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    重庆时时彩停机时间: 克鲁兹蛋白酶与其他半胱氨酸蛋白酶的抑制剂.pdf

    关 键 词:
    克鲁 蛋白酶 其他 半胱氨酸 抑制剂
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    摘要
    申请专利号:

    CN200610094085.X

    申请日:

    2002.01.17

    公开号:

    CN1900080A

    公开日:

    2007.01.24

    当前法律状态:

    撤回

    有效性:

    无权

    法律详情: 发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C07D 491/04公开日:20070124|||实质审查的生效|||公开
    IPC分类号: C07D491/04(2006.01); A61K31/407(2006.01); A61K31/4355(2006.01); A61P33/02(2006.01) 主分类号: C07D491/04
    申请人: 阿姆拉医疗有限公司;
    发明人: M·奎贝尔
    地址: 英国剑桥
    优先权: 2001.01.17 GB 0101179.0; 2001.03.13 US 60/275,359
    专利代理机构: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 代理人: 唐晓峰
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    法律状态
    申请(专利)号:

    CN200610094085.X

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2011.05.11|||2007.03.21|||2007.01.24

    法律状态类型:

    发明专利申请公布后的视为撤回|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    通式(II)化合物——其中R1、P1、P2、Q、Y、(X)o、(W)n、(V)m、Z和U是如说明书所定义的——是克鲁兹蛋白酶抑制剂和其他半胱氨酸蛋白酶抑制剂,可用作例如恰加斯氏病的治疗剂,或者用于验证治疗靶化合物。

