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    重庆时时彩后三走势: 新型锝99M标记的高级脂肪酸衍生物.pdf

    关 键 词:
    新型 99 标记 高级 脂肪酸 衍生物
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    摘要
    申请专利号:

    CN201110149254.6

    申请日:

    2011.06.03

    公开号:

    CN102311459A

    公开日:

    2012.01.11

    当前法律状态:

    终止

    有效性:

    无权

    法律详情: 未缴年费专利权终止IPC(主分类):C07F 13/00申请日:20110603授权公告日:20140625终止日期:20150603|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C07F 13/00申请日:20110603|||公开
    IPC分类号: C07F13/00; A61K51/00; A61K103/10(2006.01)N 主分类号: C07F13/00
    申请人: 北京师范大学
    发明人: 张华北; 曾华辉; 于海静
    地址: 100875 北京市海淀区北京师范大学化学学院
    优先权:
    专利代理机构: 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 代理人: 张建纲
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201110149254.6

    授权公告号:

    |||102311459B||||||

    法律状态公告日:

    2016.07.27|||2014.06.25|||2012.03.07|||2012.01.11

    法律状态类型:

    专利权的终止|||授权|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    一种新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物,三羰基锝与高级脂肪酸环戊二烯相配位,所述与环戊二烯相连的脂肪酸中包括羰基和不饱和环状基团,可作为心肌显像剂使用,解决了现有技术中存在的锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物应用于心肌显像剂时,肝本底高或者血本底高的缺点,从而提供了一种肝本底和血本底都较低,能够作为心肌显像剂应用于临床的新型锝-99m标记的高级脂肪酸衍生物。

    权利要求书

    1: 一种如式 (Ⅰ) 所示的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, (Ⅰ) , n 为大于等于 10 小于等于 16 的自然数, X 为不饱和环状基团。
    2: 根据权利要求 1 所述的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 其特征在于 : 所述不饱和 环状基团为芳香基团。
    3: 根据权利要求 2 所述的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 其特征在于 : 所述化合物 的结构式为 、 、 或 ,n 为 大于等于 10 小于等于 16 的自然数。
    4: 根据权利要求 3 所述的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 其特征在于 : 所述化合物 为 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸 、 17- 环 戊 二 烯 基 三 羰 基 锝 -17- 羰 基 十 七 酰 基 -5- 呋 喃 -2- 乙 酸 、 17- 环戊二烯基三羰基锝 -17- 羰基十七?;?-5-(N- 甲基 ) 吡咯 -2- 乙酸 2 、 或 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸 。
    5: 根据权利要求 1 至 4 中任意一项所述的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物作为心肌 显像剂的应用。
    6: 一种制备权利要求 1 至 4 中任意一项所述的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方 法, 包括以下步骤 : (1) 将氯化亚砜、 三氯氧磷或五氯化磷与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 反应得到如式 (Ⅱ) 所 示的长链脂肪烃二酰氯, 所述长链脂肪烃二酸为十三碳直链脂肪烃二酸、 十四碳直链脂肪 烃二酸或十五碳直链脂肪烃二酸 ; (2) 将所述长链脂肪烃二酰氯与二茂铁反应, 生成一个氯被二茂铁取代的中间体, 中间 体结构如式 (Ⅲ) 所示 ; (3) 将所述步骤 (2) 中得到的中间体与 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯反应, 经分离后 得到的固体为产物前体, 产物前体的结构式如式 (Ⅳ) 所示 ; (4) 将 所 述 产 物 前 体 与 Na99mTcO4 淋 洗 液、六 羰 基 铬、三 氯 化 铬、甲 醇 反应后水解得到产物如式 (Ⅰ)所 示 的 锝 -99m 标 记 的 高 级 脂 肪 酸 衍 生 物 3 。
    7: 根据权利要求 6 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特征在于 : 99m 所述步骤 (4) 为, 把 Na TcO4 淋洗液加入聚四氟高压罐中, 用 N2 吹干 ; 分别加入步骤 (3) 中得到的产物前体、 Cr(CO)6、 CrCl3 和甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 油浴磁力搅拌 ; 反应 结束后, 在冰浴下迅速冷却, 然后在水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用甲醇溶解, 并加入 NaOH 后在水浴下反应 ; 冷却后, 再加入 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化、 分析鉴定得到产物。
    8: 根据权利要求 7 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特征在于 : (1) 在冰浴条件下, 将新蒸氯化亚砜、 三氯氧磷或五氯化磷缓慢滴加到长链脂肪烃二酸 (II’ ) 中, 滴加完毕后, 继续搅拌 5-10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 小时, 生成长链 脂肪烃二酰氯 (II) ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应, 所述氯化亚砜与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 为摩尔比为 10:1-20:1, 所述三氯氧磷或五氯化磷 与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 为摩尔比 1.5:1-3:1 ; (2) 向步骤 (1) 中的产物长链脂肪烃二酰氯 (II) 中加入无水二氯甲烷溶解, 得到长链 脂肪烃二酰氯 (II) 的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将含二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入 上述长链脂肪烃二酰氯 (II) 的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将无水 AlCl3 缓慢加入混 合液中, 20-30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1-2h, 升至室温搅拌 10-20min, 生成中间体 (III) ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; 所述步骤 (2) 中, 所述长链脂肪烃二酰氯 (II) 与所述二茂铁的摩尔比为 1:1, 使用无水 AlCl3 作催化剂, 所述二茂铁与所述无水 AlCl3 的摩尔比为 1:1 至 1:1.2 ; (3) 把步骤 (2) 中的产物置于冰水浴中, 加入 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯, 在 N2 保 护下, 将无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10-20 min 加完, 在冰浴下搅拌 1-2h, 升至室温搅拌 10-20min ; 反应结束后, 缓慢加入盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸 ; 用体 积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前体 (Ⅳ) ; 所述步骤 (3) 中, 所述中间体 (III) 与所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比 为 1:1-1:1.5, 使用无水 AlCl3 或无水 SnCl2 作催化剂, 所述无水 AlCl3 或无水 SnCl2 与所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比为 1:1.5 至 1:3 ; (4) 把放射性活度为 740 MBq 或 370 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压 罐中, 在 70-100℃下用 N2 吹干 ; 分别加入所述产物前体 (Ⅳ) 、 Cr(CO)6、 CrCl3 和甲醇后, 密封 聚四氟高压罐 ; 在 150-180℃油浴下, 磁力搅拌 50-60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50-70℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二 氯甲烷溶剂 ; 残留物用甲醇溶解, 并加入 NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10-15 min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 ; 所述产物前体 (IV) 、 六 羰 基 铬、 三 氯 化 铬 与 甲 醇 的 摩 尔 比 为 3.00-5.34 μmol : 4.82-
