• 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
    • / 15
    • 下载费用:30 金币  

    重庆时时彩个位步长: 一种检测安胃疡中总黄酮含量的方法.pdf

    关 键 词:
    一种 检测 安胃疡中总 黄酮 含量 方法
      专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    摘要
    申请专利号:

    CN201110167643.1

    申请日:

    2011.06.21

    公开号:

    CN102230892A

    公开日:

    2011.11.02

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情: 专利权人的姓名或者名称、地址的变更IPC(主分类):G01N 21/33变更事项:专利权人变更前:新疆全安药业有限公司变更后:新疆全安药业股份有限公司变更事项:地址变更前:841011 新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市塔什店镇矿山路北侧变更后:841011 新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市塔什店镇矿山路北侧|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/33申请日:20110621|||公开
    IPC分类号: G01N21/33 主分类号: G01N21/33
    申请人: 新疆全安药业有限公司
    发明人: 王海峰; 李革; 邓继华; 刘晓芳; 于新兰
    地址: 841011 新疆维吾尔自治区巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市塔什店镇矿山路北侧
    优先权:
    专利代理机构: 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 代理人: 曹津燕
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201110167643.1

    授权公告号:

    |||102230892B||||||

    法律状态公告日:

    2016.05.25|||2013.04.17|||2011.12.14|||2011.11.02

    法律状态类型:

    专利权人的姓名或者名称、地址的变更|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明提供了检测甘草提取物、优选安胃疡中总黄酮含量的方法,该方法包括在碱性条件下测定该甘草提取物在337nm处的吸光度。与现有检测甘草提取物——安胃疡中总黄酮含量的重量法相比,本发明的检测方法具有方法简便、精确度高、受人为因素影响小和重现性好等优点。

    权利要求书

    1.一种检测甘草提取物、优选安胃疡中总黄酮含量的方法,所述方法
    包括测定碱性甘草提取物溶液在337nm处的吸光度。
    2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
    1)将甘草苷标准品溶解于低级醇水溶液中制备不同浓度的甘草苷溶液,
    并调节溶液的pH为碱性;
    2)测定步骤1)中制备的甘草苷溶液在337nm处的吸光度,绘制标准
    曲线;
    3)将待测甘草提取物溶解于低级醇水溶液中制备溶液,并调节溶液的
    pH为碱性,在337nm处测定吸光度,然后根据步骤2)中绘制的标准曲线,
    以甘草苷计得到所述甘草提取物中总黄酮的含量。
    3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中的低
    级醇水溶液为甲醇水溶液和/或乙醇水溶液。
    4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述低级醇水溶液为乙
    醇水溶液。
    5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述低级醇水溶液
    为60~80%乙醇水溶液。
    6.根据权利要求3至5中任一项所述的方法,其特征在于,所述低级
    醇水溶液为70%乙醇水溶液。
    7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其特征在于,所述方法
    包括:
    1)精密称取甘草苷标准品,用70%乙醇水溶液制成0.2mg/ml的溶液,
    然后精密量取该溶液0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml,分别置10ml量
    瓶中,各加70%乙醇水溶液1ml,再加10%氢氧化钾水溶液0.5ml,混匀,
    放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀释至刻度;
    2)以相应的试剂制成的溶液为空白,按照紫外-可见分光光度法在337nm
    波长处测定步骤1)中制备的溶液的吸光度,以吸光度为纵坐标,溶液中甘
    草苷的浓度为横坐标,绘制标准曲线;
    3)精密称取待测甘草提取物,用70%乙醇水溶液配制成0.16mg/ml的
    溶液,然后精密量取该溶液1ml置10ml量瓶中,加70%乙醇水溶液1ml,
    再加10%氢氧化钾溶液0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀释
    至刻度,以相应的试剂制成的溶液为空白,按照紫外-可见分光光度法在
    337nm波长处测定溶液的吸光度,从步骤2)中绘制的标准曲线读出该吸光
    度对应的甘草苷的浓度,从而得到以甘草苷计的待测甘草提取物中的总黄酮
    含量。
    8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其特征在于,所述方法
    步骤3)中的0.16mg/ml的溶液制法如下:
    精密称取待测粉状甘草提取物0.2g,置25ml容量瓶中,加70%乙醇适
    量,超声处理,室温放置,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀;然后精密量取
    0.2ml置10ml容量瓶中,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀。
    9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述超声处理为功率
    120W,频率25KHz,处理20分钟。