    权利要求书

    1: 根据通式(II)的化合物: 其中: R 1 =C 0-7 -烷基(当C=0时,R 1 仅是氢)、C 3-6 -环烷基或Ar-C 0-7 -烷 基(当C=0时,R 1 仅是芳族部分Ar); Ar为芳族部分,其为5-或6-元单环或9-或10-元二环,其中芳环选 择性地被如下定义的R 19 取代; Z=O或S; P 1 =CR 5 R 6 ; P 2 =CR 7 R 8 ; Q=CR 9 R 10 或NR 11 ,其中R 9 、R 10 和R 11 选自C 0-7 -烷基; 每个R 5 、R 6 、R 7 和R 8 独立地选自C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基、Ar-C 0-7 - 烷基、O-C 0-7 -烷基、O-C 3-6 -环烷基、O-Ar-C 0-7 -烷基、S-C 0-7 -烷基、 S-C 3-6 -环烷基、S-Ar-C 0-7 -烷基、NH-C 0-7 -烷基、NH-C 3-6 -环烷基、 NH-Ar-C 0-7 -烷基、N(C 0-7 -烷基) 2 、N(C 3-6 -环烷基) 2 或N(Ar-C 0-7 -烷基) 2 ; Y=CR 12 R 13 -CO,其中R 12 、R 13 选自C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基或Ar-C 0-7 - 烷基; 在基团(X) o 中,X=CR 14 R 15 ,其中R 14 和R 15 独立地选自C 0-7 -烷基、 C 3-6 -环烷基和Ar-C 0-7 -烷基,o是零至三的数字; 在基团(W) n 中,W=O、S、C(O)、S(O)或S(O) 2 或NR 16 ,其中R 16 选自C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基和Ar-C 0-7 -烷基,n是零或一; 在基团(V) m 中,V=C(O)、C(S)、S(O)、S(O) 2 、S(O) 2 NH、OC(O)、 NHC(O)、NHS(O)、NHS(O) 2 、OC(O)NH、C(O)NH或CR 17 R 18 ,其 中R 17 和R 18 独立地选自C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基、Ar-C 0-7 -烷基,m是 零至三的数字,其条件是当m大于一时,(V) m 含有最多一个羰基或 磺?;?; U=5-至7-元单环或8-至11-元二环,选自: 其中R 19 是: C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基、Ar-C 0-7 -烷基、O-C 0-7 -烷基、O-C 3-6 -环烷 基、O-Ar-C 0-7 -烷基、S-C 0-7 -烷基、S-C 3-6 -环烷基、S-Ar-C 0-7 -烷基、 NH-C 0-7 -烷基、NH-C 3-6 -环烷基、NH-Ar-C 0-7 -烷基、N(C 0-7 -烷基) 2 、 N(C 3-6 -环烷基) 2 或N(Ar-C 0-7 -烷基) 2 ;或者当作为CHR 19 或CR 19 基团的一部分时,R 19 可以是卤素; A选自: CH 2 、CHR 19 、O、S和NR 20 ; 其中R 19 是如上所定义的,R 20 选自: C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基和Ar-C 0-7 -烷基; B、D和G独立地选自: CR 19 ,其中R 19 是如上所定义的,或N或N-氧化物(N→O); E选自: CH 2 、CHR 19 、O、S和NR 20 ,其中R 19 和R 20 是如上所定义的; J、L、M、R、T、T 2 、T 3 和T 4 独立地选自: CR 19 、N和N-氧化物(N→O),其中R 19 是如上所定义的; T 5 选自: CH或N; q是一至三的数字,由此定义5-、6-或7-元环; 及其盐、水合物、溶剂化物、配合物和前药。
    2: 如权利要求1所要求?;さ幕衔?,其中独立地或联合地: Z是O; P 1 和P 2 是CH 2 ;和 Q是CH 2 或NH; R 1 包含C 0-7 -烷基或Ar-C 0-7 -烷基; Y是CR 12 R 13 CO,其中R 12 、R 13 选自C 0-7 -烷基、C 3-6 -环烷基或 Ar-C 0-7 -烷基; 在基团(X) o 中,X为CR 14 R 15 ,R 14 和R 15 选自C 0-7 -烷基或Ar-C 0-7 - 烷基; 在基团(W) m 中,W为O、S、SO 2 、SO、C(O)或NR 16 ,其 中R 16 为C 0-4 -烷基;n为0或1; 在基团(V) m 中,V为C(O)、C(O)NH或CHR 18 ,其中 R 18 为C 0-4 -烷基;m为0或1; U包含选自权利要求1所列结构的5-或6-元饱和或不饱和杂环或 饱和或不饱和9-或10-元杂环。
    3: 如权利要求1或权利要求2所要求?;さ幕衔?,其中R 1 是 氢、C 1-4 -烷基或Ar-C 1-4 -烷基。
    4: 如权利要求1~3任一项所要求?;さ幕衔?,其中Y选自下 列部分之一: 其中R 19 、R 20 和Ar是如上所定义的。
    5: 如权利要求1至4任意一项所要求?;さ幕衔?,其中Y是 CHR 13 CO,其中R 13 是Ar-CH 2 -,其中该芳环是可选被R 19 基团取代 的苯基或单环杂环,其中R 19 如权利要求1所定义;R 13 是简单的支 链烷基或直链杂烷基链;或R 13 包含环己基甲基。
    6: 如权利要求1至5任意一项所要求?;さ幕衔?,其中Y选 自如下: 其中R 19 和Ar是如前面所定义的。
    7: 如权利要求1至6任意一项所要求?;さ幕衔?,其中(X) o 是下列部分之一: 其中R 19 和R 20 是如前面所定义的。
    8: 如权利要求1至7任意一项所要求?;さ幕衔?,其中在基 团(X) o 中:X是CR 14 R 15 ,R 14 是氢,R 15 是C 1 -C 4 烷基;o=0或1。
    9: 如权利要求1至8任意一项所要求?;さ幕衔?,其中在基 团(W) n 中,W是O、S、SO 2 、C(O)或NH;n是0或1。
    10: 如权利要求1至9任意一项所要求?;さ幕衔?,其中基团 (W) n 是NH。
    11: 如权利要求1至10任意一项所要求?;さ幕衔?,其中(V) m 与(W) m 的组合是下列之一:
    12: 如权利要求1至11任意一项所要求?;さ幕衔?,其中(X) o 、 (V) m 与(W) m 的组合是下列之一:
    13: 如权利要求1至12任意一项所要求?;さ幕衔?,其中U 包含下列之一: 其中R 19 是如前面所定义的。
    14: 如权利要求1至13任意一项所要求?;さ幕衔?,其中U 代表: 其中R 19 、D、E、G、J、L、M、R、T、T 2 、T 3 和T 4 是如前面所定 义的。
    15: 如权利要求1至14任意一项所要求?;さ幕衔?,其中U 代表: 其中R 19 、D、E、G、J、L、M、R和T是如前面所定义的。
    16: 如权利要求1至15任意一项所要求?;さ幕衔?,其中U代 表: 其中R 19 、D、E、G、J和L是如前面所定义的。
    17: 在疾病发生或发展过程中确定是否已知的或推定的半胱氨酸 蛋白酶起主要生物作用的方法,该方法包括: (a)评估如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔锾逋庥?孤立的已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶的结合,得到“效力”的量 度;和可选的一个或多个下列步骤: (b)评估如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔镉氚忻?切相关性同系蛋白酶和一般的常见蛋白酶(例如胰蛋白酶)的结合, 得到“选择性”的量度; (c)在如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔锏拇嬖谙?, 监测基于细胞的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记;和 (d)在如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔锏拇嬖?下,监测基于动物模型的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记。
    18: 如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔锏挠猛?, 用于在疾病发生或发展过程中确定是否已知的或推定的半胱氨酸蛋白 酶起主要生物作用。
    19: 权利要求1-16中任一项的化合物,其用在医药中。
    20: 如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔?,其用于 预防或治疗其中可以通过抑制半胱氨酸蛋白酶调节疾病病状的疾 病。
    21: 用于治疗恰加斯氏病的如权利要求1至16任意一项所要求 ?;さ幕衔?。
    22: 如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔镌谝┘林?备中的用途,该药剂用于预防或治疗其中可以通过抑制半胱氨酸蛋 白酶调节疾病病状的疾病。
    23: 如权利要求1至16任意一项所要求?;さ幕衔镌谝┘林?备中的用途,该药剂用于预防或治疗恰加斯氏病。
    24: 药物或兽用组合物,包含一种或多种如权利要求1至16任 意一项所要求?;さ幕衔锖鸵┭匣蚴抟缴峡山邮艿脑靥?。
    25: 如权利要求24所要求?;さ囊┪锘蚴抻米楹衔锏闹票阜椒?, 该方法包括例如通过混合,使活性化合物与载体缔合。