    9: 64 μmol : 1.60-3.21 μmol : 6.18-9.89mmol。 4 9. 根据权利要求 6 或 7 或 8 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特 征在于 : 所述步骤 (3) 中, 所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯为 2- 噻吩乙酸甲酯、 2- 呋喃乙酸 甲酯、 2- 吡咯乙酸甲酯或 2- 苯基乙酸甲酯。
    10: 根据权利要求 9 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特征在 于: 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 90℃, 回流 12 小时, 生成产物十五二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多 余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 中的产物十五二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯 的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述 十五二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将
    11: 2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min, 生成 15- 二茂铁 -15- 羰基十五 酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3) 把步骤 (2) 中的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol 2- 噻吩乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体为 15- 二茂铁 -15- 羰基十五?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸甲酯 ; (4) 把 0.2 mL Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下 的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加 入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五 ?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸 。 11. 根据权利要求 9 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特征在 于: 包括以下步骤 : 滴加完毕后, 继 (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 续搅拌 10min, 然后升温至 80-90℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十七二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十七二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 5 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h , 升至室温搅拌 10min, 生成 17- 二茂铁 -17- 羰基十七 酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2- 呋喃乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 SnCl2 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体是 17- 二茂铁 -17- 羰基十七?;?-5- 呋喃 -2- 乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34μmol 所述产物前体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃ 油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲 醇溶解, 并加入 50μL 0.3mol/L NaOH 后在 70-80 ℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 17- 环戊二烯基三羰基 锝 -17- 羰基十七?;?-5- 呋喃 -2- 乙酸 。
    12: 根据权利要求 9 任意一项所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其 特征在于 : 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 滴加完毕后, 继 续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十七二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十七二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2-(N- 甲基 ) 吡咯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10 min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至 室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到 产物前体, 产物前体为 17- 二茂铁 -17- 羰基十七?;?-5--(N- 甲基 ) 吡咯乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋 洗 液 加 入 一 个 5mL 聚 四 氟 高 压 罐 中, 所 述 Na99mTcO4 淋 洗 液 的 放 射 性 活 度 为 740 MBq, 在 70-100 ℃ 下 用 N2 吹 干 ; 分 别 加 入 5.34μmol 所 述 产 物 前 体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21μmol CrCl3 和 300 μL 甲 醇 后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160 ℃ 油 浴 下, 磁 力 搅 拌 60min ; 反 应 结 束 后, 在 冰 浴 下 迅 速 冷 却 5-10min, 然后在 50 ℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残 留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70-80 ℃水浴下反应 6 10min ; 冷却后, 再加入 150μL 0.1 mol/L HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯 化得到产物 17- 环戊二烯基三羰基锝 -17- 羰基十七?;?-5-(N- 甲基 ) 吡咯 -2- 乙酸 。
    13: 根据权利要求 9 所述的制备锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 其特征在于 : 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继 续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十五二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十五二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min, 生成 15- 二茂铁 -15- 羰基十五 酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3)把步骤 (2)得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol 苯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体为 15- 二茂铁 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34μmol 所述产物前体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21μmol CrCl3 和 300μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃ 油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇 溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 15- 环戊二烯基三羰基 锝 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸 。