    说明书

    一种检测安胃疡中总黄酮含量的方法

    技术领域

    本发明属于药物技术领域。具体而言,本发明涉及一种检测甘草提取物、
    优选安胃疡(原料药)中总黄酮含量的方法。

    背景技术

    安胃疡(原料药)具有补中益气,解毒生肌,抑制胃液分泌,修复和保
    护胃粘膜的功效。适用于胃及十二指肠球部溃疡,对虚寒型和气滞型患者疗
    效较好。亦可用于溃疡愈合后的维持治疗。安胃疡(原料药)为甘草提取物,
    其主要活性成分为甘草黄酮,因此对该甘草提取物的总黄酮进行检测具有重
    要意义。

    安胃疡(原料药)的现行质量标准编号为WS3-001-(Z-001)-98-(Z),其中
    规定总黄酮含量测定的方法为重量法;由于重量法操作误差较大,受人为因
    素的影响较大,故重现性较差。

    随着时间的推移与科学技术的日新月异,安胃疡的检测方法已跟不上发
    展的形势,不利于产品质量的控制与产业化生产,工艺水平和质量标准也有
    待提高。因此,目前需要提供一种简便、准确、重现性好的检测安胃疡原粉
    中总黄酮含量的方法。

    发明内容

    甘草提取物---安胃疡(原料药)主要成份为甘草黄酮,以二氢黄酮类(如
    甘草苷)和查尔酮类化合物为主,并且二氢黄酮类易在碱液中开环,转变成
    相应的异构体——查尔酮类化合物。如果在碱性条件下测定安胃疡中甘草黄
    酮的含量,就能够近似代表安胃疡原粉中总黄酮的含量。

    本发明的发明人经过研究发现,查尔酮类化合物在紫外337nm波长处有
    特征峰,同时在一定浓度范围内呈线性关系,在碱性条件下所测得的结果是
    测试品中二氢黄酮类化合物和查尔酮类化合物的总量,而这些化合物是安胃
    疡原粉中的主要黄酮成份。因此,采用紫外法测定可得甘草提取物中总黄酮
    的含量。

    因此本发明的目的在于,提供一种检测甘草提取物中总黄酮含量的方
    法,且该方法与重量法相比,具有简便、精确度高、受人为因素的影响小、
    重现性好的特点。

    针对上述发明目的,本发明提供以下技术方案:

    本发明提供一种检测甘草提取物中总黄酮含量的方法,所述方法包括测
    定碱性甘草提取物溶液在337nm处的吸光度。

    所述方法优选包括以下步骤:

    1)将甘草苷标准品溶解于低级醇水溶液中制备不同浓度的甘草苷溶液,
    并调节溶液的pH为碱性;

    2)测定步骤1)中制备的甘草苷溶液在337nm处的吸光度,绘制标准
    曲线;

    3)将待测甘草提取物溶解于低级醇水溶液中制备溶液,并调节溶液的
    pH为碱性,在337nm处测定吸光度,然后根据步骤2)中绘制的标准曲线,
    以甘草苷计得到所述甘草提取物中总黄酮的含量。

    优选地,步骤1)中的低级醇水溶液为甲醇水溶液和/或乙醇水溶液;

    其中,低级醇水溶液优选为乙醇水溶液,进一步优选为60-80%(体积/
    体积)乙醇水溶液,更优选为70%乙醇水溶液。本说明书和所附权利要求书
    中采用的乙醇水溶液其浓度都以体积/体积计算。

    根据本发明的具体实施方式,该检测方法包括以下步骤:

    1)精密称取甘草苷标准品,用70%乙醇水溶液制成0.2mg/ml的溶液,
    然后精密量取该溶液0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml,分别置10ml量
    瓶中,各加70%乙醇水溶液1ml,再加10%(重量/体积)氢氧化钾水溶液
    0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀释至刻度;

    2)以相应的试剂制成的溶液为空白(即,除不含待测物外其它成分相
    同),按照紫外-可见分光光度法在337nm波长处测定步骤1)中制备的溶液
    的吸光度,以吸光度为纵坐标,溶液中甘草苷的浓度为横坐标,绘制标准曲
    线;