    说明书


    克鲁兹蛋白酶与其他半胱氨酸蛋白酶的抑制剂

        本发明涉及这样的化合物,它们是克鲁兹蛋白酶(cruzipain)的抑制剂,该酶是一种寄生虫克鲁兹锥虫的基因产物。具体而言,本发明提供这样的化合物,它们可用于治疗克鲁兹锥虫感染,还涉及这些化合物的用途和包含它们的药物组合物。进而,本发明涉及这样的化合物,它们是广泛半胱氨酸蛋白酶的抑制剂,还涉及这些化合物的用途和包含它们的药物组合物。这类化合物可用于治疗其中有半胱氨酸蛋白酶参与的疾病。

        锥虫家族寄生虫对人类和动物保健具有重大的、世界性影响(McKerrow,J.H.等,Ann.Rev.Microbiol.47,821-853,1993)。该家族的一种寄生虫克鲁兹锥虫是恰加斯氏病的病因,在拉丁美洲和南美洲每年感染两千多万人,在这些地区是心脏病的主要原因,每年导致超过45,000例死亡(疾病控制与预防中心网站)。另外,随着感染人口从乡村到城市的迁移和从中南美洲到北美洲的流动的增加,该感染经由输血和分娩传播。目前对克鲁兹锥虫感染的治疗选择是硝呋莫司和苄硝唑(NADH富马酸盐还原酶抑制剂,Turrens,JF等,Mol.Biochem.Parasitol.,82(1),125-9,1996),最多仅取得适度的成功,在感染的急性期达到~60%治愈率(参见Docampo,R.Curr.Pharm.Design,7,1157-1164,2001关于一般讨论),而在慢性期完全不用,在慢性期经常发生与心肌病有关的心衰(Kirchhoff,L.V.New?Engl.J.Med.,329,639-644,1993)。另外,这两种药物具有严重的毒副作用,在治疗期间需要密切的医疗监督,并且已经显示诱发恰加斯氏病婴儿的染色体损伤(Gorla,N.B.等,Mutat.Res.,206,217-220,1988)。因此,医学上迫切需要新的有效药物,用于克鲁兹锥虫感染的化学治疗。

        传统上,对传染病的形成或传播起决定性作用的酶的鉴别已经成为成功的药物开发的手段,例如抗病毒剂(例如HIV天冬氨?;鞍酌敢种萍?和抗菌剂(例如β-内酰胺抗生素)。为了寻找寄生虫感染中相似的唯一致命弱点,已经检查了大量的酶(例如寄生虫二氢叶酸还原酶,参见Chowdhury,S.F.等,J.Med.Chem.,42(21),4300-4312,1999;trypanothione还原酶,参见Li,Z.等,Bioorg.Med.Chem.Lett.,11(2),251-254,2001;寄生虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶,参见Aranov,A.M.等,J.Med.Chem.,41(24),4790-4799,1998)。特别有希望的研究领域已经鉴别了被寄生虫编码的半胱氨酸蛋白酶的作用,它在寄生虫的生命周期期间起到关键作用(McKerrow,J.H.等,Bioorg.Med.Chem.,7,639-644,1999)。蛋白酶组成一大组生物分子,它们迄今构成在若干基因组测序程序的分析之后所鉴别的所有基因产物的大约2%(例如参见Southan,C.J.Pept.Sci.6,453-458,2000)。蛋白酶已经进化为参与大范围的生物过程,通过自然界见到的无数蛋白质内肽酰胺键的裂解来介导它们的作用。这种水解作用是这样进行的,首先识别、然后结合由蛋白质所呈现的特定三维电子表面,它排列该键,使其恰好在蛋白酶催化位点内裂解。然后,经由蛋白酶本身的氨基酸侧链,或者通过与蛋白酶结合并被其活化的水分子的作用,通过所要裂解的酰胺键的亲核攻击,开始催化水解。其中攻击性亲核部位是Cys残基的硫醇侧链的蛋白酶已知为半胱氨酸蛋白酶?!鞍腚装彼岬鞍酌浮钡囊话惴掷嗪欣醋源硬《?、细菌、原生动物、植物和真菌到哺乳动物的广泛生物的很多成员。