    说明书


    新型锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物

        技术领域 本发明涉及一种高级脂肪酸衍生物。具体地说是一种新型锝 -99m 标记的高级脂 肪酸衍生物。
         背景技术 心脑血管疾病包括心脏病、 高血压、 高血脂症等, 目前已成为危害人们健康的主要 疾病。 在心脏病的防治过程中, 放射性药物在心脏病的早期诊断方面具有重要作用, 由于在 心肌内, 脂肪酸通过氧化分解的代谢形式释放能量, 当心肌局部缺血时, 心肌对脂肪酸的代 谢和清除呈下降趋势, 利用放射性元素标记的心肌代谢显像剂可用来对心肌缺血定位, 测 量反映心肌代谢功能的变化, 检测心肌细胞存活的情况等, 从而为临床诊断心血管疾病提 供可靠的依据。
         基 于 正 电 子 发 射 X 射 线 层 析 照 相 技 术 PET/ 单 光 子 发 射 计 算 机 化 断 层 显 像 技 术 SPECT 的 放 射 性 药 物 被 认 为 是 实 现 早 期 诊 断 的 最 佳 途 径, 由于 锝 -99m 具 有 半 衰 期 合 适、 能 量 适 中 等 优 良 的 核 性 质, 并 且 制 备 简 单、 无 挥 发 性,
         同 时, 锝 -99m 核 心 种 类 很 多、 标 记 过 程 简 单、 利 于 进 行 药 物 设 计, 因 此 锝 -99m 是 放 射 性 药 物 研 究 的 优 选 核 素。80 年 代 已 应 用 于 临 床 诊 断 的 99mTc-MIBI() 心肌灌注显像对诊断心肌缺血及坏死有一定的准确性, 但近年来研究表明这些方法不能很准确的评估出心肌细胞的存活力。
         目前, 国内研究的锝 -99m 标记的心肌代谢显像剂比较少 , 且心肌摄取不高。而国 际上研究的锝 -99m 标记的心肌代谢显像剂实现了较高的心肌摄取。
         2006 年的期刊 《同位素》中公开了文献 《长链脂肪酸衍生物 99mTc-MAMA-(CH2) , 其中北京师范大学王学斌教授等以短链二酸和 MAMA 配体为 nCOOH 的制备和生物分布》 起始原料, 合成了一系列锝 -99m 核心标记的长链脂肪酸衍生物 [99mTc]-MAMA-(CH2)nCOOH(n=14,15,16,17)。正常小鼠的生物分布数据显示, 5min 时这类标记物在心肌中的摄取百分数依次为 5.73%ID/g、 5.52%ID/g、 4.82%ID/g、 4.03%ID/g (%ID/g 为每克组织的放射性药物占总注射剂量的百分数) , 但血液对放射性药物的摄取量高于心肌对放射性药物的摄取量即血本底较高, 并且血清除较慢, 不适合作为心肌显像剂 进行应用。
         2008 年 的 期 刊 Applied Radiation and Isotopes 中, 褚 泰 伟 等 人 通 过 [99mTc(CO)3(H2O)3]+ 核 心 与 脂 肪 酸 配 体 进 行 配 合 得 到99mT c ( C O ) 3- I U A和99mT c ( C O ) 3- B P I U A, 遗憾的是这两种化合物和其它的锝标记的脂肪酸类似物一样, 小鼠体内分布研究表明血 / 心比值比较高, 即血液对放射性药物 的摄取量高于心肌对放射性药物的摄取量, 因此这两个化合物不适合用于心肌显像研究。
         2007 年 的 期 刊 Journal of Medicinal Chemistry 中 公 开 了 文 献 Technetium-99m-labeled long chain fatty acid analogues metabolized by β-oxidation in the heart,其 中 Yasushi Arano 等 首 次 报 道 了 用 [99mTc] CpTT-PA 进行心肌脂肪酸代谢测定, 心肌代谢实验显示 67% 进入到心脏的 [99mTc]CpTT-PA 被吸收, 实现了较高的心肌摄取, 但是 10 分钟后, 心肌的摄取量为 1.87%ID/g, 肝的摄取量为 7.56%ID/g, 放射性药物在肝内的摄取 量高于心肌, 即形成了较高的肝本底, 不利于心肌的显像。
         2008 年 的,期 刊 Journal of Medicinal Chemistry 中 公 开 了 文 献 16-Cyclopentadienyl Tricarbonyl Tc 16-Oxo-hexadecanoic Acid: Synthesis and Evaluation of Fatty Acid Metabolism in Mouse Myocardium,其 中, Yearn Seong 99m Choe 等在 [ Tc]CpTT-PA 的结构基础上保留了与戊二烯环相连的羰基, 合成了化合物[99mTc]-CpTT-16-oxo-HAD。动物实验表明 :但是 1 分钟时肝的摄取量达到了 25.6 %ID/g, 肝 心肌摄取量较 [99mTc]CpTT-PA 有所提高, 本底偏高, 直接影响心肌的显像。
         因此, 在现有技术中, 锝 -99m 标记的高级脂肪酸显像剂的优点是有较高的心肌初 始摄取和快速的心肌代谢 ; 但锝 -99m 标记高级脂肪酸心肌显像剂在肝中的代谢较慢或者 在血液中的代谢较慢, 形成较高的肝本底或血本底, 从而影响心肌的显像。因此, 目前还没 有一个锝 -99m 标记的高级脂肪酸显像剂进入到临床实验阶段。 发明内容
         为此, 本发明所要解决的技术问题在于现有技术中存在的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物应用于心肌显像剂时, 存在肝本底高或者血本底高的缺点, 从而提供了一种肝 本底和血本底都较低, 能够作为心肌显像剂应用于临床的新型锝 -99m 标记的高级脂肪酸 衍生物。
         为解决上述技术问题, 本发明提供了一种如式 (Ⅰ) 所示的锝 -99m 标记的高级脂肪 酸衍生物,, n 为大于等于 10 小于等于 16 的自然数,X 为不饱和环状基团。
         所述不饱和环状基团为芳香基团。 所述化合物的结构式为, n 为大于等于 10 小于等于 16 的自然数。
         所述化合物为 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸、 17- 环 戊 二 烯 基 三 羰 基 锝 -17- 羰 基 十 七 ?;?-5- 呋喃 -2- 乙酸、 17- 环戊二烯基三羰基锝 -17- 羰基十七?;?-5-(N- 甲基 ) 吡咯 -2- 乙酸或 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸。所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物作为心肌显像剂的应用。
         制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 将氯化亚砜、 三氯氧磷或五氯化磷与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 反应得到如式 (Ⅱ) 所 示的长链脂肪烃二酰氯, 所述长链脂肪烃二酸为十三碳直链脂肪烃二酸、 十四碳直链脂肪 烃二酸或十五碳直链脂肪烃二酸 ;
         (2) 将所述长链脂肪烃二酰氯与二茂铁反应, 生成一个氯被二茂铁取代的中间体, 中间 体结构如式 (Ⅲ) 所示 ;(3) 将所述步骤 (2) 中得到的中间体与 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯反应, 经分离后 得到的固体为产物前体, 产物前体的结构式如式 (Ⅳ) 所示 ;(4) 将 所 述 产 物 前 体 与 Na99mTcO4 淋 洗 液、六 羰 基 铬、三 氯 化 铬、甲 醇 反应后水解得到产物如式 (Ⅰ)所 示 的 锝 -99m 标 记 的 高 级 脂 肪 酸 衍 生 物。
         所述步骤 (4) 为, 把 Na99mTcO4 淋洗液加入聚四氟高压罐中, 用 N2 吹干 ; 分别加入步 骤 (3) 中得到的产物前体、 Cr(CO)6、 CrCl3 和甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 油浴磁力搅拌 ; 反 应结束后, 在冰浴下迅速冷却, 然后在水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用甲醇溶解, 并加入 NaOH 后在水浴下反应 ; 冷却后, 再加入 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化、 分析鉴定得到产物。