    3)精密称取待测甘草提取物,用70%乙醇水溶液配制成0.16mg/ml的
    溶液,然后精密量取该溶液1ml置10ml量瓶中,加70%乙醇水溶液1ml,
    再加10%氢氧化钾水溶液0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀
    释至刻度,以相应的试剂制成的溶液为空白(即,除不含待测物外其它成分
    相同),按照紫外-可见分光光度法在337nm波长处测定溶液的吸光度,从步
    骤2)中绘制的标准曲线读出该吸光度对应的甘草苷的浓度,从而得到以甘
    草苷计的待测甘草提取物中的总黄酮含量。

    其中该紫外-可见分光光度法参照《中国药典2010年版一部》附录VA。

    优选地,上述方法步骤3)中的0.16mg/ml的溶液制法如下:

    精密称取待测粉状甘草提取物0.2g,置25ml容量瓶中,加70%乙醇适
    量,超声处理,室温放置,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀;然后精密量取
    0.2ml置10ml容量瓶中,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀。

    其中,该超声处理的条件优选为功率120W,频率25KHz,处理20分
    钟。

    本发明提供了一种检测甘草提取物、优选安胃疡中的总黄酮含量的方
    法,该方法采用紫外-可见分光光度法,在碱性条件下,检测甘草提取物溶
    液在337nm处的吸光度。与重量法相比,采用紫外法测定甘草提取物、优选
    安胃疡中总黄酮的含量具有方法简便、精确度高、受人为因素的影响小、重
    现性好等优点。

    附图说明

    下文将结合下列附图来详细说明本发明的实施例。

    图1至图7为实施例1的200~450nm吸光度扫描图,其中:

    图1为甘草苷对照品溶于70%乙醇水溶液后在200-450nm的光谱扫描
    图,图中峰1为268.00nm,吸光度0.7759;峰2为219.00nm,吸光度1.5495;
    谷1为265.00nm,吸光度0.6618;谷2为247.00nm,吸光度0.3648;谷3
    为205.00nm,吸光度0.4259;谷4为203.00nm,吸光度0.4026;

    图2为甘草苷对照品溶于70%乙醇水溶液,再加入10%氢氧化钾水溶
    液后在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为400.00nm,吸光度0.1667;
    峰2为337.00nm,吸光度0.5901;峰3为255.00nm,吸光度0.2025;谷1
    为368.00nm,吸光度0.1140;谷2为269.00nm,吸光度0.1008;谷3为
    207.00nm,吸光度0.2714;

    图3为安胃疡(批号:050101)溶于70%乙醇水溶液后在200-450nm
    的光谱扫描图,图中峰1为268.00nm,吸光度0.3532;峰2为261.00nm,
    吸光度0.4266;峰3为218.00nm,吸光度0.6817;谷1为266.00nm,吸光
    度0.2848;谷2为230.00nm,吸光度0.1818;谷3为206.00nm,吸光度0.1494;

    图4为安胃疡(批号:050101)溶于70%乙醇水溶液,再加入10%氢氧
    化钾水溶液后在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为409.00nm,吸光度
    0.6307;峰2为338.00nm,吸光度0.8354;谷1为379.00nm,吸光度0.5494;
    谷2为293.00nm,吸光度0.5231;谷3为205.00nm,吸光度0.5990;谷4
    为203.00nm,吸光度0.6060;

    图5为70%醇水溶液在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为
    263.00nm,吸光度0.0031;峰2为224.00nm,吸光度0.0025;峰3为220.00nm,
    吸光度0.0030;谷1为269.00nm,吸光度-0.0061;谷2为220.00nm,吸光
    度-0.0235;谷3为214.00nm,吸光度-0.0104;

    图6为10%氢氧化钾水溶液在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为
    290.00nm,吸光度0.0551;

    图7为空白溶液(即,除不含待测物外其它成分相同),在200-450nm
    的光谱扫描图;

    图8为本发明实施例2绘制的标准曲线;