        克鲁兹锥虫感染的生物学研究已经突出了大量特异性酶,它们对寄生虫生命周期的进展起决定性作用。一种这样的酶是克鲁兹蛋白酶,它是一种组织蛋白酶L-样半胱氨酸蛋白酶,对恰加斯氏病的治疗具有明确的治疗靶((a)Cazzulo,J.J.等,Curr.Pharm.Des.,7,1143-1156,2001;(b)Caffrey,C.R.等,Curr.Drug?Targets,1,155-162,2000)。尽管克鲁兹蛋白酶在寄生虫生命周期内的正确生物学作用仍然是不清楚的,不过短膜虫期发育阶段中升高的克鲁兹蛋白酶信使RNA水平提示了对溶酶体样囊泡中宿主分子营养性降解的作用(Engel,J.C.等,J.Cell.Sci.,111,597-606,1998)??寺匙鹊鞍酌缸魑捎弥瘟瓢幸丫玫窖橹?,不过复杂性水平增加了。向克鲁兹锥虫感染的哺乳动物细胞培养物加入通用的半胱氨酸蛋白酶抑制剂Z-Phe-Ala-FMK,阻滞了寄生虫的复制和分化,从而终止了寄生虫的生命周期(Harth,G.等,Mol.Biochem.Parasitol.58,17-24,1993)。乙烯基砜类抑制剂对克鲁兹锥虫感染的鼠动物模型给药不仅减少小鼠的致死性感染,而且产生完全的恢复(Engel,J.C.等,J.Exp.Med.,188(4),725-734,1998)。大量其他体内研究已经证实用半胱氨酸蛋白酶抑制剂治疗能够停止或治愈可供替代的寄生虫感染,例如Leishmania?major(Selzer,P.M.等,Proc.Nat’l.Acad.Sci.U.S.A.,96,11015-11022,1999)、Schistosoma?mansoni和Plasmodium?falciparium(Olson,J.E.等,Bioorg.Med.Chem.,7,633-638,1999)。

        针对克鲁兹蛋白酶的设计已经描述了多种合成方法。不过,尽管为克鲁兹锥虫感染的治疗提供生物学“原理的证据”,目前的抑制剂表现大量可能妨碍其临床开发的生物化学与物理学性质(例如参见(a)Brinen,L.S.等,Structure,8,831-840,2000,拟肽乙烯基砜,可能的哺乳动物细胞毒性(参见McKerrow,J.H.和Engel,J.未公布的结果,引用在Scheidt,K.A.等,Bioorg.Med.Chem.,6,2477-2494,1998中);(b)Du,X.等,Chem.Biol.,7,733-742,2000,芳基脲,一般具有较低的μM活性和较高的ClogP值,因而水溶性差,口服生物利用度也许较低;(c)Roush,W.R.等,Tetrahedron,56,9747-9762,2000,肽基环氧琥珀酸酯,不可逆的抑制剂,对家养哺乳动物蛋白酶具有有力的活性,例如组织蛋白酶B;(d)Li,R.等,Bioorg.Med.Chem.4(9),1421-1427,1996,双芳基酰肼和查耳酮,多羟基化芳族化合物;(e)US?6143931,WO?9846559,非肽类α-酮基酰胺)。在迄今很多不同的酶抑制方法中,只有克鲁兹蛋白酶抑制剂已经证实有效治愈克鲁兹锥虫感染的动物模型。因此,医学上明确需要针对适合人用的临床候选者开展这些“原理的证据”发现,以发现更有效的克鲁兹蛋白酶抑制剂,它具有可取的效力、选择性、低毒性和优化的药动学参数的组合。