制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将新蒸氯化亚砜、 三氯氧磷或五氯化磷缓慢滴加到长链脂肪烃二酸 (II’ ) 中, 滴加完毕后, 继续搅拌 5-10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 小时, 生成长链 脂肪烃二酰氯 (II) ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应, 所述氯化亚砜与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 为摩尔比为 10:1-20:1, 所述三氯氧磷或五氯化磷 与长链脂肪烃二酸 (II’ ) 为摩尔比 1.5:1-3:1 ; (2) 向步骤 (1) 中的产物长链脂肪烃二酰氯 (II) 中加入无水二氯甲烷溶解, 得到长链 脂肪烃二酰氯 (II) 的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将含二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入 上述长链脂肪烃二酰氯 (II) 的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将无水 AlCl3 缓慢加入混 合液中, 20-30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1-2h, 升至室温搅拌 10-20min, 生成中间体 (III) ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; 所述步骤 (2) 中, 所述长链脂肪烃二酰氯 (II) 与所述二茂铁的摩尔比为 1:1, 使用无水 AlCl3 作催化剂, 所述二茂铁与所述无水 AlCl3 的摩尔比为 1:1 至 1:1.2 ; (3) 把步骤 (2) 中的产物置于冰水浴中, 加入 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯, 在 N2 保 护下, 将无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10-20 min 加完, 在冰浴下搅拌 1-2h, 升至室温搅拌 10-20min ; 反应结束后, 缓慢加入盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸 ; 用体 积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前体 (Ⅳ) ; 所述步骤 (3) 中, 所述中间体 (III) 与所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比 为 1:1-1:1.5, 使用无水 AlCl3 或无水 SnCl2 作催化剂, 所述无水 AlCl3 或无水 SnCl2 与所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯的摩尔比为 1:1.5 至 1:3 ; (4) 把放射性活度为 740 MBq 或 370 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压 罐中, 在 70-100℃下用 N2 吹干 ; 分别加入所述产物前体 (Ⅳ) 、 Cr(CO)6、 CrCl3 和甲醇后, 密封 聚四氟高压罐 ; 在 150-180℃油浴下, 磁力搅拌 50-60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50-70℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二 氯甲烷溶剂 ; 残留物用甲醇溶解, 并加入 NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10-15 min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 ; 所述产物前体 (IV) 、 六 羰 基 铬、 三 氯 化 铬 与 甲 醇 的 摩 尔 比 为 3.00-5.34 μmol : 4.82-9.64 μmol : 1.60-3.21 μmol : 6.18-9.89mmol。
         所述步骤 (3) 中, 所述 2- 位不饱和环状基团乙酸甲酯为 2- 噻吩乙酸甲酯、 2- 呋喃 乙酸甲酯、 2- 吡咯乙酸甲酯或 2- 苯基乙酸甲酯。
         制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 90℃, 回流 12 小时, 生成产物十五二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多 余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 中的产物十五二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯 的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述 十五二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min, 生成 15- 二茂铁 -15- 羰基十五 酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ;(3) 把步骤 (2) 中的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol 2- 噻吩乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体为 15- 二茂铁 -15- 羰基十五?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸甲酯 ; (4) 把 0.2 mL Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下 的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加 入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-5- 噻吩 -2- 乙酸。制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 滴加完毕后, 继 续搅拌 10min, 然后升温至 80-90℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十七二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十七二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h , 升至室温搅拌 10min, 生成 17- 二茂铁 -17- 羰基十七 酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2- 呋喃乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 SnCl2 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体是 17- 二茂铁 -17- 羰基十七?;?-5- 呋喃 -2- 乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34μmol 所述产物前体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃ 油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50 ℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3mol/L NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 17- 环戊二烯基三羰基
         锝 -17- 羰基十七?;?-5- 呋喃 -2- 乙酸。制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 滴加完毕后, 继 续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十七二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十七二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 述十七二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2-(N- 甲基 ) 吡咯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10 min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至 室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到 产物前体, 产物前体为 17- 二茂铁 -17- 羰基十七?;?-5--(N- 甲基 ) 吡咯乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋 洗 液 加 入 一 个 5mL 聚 四 氟 高 压 罐 中, 所 述 Na99mTcO4 淋 洗 液 的 放 射 性 活 度 为 740 MBq, 在 70-100 ℃ 下 用 N2 吹 干 ; 分 别 加 入 5.34μmol 所 述 产 物 前 体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21μmol CrCl3 和 300 μL 甲 醇 后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160 ℃ 油 浴 下, 磁 力 搅 拌 60min ; 反 应 结 束 后, 在 冰 浴 下 迅 速 冷 却 5-10min, 然后在 50 ℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残 留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70-80 ℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 150μL 0.1 mol/L HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯 化得到产物 17- 环戊二烯基三羰基锝 -17- 羰基十七?;?-5-(N- 甲基 ) 吡咯 -2- 乙酸