    图9为本发明实施例3的精密度试验中,采用本发明的检测方法测定的
    安胃疡在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为409.00nm,吸光度0.5194;
    峰2为337.00nm,吸光度0.6813;峰3为219.00nm,吸光度0.9736;谷1
    为379.00nm,吸光度0.4811;谷2为293.00nm,吸光度0.4114;谷3为
    214.00nm,吸光度0.5512;谷4为208.00nm,吸光度0.4776;谷5为203.00nm,
    吸光度0.4451;

    图10为本发明实施例3的稳定性试验中,采用本发明的检测方法测定
    的安胃疡在200-450nm的光谱扫描图,图中峰1为409.00nm,吸光度0.5441;
    峰2为337.00nm,吸光度0.6964;峰3为219.00nm,吸光度1.1565;谷1
    为379.00nm,吸光度0.5000;谷2为293.00nm,吸光度0.4268;谷3为
    207.00nm,吸光度0.5057;谷4为205.00nm,吸光度0.4832;谷5为203.00nm,
    吸光度0.4848。

    具体实施方式

    下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施
    例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。

    下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施
    例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到
    的。

    实施例中采用紫外分光光度计Tu?1900(购自瑞士CAMAG公司),光
    度模式:Abs;扫描速度:快速;光谱带宽:2nm;采样间隔:1.00nm。

    实施例中使用的甘草苷购于中国药品生物制品检定所,批号
    111610-200503。

    供试品安胃疡由新疆金鹿药业科技有限责任公司提供,批号分别为
    050101、050102、050103、050701、050702、050703、050704、050705、050706、
    050707。

    实施例1:最大吸收波长的选择

    在紫外分光光度计上进行下述样品的200~450nm吸光度扫描:

    (1)将甘草苷对照品溶于70%乙醇水溶液,取样,光谱扫描结果见图
    1;

    (2)将甘草苷对照品溶于70%乙醇水溶液,加入10%氢氧化钾水溶液,
    取样,光谱扫描结果见图2;

    (3)将供试品溶于70%乙醇水溶液,取样,光谱扫描结果见图3;

    (4)将供试品溶于70%乙醇水溶液,加入10%氢氧化钾水溶液,取样,
    光谱扫描结果见图4;

    (5)70%乙醇水溶液,取样,光谱扫描结果见图5;

    (6)10%氢氧化钾水溶液,取样,光谱扫描结果见图6;

    (7)空白溶液(即,除不含待测物外其它成分相同),取样,光谱扫描
    结果见图7。

    从以上结果可以看出,甘草苷对照品和供试品在337nm处有最大吸收,
    所用试剂以及空白溶液、氢氧化钾水溶液在337nm处无最大吸收,同时噪声
    水平也符合要求,因此确定337nm处为本发明方法的测定波长。

    实施例2:绘制标准曲线

    精密量取甘草苷对照品在70%乙醇水溶液中的溶液(0.2116mg/ml)
    0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml,分别置10ml容量瓶中,各加70%乙醇
    水溶液1ml,加10%氢氧化钾水溶液0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙
    醇水溶液稀释至刻度,以相应的试剂制成的溶液为空白(即,除不含待测物
    外其它成分相同),照紫外-可见分光光度法(《中国药典2010年版一部》附
    录VA)在337nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,以浓度为横坐标,
    绘制标准曲线,结果见表1和附图8。

    表1??甘草苷对照品标准曲线


    A=0.0193??B=5.7421??r=0.9998,公式为Y=5.7421x+0.0193。

    测定发现甘草苷在2.116×10-3mg/ml~1.904×10-2mg/ml之间呈良好的线
    性关系。

    实施例3:测定方法的方法学研究

    1、精密度试验

    精密称取供试品安胃疡(批号:050101)0.2g,置25ml容量瓶中,加
    70%乙醇水溶液适量,超声处理(功率120W,频率25KHz,处理20分钟),
    室温放置,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀;然后精密量取0.2ml置10ml
    容量瓶中,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀,从而得到0.16mg/ml的溶液。
    然后精密量取该溶液1ml置10ml量瓶中,加70%乙醇水溶液1ml,再加10%
    氢氧化钾水溶液0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀释至刻度,
    以相应的试剂制成的溶液为空白(即,除不含待测物外其它成分相同),按
    照紫外-可见分光光度法在337nm波长处测定溶液的吸光度,共测定5次,
    其中第一次测定结果见图9。