        克鲁兹蛋白酶和事实上很多其他决定性寄生虫蛋白酶都属于木瓜蛋白酶样CA?C1家族,具有结构上密切的哺乳动物同系物?;诘鞍酌冈蛄心诖呋圆谢娜峁够虮J嘏帕械南嗨菩?,将半胱氨酸蛋白酶分成若干“分支”。另外,将“分支”进一步分成“家族”,其中在比较构成负责蛋白酶活性的部分的氨基酸序列部分时,每种蛋白酶与其他成员共享统计学上显著的关系(参见Barrett,A.J.等,“Handbook?of?Proteolytic?Enzymes”,Eds.Barrett,A.J.,Rawlings,N.D.和Woessner,J.F.Publ.Academic?Press,1998关于详尽的讨论)。迄今,半胱氨酸蛋白酶已被分为五个分支,CA、CB、CC、CD和CE(Barrett,A.J.等,1998)。来自热带番木瓜果实的蛋白酶“木瓜蛋白酶”构成CA分支的基础,它目前在各种序列数据库中含有80多种不同和完整的实体,按照目前的基因组测序努力,预期还会有更多。CA分支/C1家族的蛋白酶已经涉及大量疾病过程,例如人蛋白酶,例如组织蛋白酶K(骨质疏松)、组织蛋白酶S(自体免疫障碍)、组织蛋白酶L(转移瘤),或寄生虫蛋白酶,例如镰状蛋白酶(falcipain)(疟疾寄生虫镰状疟原虫)、克鲁兹蛋白酶(克鲁兹锥虫感染)。最近,还有一种细菌蛋白酶葡菌蛋白酶(金黄色葡萄球菌感染)也被暂时归入CA分支。X-射线结晶结构可用于一些上述蛋白酶与一些抑制剂的复合体,例如木瓜蛋白酶(PDB实体,1pad,1pe6,1pip,1pop,4pad,5pad,6pad,1ppp,1the,1csb,1huc)、组织蛋白酶K(1au0,1au2,1au3,1au4,1atk,1mem,1bgo,1ayw,1ayu)、组织蛋白酶L(1cs8)、组织蛋白酶S(目前on-hold,但是公布在McGrath,M.E.等,Protein?Science,7,1294-1302,1998中)、克鲁蛋白酶(来自克鲁兹蛋白酶的重组体,参见Eakin,A.E.等,268(9),6115-6118,1993)(1ewp,1aim,2aim,1F29,1F2A,1F2B,1F2C)、葡菌蛋白酶(1cv8)。每种结构呈现相似的总体活性位点拓扑学,这可由它们的“分支”和“家族”分类所预见到,这类结构相似性例示了在发现适合于人用的选择性克鲁兹蛋白酶抑制剂中所涉及的难度的一个方面。不过,每种CA?C1蛋白酶的活性位点沟的深度与复杂形状上的微妙差异是明显的,这可以用于选择性抑制剂设计。另外,很多目前基于底物的CA?C1家族蛋白酶抑制剂复合体在抑制剂与蛋白酶骨架之间显示一系列保守的氢键,这显著有助于抑制剂的效力。首先在蛋白酶Gly66(C=O)/抑制剂N-H与蛋白酶Gly66(NH)/抑制剂(C=O)之间观察到双齿氢键,其中抑制剂(C=O)和(NH)是由构成抑制剂内S2亚位点结合元件的氨基酸残基NHCHRCO所提供的(参见Berger,A.和Schecter,I.Philos.Trans.R.Soc.Lond.[Biol.],257,249-264,1970关于蛋白酶结合位点命名法的说明)。在天冬酰胺或天冬氨酸的蛋白酶主链(C=O)(158至163,残基编号在蛋白酶之间变化)与抑制剂(N-H)之间还经常观察到进一步的氢键,其中抑制剂(N-H)是由抑制剂内S1亚位点结合元件所提供的。因而,在现有技术基于底物的CA?C1蛋白酶抑制剂中普遍观察到基序X-NHCHRCO-NH-Y。