         。制备所述锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的方法, 包括以下步骤 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继 续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 生成产物十五二酰氯 ; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; (2) 向步骤 (1) 得到的产物十五二酰氯中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰 氯的二氯甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 述十五二酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min, 生成 15- 二茂铁 -15- 羰基十五
         酰氯 ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下一步 ; (3)把步骤 (2)得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol 苯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体, 产物前体为 15- 二茂铁 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸甲酯 ; (4)把 0.2 mLNa99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 所述 Na99mTcO4 淋洗液 的放射性活度为 740 MBq, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34μmol 所述产物前体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21μmol CrCl3 和 300μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃ 油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇 溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 用 HPLC 进行纯化得到产物 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸。本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点。
         (1) 本发明中的新型锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 结合戊二烯环与羰基锝配 位对系列直链脂肪酸和 β- 取代直链脂肪酸进行标记, 得到的锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍 生物为中性, 能够成功的进入心肌, 并且还引入环戊二烯相连的脂肪酸羰基基团, 降低了产 物的脂溶性。锝 -99m 标记的茂环脂肪酸化合物在动物体内肝摄取过高的原因与化合物的 脂溶性有关, 现有技术中高级脂肪酸本身的脂溶性就很好, 与锝原子配位的茂环又增加了 标记物的酯溶性, 导致肝的摄取增加, 影响了心肌的显像效果。 本发明中的化合物通过引入 羰基, 降低产物的脂溶性, 降低了肝的摄取, 提高心肌的摄取, 使其在具有较优的心肌显像 性能, 既本发明中的化合物同时具有较高的心肌摄取性能、 很低的肝本底摄取性能和较优 的心肌显像性能。
         (2) 本发明中的新型锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 其中的噻吩取代基、 呋喃 取代基、 吡咯取代基结构利于心肌对锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物的摄取, 能提高心肌 的摄取量, 有利于心肌的显像效果。
         (3) 本发明中的新型锝 -99m 标记的高级脂肪酸衍生物, 其中的原料锝 -99m 比较廉 价, 高级脂肪酸本身在生物体内无毒, 由于具有较高的心肌摄取性能、 很低的肝本底摄取性 能和较优的心肌显像性能, 适合应用于心肌显像剂, 具有较好的心肌显像效果。
         (4) 本发明的制备方法中, 优选氯化亚砜与长链脂肪烃二酸反应, 得到的长链脂肪 烃二酰氯产率较高, 几乎为 100%。
         附图说明
         为了使本发明的内容更容易被清楚的理解, 下面根据本发明的具体实施例并结合附图, 对本发明作进一步详细的说明, 其中 1 图 1 是产物前体 CpOPTAM 的 HNMR 谱图 ; 图 2 是产物前体 CpOPTAM 的 13CNMR 谱图 ; 图 3 是产物前体 CpOPTAM 的 MS 谱图 ; 图 4 是 Re-CpTTOPTAA 的 1HNMR 谱图 ; 图 5 是 Re-CpTTOPTAA 的 13CNMR 谱图 ; 图 6 是 Re-CpTTOPTAA 的 MS 谱图 ; 图7 是 SD 大 鼠 尾 静 脉 注 射 99mTc-CpTTOPTAA 30 min 后 的 心 肌 匀 浆 提 取 物 的 radio-HPLC 图 ; 图 8 是 99mTc-CpTTOPTAA 的 radio-HPLC 图 ; 图 9 是 SD 大鼠尾静脉注射 Re-CpTTOPTAA 30 min 后的心肌匀浆提取物的质谱分析 图。 具体实施方式
         通过以下化合物对本发明进行说明 : 实施例 1化合物一: 15- 环 戊 二 烯 基 三 羰 基 锝 -15- 羰 基 十 五 酰 基 -5- 噻 吩 -2- 乙 酸 ( Tc-CpTTOPTAA) 所述化合物一 (99mTc-CpTTOPTAA) 的合成路线为 :99m所述化合物一的合成步骤为 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕 后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 90℃, 回流 12 个小时, 发生如下反应, 生成产物十五二酰氯。反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; 步骤 (1) 对应以 下反应式 :(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯的二氯 甲烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二 酰氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加 完, 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下 一步 ; 步骤 (2) 对应以下反应式 :(3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2- 噻吩乙酸甲酯, 在 N2 ?;?下, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1-2h, 升至室温搅 拌 10min。反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸。用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到 3.8g 棕红色固体为产物前体, 产率 58.7%。步骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把 0.2ml 放射性活度为 740 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压 罐中, 在 70℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应 结束后, 在冰浴下迅速冷却 10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃 取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 该产物用 HPLC 进行纯化、 分析鉴定。使用 Alltech C-18 反相分析色谱柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间为 16.42min。标 记率可达 20.0%。步骤 (4) 对应以下反应式 :通过以上步骤即可得到化合物一 (99mTc-CpTTOPTAA)。
