,酪蛋白(Casein)要求含量W/V在0.2%~0.8%,甘油(Glycerol)要求含量V/V在4%~6%。

    以上所述的样品处理液中氯化铵含量W/V在0.83%,酪蛋白含量W/V在0.2%,甘油含量W/V在4%。

    本发明应用于检测0.5岁以上人群东南亚型α-地中海贫血的辅助诊断。

    本发明的优点

    利用该样品处理液能更加充分地破碎红细胞,释放其中的Zeta链蛋白,并且减少包被板、样品与单抗Zeta链酶标记物之间的非特异反应,提高试剂盒检测的灵敏度和特异性。

    具体实施方案

    【试剂盒主要组成成份】

    ?1、样品处理液的制配法:分别称取8.3g?氯化铵、2.0g?酪蛋白,加入40ml甘油,再加入纯化水至1L,搅拌至充分溶解。

    2、试剂盒使用方法

    采用无菌抗凝静脉血。对严重贫血患者的样本应先将样本中血浆与红细胞比例调整至1:1后,再按要求进行稀释。

    2.1??试剂盒反应试剂准备

    2.1.1??微孔条

    将检测所需数量的微孔条固定于板架上,剩余的微孔条放入密封袋中保存。

    2.1.2??洗涤液

    在干净的量筒内稀释浓缩洗涤液。50ml浓缩洗涤液加入蒸馏水或去离子水定容至500ml,混匀。

    2.1.3??其它液体组份

    直接使用,使用前应轻轻摇动使其充分混匀。

    2.2?????????样品准备

    采用无菌抗凝静脉血。全血样本若不能立即检测,可4℃存放一周,或-20℃存放一个月,或-70℃存放3年。染菌标本请勿使用;溶血状态对实验结果无影响;对严重贫血患者的样本应先将样本中血浆与红细胞比例调整至1:1后,再按要求进行稀释。取充分混匀的待检全血样品、阳性对照、阴性对照各25μl分别加入至200μl样品处理液中,在旋涡振荡器上剧烈振荡60秒使红细胞完全裂解。

    2.3.??检测过程

    2.3.1??每次实验每板加入处理好的阳性对照、阴性对照各1孔,100μl?/孔。设临界对照3孔,临界对照直接使用,100μl?/孔。其余每孔加入裂解后样品100μl。加封板膜置37℃±1℃温育60分钟。

    2.3.2??甩净孔中液体,将洗液注满每孔(约300μl/孔)后,每次停留60秒后甩净拍干,反复3次。每孔加酶标记物100μl(2滴),加封板膜置37℃±1℃温育60分钟。

    2.3.3??甩净孔中液体,同上洗板3次,拍干后各孔加显色液A、显色液B各50μl,置37℃避光15分钟,每孔加入终止液50μl,轻微震荡微孔板以混合均匀。

    2.3.4??双波长检测:用酶标仪读取450nm和630nm处的吸光值(A值),以A450nm-A630nm计算A值。

    2.4?结果判断

    样品A值≥临界对照A值平均值??判为阳性

    样品A值<临界对照A值平均值??判为阴性。

    3、样品处理液配方的优越性

    常见的样品处理液有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种,本试剂盒样品处理液为Ⅳ,配方见表1。此四种样品处理液以不同方式分别处理4份阳性样品和4份阴性样品,按照2的方法操作,结果见表2。

    表1?不同样品处理液配方

    表2??不同配方样品处理液检测阴性、阳性样品结果比较

    *:P/N指阴阳差距,即阳性样品A值均值/阴性样品A值均值。

    由表2中数据可知,无论以何种处理方式,与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ处理液相比,Ⅳ处理样品结果其P/N值均为最大,阴阳差距最为明显。这表明使用Ⅳ处理液裂解红细胞更快速,更彻底。

    对Ⅳ处理液中不同甘油含量进行比较研究,结果见表3。

    表3??不同甘油含量样品处理液检测阴性、阳性样品结果比较

    由表3中数据可知,用含甘油浓度0~8%的处理液处理样品,同步检测,结果表明当甘油浓度含量在4%~6%时,其P/N值高于0.2%和8%的P/N值,检测结果最佳。

    对Ⅳ处理液中不同酪蛋白含量进行比较研究,结果见表4。

    表4??不同酪蛋白含量样品处理液检测阴性、阳性样品结果比较

    由表4中数据可知,用含酪蛋白0~1.0%的处理液处理样品,同步检测,结果表明当酪蛋白含量在0.2%~0.8%时,其P/N值高于其它,检测结果最佳。

    本试剂盒系用抗Zeta链单克隆抗体包被的微孔板和抗Zeta链单克隆抗体酶标记物及其它试剂配套组成,采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)原理检测人血液中Zeta链,适用于0.5岁以上人群的东南亚型α地中海贫血的辅助诊断。

    试剂盒检验原理:双抗体夹心ELISA原理:用纯化的抗Zeta链单克隆抗体包被微孔板,加入经样品处理液裂解的待检血液,样品中存在的Zeta链可与包被抗体形成抗原抗体复合物,再加入辣根过氧化物酶标记的抗Zeta链不同表位的单克隆抗体,形成抗体-抗原-二抗酶标记物免疫复合物。洗板,除去多余的结合物,加入显色液,产生有颜色产物,用酶标仪测定显色反应,根据显色反应的强度进行结果的定性判断。

    关于本文
    本文标题:一种东南亚型Α地中海贫血检测试剂盒.pdf
    链接地址://www.4mum.com.cn/p-5878468.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

    [email protected] 2017-2018 www.4mum.com.cn网站版权所有
    经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
     


    收起
    展开
  • 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
  • 广东11选5是真是假 山东菏泽麻将规则 海南41开奖结果查询 安徽十一选五一定牛网 时时彩开奖是机器开吗 排列5开奖结果直播 22选5复式中奖计算 吉林11选5开奖5结果 双色球复式投注蓝球 刮刮乐中奖100万几率 山西快乐10分1561 网上开心棋牌真可以赚钱吗 七乐彩复式注数计算公式 十三水h5 彩金捕鱼中文版下载 福建快三二同号遗漏