    吸光度结果分别为:0.6813、0.6806、0.6810、0.6809、0.6801;均值为:
    0.6808,RSD为:0.07%。由此可见该方法精密度良好。

    2、重复性试验

    将供试品安胃疡(批号:050101)按精密度试验中所述方法重复进行5
    次实验,测定在337nm处的吸光度,然后根据实施例2绘制的标准曲线计算
    供试品中以甘草苷计的总黄酮的含量,结果见表3。

    表2??重复性试验


    注:其中,吸光度1和吸光度2为同一个供试品的两次测定数据。

    平均值为:686mg/g,RSD为:1.7%。由此可见,该方法重复性良好。

    3、稳定性试验

    将供试品安胃疡(批号:050101)按精密度试验中所述方法制备测定溶
    液,每隔10分钟测定1次,共测定6次,结果见表4,第六次测定结果见图
    10。

    表3??稳定性试验数据

    ??序号
    ??1
    ??2
    ??3
    ??4
    ??5
    ??6
    ??时间(分钟)
    ??5
    ??15
    ??25
    ??35
    ??45
    ??55
    ??吸光度
    ??0.6894
    ??0.6854
    ??0.6860
    ??0.6858
    ??0.6881
    ??0.6964

    平均值为:0.6885,RSD为:0.6%。从实验中可以看出,该方法在55
    分钟内是稳定的。

    4、回收率

    取本品20mg(批号:050701),精密称定,置5ml量瓶中,精密加入甘
    草苷对照品溶液(105.8mg/20ml=5.29mg/ml)2ml,加70%乙醇水溶液适量,
    超声处理20分钟,室温放置,加70%乙醇水溶液至刻度,摇匀;然后精密
    量取该溶液1ml置10ml量瓶中,加70%乙醇水溶液1ml,再加10%氢氧化
    钾溶液0.5ml,混匀,放置5分钟,加70%乙醇水溶液稀释至刻度,以相应
    的试剂制成的溶液为空白(即,除不含待测物外其它成分相同),按照紫外
    分光光度法在337nm波长处测定溶液的吸光度,重复6次实验,结果见表4

    表4??回收率试验(n=6)



    实施例4:紫外法和重量法测定十批供试品的结果比较

    采用实施例3精密度试验所述方法对十批供试品进行了测定,计算供试
    品中以甘草苷计的总黄酮含量,结果见表5。

    表5??十批供试品的紫外法测定结


    根据十批供试品的测定结果,以甘草苷(C21H22O9)计,暂定本品含总
    黄酮不得少于500mg/g。

    对这十批供试品通过重量法进行了测定,其中重量法的测定操作为:

    称取安胃疡粉末或颗粒约1g,置105℃干燥3小时,研细,精密称取0.5g,
    置50ml量瓶中,加氢氧化钠试液至刻度,摇匀,使溶解滤过,弃去初滤液,
    精密吸取续滤液20ml,仔细滴加稀盐酸,调节PH值至3,静置片刻,用已
    恒重的垂熔漏斗滤过,用水洗涤沉淀,至洗液PH约5,105℃干燥3小时,
    计算,即得。结果见表6。

    表6??十批供试品的重量法测定结果


    从含量测定结果可以看出,重量法与紫外法比较,重量法的测定结果高
    于紫外法,由于重量法操作误差较大,重显性较差,故采用紫外法测定安胃
    疡中总黄酮的含量。

    关于本文
    本文标题:一种检测安胃疡中总黄酮含量的方法.pdf
    链接地址://www.4mum.com.cn/p-5870856.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

    [email protected] 2017-2018 www.4mum.com.cn网站版权所有
    经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
     


    收起
    展开
  • 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
  • 五分时时彩怎么玩 大乐透中奖规则 安徽时时快3玩法 天津时时合买平台 万人龙虎实时计划 pk10软件计划安卓版 彩无敌官网 黑龙江时时开奖号码0 福建时时计划群 快3技巧稳赚方法如下 后三组六稳赚万能8码 龙虎和计划 双色球基本走势图机选 中国体肓彩票开奖直播 七星彩实战技巧 赛车每一天稳赚玩法