         所述化合物一也可以通过以下合成步骤制备 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 5min, 然后升温至 95℃, 回流 6 个小时, 发生如下反应, 生成产物十五二酰氯。反 应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; 步骤 (1) 对应以下反应 式:(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯的二氯甲 烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰 氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 20min 加 完, 在冰浴下继续搅拌 2h, 升至室温搅拌 20min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下 一步 ; 步骤 (2) 对应以下反应式 :(3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2- 噻吩乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 20min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min。反应结束后, 缓慢加入 20mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸。用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到 3.8g 棕 红色固体为产物前体, 产率 58.7%。步骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把 0.2ml 放射性活度为 740 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压 罐中, 在 100℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 180℃油浴下, 磁力搅拌 50min ; 反应 结束后, 在冰浴下迅速冷却 5min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃 取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L 的NaOH 后在 80℃水浴下反应 15min ; 冷却后, 再加入 0.1mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 该产物用 HPLC 进行纯化、 分析鉴定。使用 Alltech C-18 反相分析色谱柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间为 16.42min。标 记率可达 25.0%。步骤 (4) 对应以下反应式 :通过以上步骤即可得到化合物一 (99mTc-CpTTOPTAA)。
         实施例 2化合物二: 17- 环 戊 二 烯 基 三 羰 基 锝 -17- 羰 基 十 七 酰 基 -5- 呋 喃 -2- 乙 酸 ( Tc-CpTTOPFAA) 所述化合物二 (99mTc-CpTTOPFAA) 的合成路线为 :99m所述化合物二的合成步骤为 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 80-90℃, 回流 6-12 个小时, 发生如下反应, 生成产物十七二酰 氯。反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应。步骤 (1) 对应 以下反应式 :(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰氯的二氯甲 烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰 氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加 完, 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下 一步 ; 步骤 (2) 对应以下反应式 :(3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2- 呋喃乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 SnCl2 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体; 步骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把 0.2ml 放射性活度为 740 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 在 70-100℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34μmol 所述产物前体、 9.64μmolCr(CO)6、 3.21μmol CrCl3 和 300μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结 束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃 取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L HCl 中和, 用二氯甲烷萃 ??; 步骤 (4) 对应以下反应式 :该 产 物 用 HPLC 进 行 纯 化、 分 析 鉴 定。 使 用 Alltech C-18 反 相 分 析 色 谱 柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的 水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间 为 17.02min。标记率可达 18.5%。通过以上步骤即可得到化合物二 (99mTc-CpTTOPFAA)。 实施例 3化合物三 : 17- 环戊二烯基三羰基锝 -17- 羰基十七?;?-5-(N- 甲基 ) 吡咯 -2- 乙酸 99m ( Tc-CpTTOPMPAA) 所述化合物三 (99mTc-CpTTOPMPAA) 的合成路线为 :所述化合物三的合成步骤为 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十七二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 发生如下反应, 生成产物十七二酰 氯; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; 步骤 (1) 对应以 下反应式 :(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十七二酰氯的二氯甲 烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十七二酰 氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加 完, 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下 一步 ; 步骤 (2) 对应以下反应式 :(3) 把步骤 (2) 得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol2-(N- 甲基 ) 吡咯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10 min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至 室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到 产物前体 ; 步骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把 0.2ml 放射性活度为 740 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300 μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯 甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200 μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 mol/L 的 NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L HCl 中和, 用二 氯甲烷萃取 ; 步骤 (4) 对应以下反应式 :该 产 物 用 HPLC 进 行 纯 化、 分 析 鉴 定。 使 用 Alltech C-18 反 相 分 析 色 谱 柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的 水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间 为 17.00min。标记率可达 17.6%。