        现有技术中,人用半胱氨酸蛋白酶抑制剂的开发最近已经成为非?;钤镜牧煊???悸堑紺A?C1家族成员,已经特别强调人组织蛋白酶抑制剂的开发,主要是组织蛋白酶K(骨质疏松)、组织蛋白酶S(自体免疫障碍)和组织蛋白酶L(转移瘤),其中使用肽与拟肽腈类(例如参见WO-A-0109910,WO-A-0051998,WO-A-0119816,WO-A-9924460,WO-A-0049008,WO-A-0048992,WO-A-0049007,WO-A-0130772,WO-A-0055125,WO-A-0055126,WO-A-0119808,WO-A-0149288,WO-A-0147886)、线性与环状肽与拟肽酮类(Veber,D.F.和Thompson,S.K.,Curr.Opin.Drug?Discovery?Dev.,3(4),362-369,2000,WO-A-0170232,WO-A-0178734,WO-A-0009653,WO-A-0069855,WO-A-0029408,WO-A-0134153至WO-A-0134160,WO-A-0029408,WO-A-9964399,WO-A-9805336,WO-A-9850533)、酮基杂环类(WO-A-0055144,WO-A-0055124)和单环内酰胺类(WO-A-0059881,WO-A-9948911,WO-A-0109169)。现有技术描述了有力的体外抑制剂,但是也突出了开发人用治疗剂中的很多困难。例如,WO-A-9850533和WO-A-0029408描述了这样的化合物,它们可以被称为环状酮类,是半胱氨酸蛋白酶的抑制剂,特别优先针对木瓜蛋白酶家族蛋白酶,作为最优选的实施方式是组织蛋白酶K。WO-A-9850533描述了这样的化合物,它们随后在文献中被称为有力的组织蛋白酶K抑制剂,具有良好的口服生物利用度(Witherington,J.,“Tetrahydrofurans?as?SelectiveCathepsin?K?Inhibitors”,RSC?meeting,Burlington?House,London,1999)。WO-A-9850533的化合物据报道通过在四氢呋喃羰基与活性位点催化性半胱氨酸残基之间生成可逆的共价键,与组织蛋白酶K结合(Witherington,J.,1999)。另外,在WO-A-9953039中描述了相同的环状酮化合物作为与寄生虫疾病有关的半胱氨酸蛋白酶的抑制剂的广泛说明的一部分,特别优选通过抑制镰状蛋白酶治疗疟疾。不过,随后的文献描述了WO-A-9850533的环状酮化合物不适合于进一步的开发或充分的药动学评价,这是由于抑制剂的物理化学性质,即α-氨基酮手性中心的手性稳定性差(Marquis,R.W.等,J.Med.Chem.,44(5),725-736,2001)。WO-A-0069855描述了这样的化合物,它们也可以被称为环状酮类,特别优先抑制组织蛋白酶S。WO-A-0069855的化合物被认为是WO-A-9850533的化合物的进步,这是由于环状酮环系上β-取代基的存在为环状酮环系的α-碳提供了手性稳定性。不过,WO-A-0069855的化合物和事实上WO-A-9850533的化合物都需要潜在的与氢键合的基序X-NHCHRCO-NH-Y的存在,后者在现有技术基于底物的CA?C1蛋白酶抑制剂中被普遍观察到。

        现已发现,某些由通式(I)和(II)定义的化合物是有力的选择性克鲁兹蛋白酶蛋白酶抑制剂,它们可用于治疗克鲁兹锥虫感染。其他由通式(I)和(II)定义的化合物是广泛的CA?C1半胱氨酸蛋白酶抑制剂,会用于治疗由半胱氨酸蛋白酶导致的疾病。通式(I)和(II)所述化合物不含X-NHCHRCO-NH-Y基序,后者在现有技术基于底物的CA?C1蛋白酶抑制剂中被普遍观察到,而惊人的是由通式(I)和(II)定义的化合物保留良好的效力。本发明提供由通式(I)和(II)定义的取代的四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮二环化合物。

        因此,本发明的第一方面提供根据通式(I)或通式(II)的化合物:

        其中:

        R1=C0-7-烷基(当C=0时,R1仅是氢)、C3-6-环烷基或Ar-C0-7-烷基(当C=0时,R1仅是芳族部分Ar);

        Z=O、S、CR2R3或NR4,其中R4选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基或Ar-C0-7-烷基;

        P1=CR5R6,

        P2=CR7R8,

        Q=CR9R10或NR11,其中R11选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基或Ar-C0-7-烷基;每个R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10独立地选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基、Ar-C0-7-烷基、O-C0-7-烷基、O-C3-6-环烷基、O-Ar-C0-7烷基、S-C0-7-烷基、S-C3-6-环烷基、S-Ar-C0-7-烷基、NH-C0-7-烷基、NH-C3-6-环烷基、NH-Ar-C0-7-烷基、N(C0-7-烷基)2、N(C3-6-环烷基)2或N(Ar-C0-7-烷基)2;Y=CR12R13-CO,其中R12、R13选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基或Ar-C0-7-烷基;

        (X)o=CR14R15,其中R14和R15独立地选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基和Ar-C0-7-烷基,o是零至三的数字;

        (W)n=O、S、C(O)、S(O)或S(O)2或NR16,其中R16选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基和Ar-C0-7-烷基,n是零或一;

        (V)m=C(O)、C(S)、S(O)、S(O)2、S(O)2NH、OC(O)、NHC(O)、NHS(O)、NHS(O)2、OC(O)NH、C(O)NH或CR17R18,其中R17和R18独立地选自C0-7-烷基、C3-6-环烷基、Ar-C0-7-烷基,m是零至三的数字,其条件是当m大于一时,(V)m含有最多一个羰基或磺?;?;

        U=稳定的5至7元单环或稳定的8至11元二环,它是饱和的或不饱和的,包括零至四个杂原子(如下所示):

        其中R19是:

        C0-7-烷基、C3-6-环烷基、Ar-C0-7-烷基、O-C0-7-烷基、O-C3-6-环烷基、O-Ar-C0-7-烷基、S-C0-7-烷基、S-C3-6-环烷基、S-Ar-C0-7-烷基、NH-C0-7-烷基、NH-C3-6-环烷基、NH-Ar-C0-7-烷基、N(C0-7-烷基)2、N(C3-6-环烷基)2或N(Ar-C0-7-烷基)2;或者当作为CHR19或CR19基团的一部分时,R19可以是卤素;

        A选自:

        CH2、CHR19、O、S和NR20;

        其中R19是如上所定义的,R20选自:

        C0-7-烷基、C3-6环烷基和Ar-C0-7-烷基;

        B、D和G独立地选自:

        CR19,其中R19是如上所定义的,或N;

        E选自:

        CH2、CHR19、O、S和NR20,其中R19和R20是如上所定义的;J、L、M、R、T、T2、T3和T4独立地选自:

        CR19和N,其中R19是如上所定义的;

        T5选自:

        CH或N;

        q是一至三的数字,由此定义5-、6-或7-元环。

        B、D、G、J、L、M、R、T、T2、T3和T4可以另外代表N-氧化物(N→O)。

        本发明包括本发明化合物的所有盐、水合物、溶剂化物、配合物和前体药物。术语“化合物”打算包括所有这类盐、水合物、溶剂化物、配合物和前体药物,除非上下文给出相反含义。

        通式(I)和(II)化合物的适当的药学上与兽医上可接受的盐包括有机酸、尤其是羧酸的盐,包括但不限于乙酸盐、三氟乙酸盐、乳酸盐、葡萄糖酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、泛酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、丁酸盐、二葡糖酸盐、环戊酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、草酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、烟酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、酒石酸盐、乳糖酸盐、新戊酸盐、樟脑酸盐、十一烷酸盐和琥珀酸盐;有机磺酸盐,例如甲磺酸盐、乙磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、樟脑磺酸盐、2-萘磺酸盐、苯磺酸盐、对氯苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐;无机酸盐,例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、半硫酸盐、硫氰酸盐、过硫酸盐、磷酸盐和磺酸盐。不是药学上或兽医上可接受的盐作为中间体也可以是有利用价值的。

        前体药物是任意共价键合的化合物,它们体内释放根据通式(I)或(II)的活性母体药物。前体药物例如可以构成环外酮官能度的缩酮或半缩酮衍生物,这种官能度存在于四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮骨架中。如果在本发明化合物中存在手性中心或另一种形式的异构中心,本文打算涵盖所有这类异构体形式,包括对映体和非对映体。含有手性中心的本发明化合物可以用作外消旋混合物、对映体富集的混合物,或者可以利用熟知的技术分离外消旋混合物,并且可以单独使用个别的对映体。

        本文所用的“卤素”意味着包括F、Cl、Br、I;

        本文所用的“杂原子”意味着包括O、S和N;

        本文所用的“C0-7-烷基”意味着包括稳定的直链和支链脂族碳链,含有零(也就是简单的氢)至七个碳原子,例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、庚基及其任意简单的异构体。另外,任意C0-7-烷基可以可选地在任意位置被一个、两个或三个卤原子(如上所定义)取代,例如得到三氟甲基取代基。进而,C0-7-烷基可以含有一个或多个杂原子(如上所定义),例如得到醚、硫醚、砜、磺酰胺、取代的胺、脒、胍、羧酸、酰胺。如果杂原子位于链末端,那么它适当地被一个或两个氢原子取代。当C0-7-烷基含有最少一个碳原子时,仅存在杂原子或卤素。

        本文所用的“C3-6-环烷基”意味着包括“C0-7-烷基”的任意变化,它另外含有碳环,例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。碳环可以可选地被一个或多个卤素(如上所定义)或杂原子(如上所定义)取代,例如得到四氢呋喃、吡咯烷、哌啶、哌嗪或吗啉取代基。

        本文所用的“Ar-C0-7-烷基”意味着包括C0-7-烷基的任意变化,它另外含有芳环部分“Ar”。芳环部分Ar可以是稳定的5或6元单环或稳定的9或10元二环,它是不饱和的,如前面关于通式(I)和(II)中的U所定义的。芳环部分Ar可以被R19(如前面关于通式(I)和(II)中的U所定义的)取代。当取代基Ar-C0-7-烷基中的C=0时,取代基仅是芳环部分Ar。