         通过以上步骤即可得到化合物三 (99mTc-CpTTOPMPAA)。
         实施例 4化合物四 : 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五?;?-4- 苯乙酸 (99mTc-CpTTOPPAA)所述化合物四 (99mTc-CpTTOPPAA) 的合成路线为 :所述化合物四的合成步骤为 : (1) 在冰浴条件下, 将 15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕后, 继续搅拌 10min, 然后升温至 80-95℃, 回流 6-12 个小时, 发生如下反应, 生成产物十五二酰 氯; 反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应 ; 步骤 (1) 对应以 下反应式 :(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯的二氯甲 烷溶液 ; 在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二酰 氯的二氯甲烷溶液中 ; 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 30min 加 完, 在冰浴下继续搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 无需进一步纯化, 直接进行下 一步 ; 步骤 (2) 对应以下反应式 :(3)把步骤 (2)得到的产物置于冰水浴中, 加入 11mmol 苯乙酸甲酯, 在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 10min 加完, 在冰浴下搅拌 1h, 升至室温搅拌 10min ; 反应结束后, 缓慢加入 30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 无水 MgSO4 干燥, 过 滤, 旋蒸 ; 用体积比为 10:1 至 2:1 的石油醚和乙酸乙酯作为展开剂过硅胶柱, 得到产物前 体; 步骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把 0.2ml 放射性活度为 740 MBq 的 Na99mTcO4 淋洗液加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 在 70-100 ℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 5.34 μmol 所述产物前体、 9.64 μmolCr(CO)6、 3.21 μmol CrCl3 和 300μL 甲醇后, 密封聚四氟高压罐 ; 在 150-160℃油浴下, 磁力搅拌 60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷却 5-10min, 然后在 50℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯 甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 200μL 甲醇溶解, 并加入 50μL 0.3 N NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10 min ; 冷却后, 再加入 0.1 mol/L 的 HCl 中和, 用二氯甲烷 萃取 ; 步骤 (4) 对应以下反应式 :该 产 物 用 HPLC 进 行 纯 化、 分 析 鉴 定。 使 用 Alltech C-18 反 相 分 析 色 谱 柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的 水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间 为 18.32min。标记率可达 21.0%。
         通过以上步骤即可得到化合物四 (99mTc-CpTTOPPAA)。
         对比例对比化合物 : 15- 环戊二烯基三羰基锝 -15- 羰基十五羧酸 所述对比化合物 (99mTc-CpTTOPDA) 的合成路线为 :(99mTc-CpTTOPDA)所述对比化合物的合成步骤为 : (1) 在冰浴条件下, 将 10-15mL 新蒸 SOCl2 缓慢滴加到 11mmol 十五二酸中, 滴加完毕 后, 继续搅拌 5-10min, 然后升温至 80-95 ℃, 回流 6-12 个小时, 发生如下反应, 生成产物 十五二酰氯。反应结束后, 蒸除多余的 SOCl2, 产物不作进一步纯化直接下一步反应。步骤 (1) 对应以下反应式 :(2) 向步骤 (1) 得到的产物中加入 10-15mL 无水二氯甲烷溶解, 得到十五二酰氯的二氯 甲烷溶液。在冰浴条件下, 将 15mL 含 11mmol 二茂铁的二氯甲烷溶液缓慢滴入上述十五二 酰氯的二氯甲烷溶液中。在 N2 ?;は?, 将 11.2mmol 无水 AlCl3 缓慢加入混合液中, 20-30 min 加完 , 在冰浴下继续搅拌 1-2h, 升至室温搅拌 10-20min。反应结束后, 无需进一步纯 化, 直接进行下一步。步骤 (2) 对应以下反应式 :(3) 在冰浴下, 向步骤 (2) 所得产物中缓慢加入 10 ml 甲醇和 2ml 三乙胺的混合溶液。 在 100 ℃下搅拌 1-2h。停止反应, 旋蒸的粗产品。向粗产品中缓慢加入 20-30mL 1mol/L 的盐酸, 用二氯甲烷萃取, 饱和食盐水洗 3 次, 再用无水 MgSO4 干燥, 过滤, 旋蒸。 用展开剂石 油醚 : 乙酸乙酯 =10:1 ~ 2:1 梯度过硅胶柱, 得到棕红色固体为产物前体, 产率 50.0%。步 骤 (3) 对应以下反应式 :(4) 把放射性活度为 740 MBq (20mCi) ( 或 370 MBq(10mCi) ) 的 Na99mTcO4 淋洗液 加入一个 5mL 聚四氟高压罐中, 在 70-100℃下用 N2 吹干 ; 分别加入 3.00-5.34 μmol 所述 产物前体、 4.82-9.64 μmolCr(CO)6、 1.60-3.21 μmol CrCl3 和 250-400 μL 甲醇后, 密 封聚四氟高压罐 ; 在 160-180℃油浴下, 磁力搅拌 50-60min ; 反应结束后, 在冰浴下迅速冷 却 5-10min, 然后在 50-70℃水浴下用 N2 吹干 ; 剩下的产物用二氯甲烷萃取, 过滤, 用 N2 吹 干二氯甲烷溶剂 ; 残留物用 150-200 μL 甲醇溶解, 并加入 50-100 μL 0.3 N NaOH 后在 70-80℃水浴下反应 10-15 min ; 冷却后, 再加入 0.1 N HCl 中和, 用二氯甲烷萃取 ; 该产物 用 HPLC 进行纯化、 分析鉴定。使用 Alltech C-18 反相分析色谱柱 (4.6mm×150mm, 5μm) , 放射性化合物用 Flow-Count 放射性检测器检测。流动相为 20% 的水 (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 2mL/min, 分析样品时的进样量为 200μL, 保留时间为 19.09min。标记率可 达 98.0%。步骤 (4) 对应以下反应式 :通过以上步骤即可得到对比化合物 (99mTc-CpTTOPDA)。
         以化合物一为例做以下性能测试 结构表征 : 由于使用放射性元素标记后的化合物不能通过核磁共振及质谱实验判断化合物的结 构, 因此, 在表征使用放射性元素标记的化合物的结构时, 通常选择与该放射性元素同一主 族、 性质相似的元素代替放射性元素, 通过完全相同的合成方法得到产物, 对此不含放射性 元素的产物进行核磁共振及质谱实验, 通过得到的谱图判断产物结构, 即可以判断使用放 射性元素标记的化合物的结构。 以实施例 1 为例, 选择铼 Re 代替锝 -99m, 在合成步骤中得到产物前体 CpOPTAM 99m 之后, 用 NaReO4 代替 Na TcO4 参与反应, 即得到产物 Re-CpTTOPTAA, 如下反应式所示, 对 1 13 CpOPTAM 和 Re-CpTTOPTAA 进行核磁共振及质谱实验, 得到 CpOPTAM 的 HNMR, CNMR, MS 谱图 1 13 和 Re-CpTTOPTAA 的 HNMR, CNMR, MS 谱图, 如附图 1, 2, 3, 4, 5, 6 所示。
         通过上述谱图可以判断通过上述步骤得到的产物前体和产物分别为 CpOPTAM 和 Re-CpTTOPTAA, 即可以判断通过本发明中的合成方法得到的产物为 99mTc-CpTTOPTAA。
         将分离纯化后的标记化合物水溶液在电泳液为 0.02 M 的 PBS (pH = 7.4), Us = 150V, Is = 18mA, Ts = 4h 下, 新华一号纸为支持体, 测定各化合物的电荷性质。2 小时后取 出纸条, 将纸条正中间留 1cm 剪成三段, 并记录各段的放射性计数。
         电泳 2 h 后, 停留在原点, 说明化合物一为电中性。
         电中性的化合物能够成功进入心肌, 保证了心肌的摄取量。
         将标记化合物加入 SD 鼠血清在室温下放置 3 个小时, 标记率用 HPLC 分析。HPLC 99m 分析结果表明标记化合物一 Tc-CpTTOPTAA 在 SD 鼠血清里的标记率在 3 小时内无明显变 化, 说明标记化合物体内外稳定。
         对化合物二、 化合物三、 化合物四进行同样的性能测试, 所得结论相同。
         对化合物一和对比例做以下对比试验 在测量脂水分配系数时, 选择 pH7.4 的 PBS 溶液和正辛醇为有机溶剂, 采用多次取出有 机相重新与水相平衡的方法对有机相进行洗涤, 可洗掉少量的放射性杂质 (由于 0.1% 的放 射性杂质可使 logP 降低 1 个数量级) 。计算分配系数 P(即每克正辛醇内的放射性计数与 每克 PBS 中的放射性计数比值) 。 质量法计算该化合物的脂水分配系数 : logP=log[( 有机相计数 ×0.827× 水相质 量 )/ ( 水相计数 × 有机相质量 )]?;衔镆患岸员壤闹峙湎凳缦卤硭?:
         脂水分配系数越大, 亲脂性越强, 对比例的亲脂性大于化合物一的亲脂性, 因此相对于 对比例而言, 化合物一的肝摄取降低, 心肌摄取增加, 有利于心肌显像。
         小鼠体内代谢分析 将 1mCi 的化合物一 99mTc-CpTTOPTAA 和对比例 99mTc-CpTTOPDA 分别通过尾静脉注射到 雌性 SD 大鼠 (210g-250g) 体内, Ci 为放射性活度单位, 30 min 后将大鼠断头处死取出心 脏, 用生理盐水洗净, 置于硬质塑料管中, 加入 4 mL 体积比为 2:1:1 的 CHCl3、 CH3OH、 0.03 N NaOH 的混合溶液后匀浆, 涡旋混合 3 min, 在 4000 rpm 的转速下离心分离 3-5 min, 分别取 出上、 下层清液。残渣加入 4 mL 上述比例混合溶液后重复上述操作, 取出上、 下层清液与前 一次分别合并, 每个样品重复 3 次。分别测量水层 (上层) 、 有机层 (下层) 和残渣的计数, 水 99m 旋蒸浓缩待用。 在注射 Tc-CpTTOPTAA 层用 HCl 酸化 (PH=5-6) , 经过 0.2 μm 的滤膜过滤, 99m 和 Tc-CpTTOPDA 30min 时, 在匀浆 SD 大鼠心肌的放射性分布如下表 。心 脏 提 取 物 分 析 用 Alltech C-18 反 相 分 析 色 谱 柱 (4.6mm×150mm, 5μm)和 Flow-Count 放射性检测器检测分析过滤的水层 (用 HCl 酸化, PH=5-6) , 流动相为 20% 的水 99m 99m (A 相) 和 80% 的乙腈 (B 相) , 流速为 1mL/min。对 Tc-CpTTOPTAA 和 Tc-CpTTOPDA 进行相 同条件的色谱分析。
         水层提取物经过 HCl 酸化 (PH=5-6) 、 滤膜过滤和旋蒸浓缩后, 用 Alltech C-18 反 99m 99m 相分析色谱柱分析 Tc-CpTTOPTAA 并与 Tc-CpTTOPTAA 的 radio-HPLC 分析比较, 分别如 99m 图 7 SD 大鼠尾静脉注射 Tc-CpTTOPTAA 30 min 后的心肌匀浆提取物的 radio-HPLC 图和 图 7 中有两个较大的保留时间峰, 第一个峰为 图 8 99mTc-CpTTOPTAA 的 radio-HPLC 图所示, 3.95min 和第二个 7.57min 的峰相差 3.62 min, 与图 8 对照, 基本可以判断出第一个峰是代 99m 谢产物峰、 第二个峰为 Tc-CpTTOPTAA 峰。与图 8 相比, 在 30min 时心脏提取物的第二个 99m 99m 峰与 Tc-CpTTOPTAA 的保留时间基本一致, 但第二个峰 Tc-CpTTOPTAA 比较低, 而第一个 峰代谢产物峰明显高很多, 峰面积约占 99%, 说明此时心肌摄取比较低而代谢产物滞留比较 99m 多清除慢, 同时表明 Tc-CpTTOPTAA 在心肌里确实发生了代谢。
         用 radio-HPLC 对 99mTc-CpTTOPTAA 的心肌代谢产物进行分析, 如图 8 所示。用 99m 非放射性铼标记的前体 Re-CpTTOPTAA 代替放射性化合物 Tc-CpTTOPTAA, 通过尾静脉注 射到雌性体重为 210g-250g 的 SD 大鼠体内 30min 时后, 运用质谱对匀浆心脏提取物进行 分析, 如图 9 SD 大鼠尾静脉注射 Re-CpTTOPTAA 30 min 后的心肌匀浆提取物的质谱分析 99m 图所示。结果表明, Tc-CpTTOPTAA 在心肌里发生一次 alpha- 氧化生成少一个 α- 碳的
         99mTc-CpTTOPTCA并陷落在线粒体内, 达到延长 99mTc-CpTTOPTCA 在心肌里的滞留时间, 有利于 SPECT 扫描、 显 像。
         小鼠体内分布实验 所用小鼠为昆明雌性 SD 鼠 (18-20g), 由北医三院动物实验中心提供。 本实验分为五个 99m 时相, 每个时相用 5 只小鼠。由尾部静脉注射 0.1mL10μCi 的 Tc-CpTTOPTAA 的生理盐水 溶液, 分别在 1min, 5min, 15min。30min, 60min 断椎处死。分别取小鼠的血、 脑、 心、 肝、 脾、 肺、 肾、 肌、 骨各脏器称重, 并用阱型 γ 自动探测器测其放射性计数。计算不同时相各脏器 的每克组织百分注射剂量 %ID/g。 99m
         Tc-CpTTOPTAA 在小鼠体内分布实验的结果见下表 :所用小鼠为昆明雌性 SD 鼠 (18-20g), 由北医三院动物实验中心提供。 本实验分为五个 99m 时相, 每个时相用 5 只小鼠。由尾部静脉注射 0.1mL10μCi 的 Tc-CpTTOPDA 的生理盐水 溶液, 分别在 1min, 5min, 15min。30min, 60min 断椎处死。分别取小鼠的血、 脑、 心、 肝、 脾、 肺、 肾、 肌、 骨各脏器称重, 并用阱型 γ 自动探测器测其放射性计数。计算不同时相各脏器 的每克组织百分注射剂量 %ID/g。99mTc-CpTTOPDA 小鼠生物分布结果见下表 :化合物一 99mTc-CpTTOPTAA 和对比化合物 99mTc-CpTTOPDA 的结构相对比较接近, 化合 99m -1 99m 比 对 比 化 合 物 Tc-CpTTOPDA 物 一 Tc-CpTTOPTAA 初 始 心 肌 摄 取 为 9.39±1.1%IDg , -1 7.85±0.66 %IDg 略高 ; 两者的心肌摄取都呈逐渐下降趋势且在 5min 内表现为快速的 心肌清除 ; 两者均表现为快速血清除且速度趋势也比较接近, 但是在 5min 内化合物一29102311459 A CN 10231146099m说明书23/23 页Tc-CpTTOPTAA 在血液中的含量下降 5.39 倍, 而后者在血液中的含量只下降 2.65 倍, 由此 99m 可见化合物一 Tc-CpTTOPTAA 的血清除速度更快。两个化合物在心肌与血液中的摄取比 值前者高 (最高心 / 血为 5.7) 高于后者 (最高心 / 血为 3.53) , 故化合物一 99mTc-CpTTOPTAA 有更低的血本底。
         从肝对两个配合物的摄取情况来看, 对比化合物 99mTc-CpTTOPDA 的初始摄取是化 合物一 99mTc-CpTTOPTAA 的 2.6 倍。 在 15 min 时, 化合物一 99mTc-CpTTOPTAA 有最大摄取值而 对比化合物 99mTc-CpTTOPDA 在 30 min 时有最大摄取值, 两者的肝摄取都比较高而且呈递增 趋势, 心肝比值都比较低, 两者的心肝比值均呈现递减趋势。 由于化合物一 99mTc-CpTTOPTAA 比对比化合物 99mTc-CpTTOPDA 的结构多了一个与羰基相连的噻吩基团而降低了脂溶性, 因 99m 此化合物一 Tc-CpTTOPTAA 在肝脏中的摄取也就明显的低一些。
         小鼠注射 99mTc-CpTTOPTAA 1min 后, 心肌摄取值达到 9.39+1.1 %ID/g, 初始摄取值 较高, 心 / 血值为 2.1, 心 / 肝值为 0.91。血清除较快, 1min 为 4.47+0.61%ID/g ; 5min 后, 99m 为 0.83+0.07%ID/g。在正常小鼠体内的生物分布结果表明 Tc-CpTTOPTAA 具有较高的初 始心肌摄取和较快的心肌清除, 心 / 血值较高, 心 / 肝值相对于现有技术有了提高, 有利于 获得更高的靶 / 非靶比值, 靶 / 非靶比值放映的是药物在心与非心组织里的分布情况。
         显然, 上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例, 而并非对实施方式的限定。 对 于所属领域的普通技术人员来说, 在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或 变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或 变动仍处于本发明创造的?;し段е?。

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