        其他含有烷基和环烷基等术语的表达方式也打算按照上述定义加以解释。例如,“C1-4烷基”与C0-7-烷基相同,但是它含有一至四个碳原子。

        如果存在不同的结构异构体和/或一个或多个手性中心,那么打算涵盖所有异构形式。对映体是以它们的手性中心的绝对构型为特征的,被描述为R-与S-顺序规则。这类约定是本领域熟知的(例如参见“Advanced?Organic?Chemistry”,3rd?edition,ed.March,J.,JohnWiley?and?Sons,New?York,1985)。

        优选的通式(I)和(II)化合物包括但不限于这些,其中独立地或联合地:

        Z是O、S、NH或CH2;

        P1和P2是CH2;和

        Q是CH2或NH。

        优选的通式(I)和(II)化合物还包括但不限于这些,其中独立地或联合地:

        Z是NR4,其中R4是Ar-C1-4-烷基或取代的羰基或磺?;?;

        P1和P2是CH2;和

        Q是CH2或NH。

        因而,优选化合物的实例包括含有二环部分的那些,该二环部分选自四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮,如下所示。

        通式(I)和(II)化合物中,优选的是R1包含C0-7-烷基或Ar-C0-7-烷基。因而,例如,优选的R1部分包括氢、或直链或支链烷基链、或直链或支链杂烷基链、或可选被取代的芳基烷基链、或可选被取代的芳基杂烷基链。

        特别优选的是R1是氢或C1-4烷基或Ar-C1-4烷基,这类R1取代基的实例包括但不限于:

        其中R19是如上所定义的。

        优选的通式(I)和(II)化合物中,Y是CHR13CO,其中R13选自C0-7-烷基或Ar-C0-7-烷基,例如氢、直链或支链烷基链、直链或支链杂烷基链、可选被取代的芳基烷基链或可选被取代的芳基杂烷基链。另外,在优选的通式(I)和(II)化合物中,R13选自C3-6-环烷基,例如环己基甲基。

        优选的Y取代基的实例包括如下:

        其中R19、R20和Ar是如上所定义的。

        更优选的R13基团包括C1-4-烷基,它可以被OH、NR20R20、COOR20或CONR20取代,或者环烷基甲基或Ar-C1-4-烷基,其中该芳基可以被R19取代;其中每个R19和R20独立地是如上所定义的。

        进而更优选的R13基团包含Ar-CH2-,其中该芳环是可选被取代的苯基或单环杂环。另外,进而更优选的R13基团包含简单的支链烷基,例如异丁基,或直链杂烷基链,例如苄硫基甲基或苄磺?;谆?。此外,进而更优选的R13基团包含环己基甲基。进而更优选的Y取代基的实例包含如下:

        其中R19和Ar是如前面所定义的。

        优选的是在基团(X)o中,每个R14和R15选自C0-7-烷基或Ar-C0-7-烷基,例如氢、直链或支链烷基链、直链或支链杂烷基链、可选被取代的芳基烷基链或可选被取代的芳基杂烷基链。

        更优选的(X)o基团包含R14,选自氢;R15是C1-4-烷基,它可以被OH、NR20R20、COOR20或CONR20取代,或者Ar-C1-4-烷基,其中该芳基可以被R19取代;其中每个R19和R20独立地是如上所定义的。

        优选的(X)o基团的实例包括如下:

        其中R19和R20是如前面所定义的。

        进而更优选的通式(I)和(II)化合物包含(X)o基团,它们是简单的烷基,例如亚甲基,其中o=0或1。

        基团(W)n中,W优选为O、S、SO2、S(O)、C(O)或NR16,其中R16是C0-4-烷基;n是0或1。

        更优选的通式(I)和(II)化合物包含被定义为O、S、SO2、C(O)和NH的(W)n基团,其中n=0或1。

        进而更优选的通式(I)和(II)化合物包含被定义为NH的(W)n基团,其中n=1。

        基团(V)m中,V优选为C(O)、C(O)NH或CHR18,其中R18是C0-4烷基;m是0或1。

        优选的由通式(I)和(II)所涵盖的V与W取代基的组合包括但不限于:

        另外,优选的由通式(I)和(II)所涵盖的V与W取代基的组合包括但不限于:

        更优选地,由通式(I)和(II)所涵盖的V、W与X取代基的组合包含但不限于:

        优选的通式(I)和(II)化合物中,U包含可选被取代的5-或6-元饱和或不饱和的杂环或Ar基团或者可选被取代的饱和或不饱和的9-或10-元杂环或Ar基团。这类优选的U环的实例包括如下:

        以及如下:

        其中R19是如前面所定义的。

        更优选的通式(I)和(II)化合物含有U基团,它在芳基Ar的对位包含庞大的烷基或芳基。而且,更优选的化合物含有间位或对位联芳Ar-Ar,其中Ar是如前面所定义的。另外,更优选的化合物含有6,6或6,5或5,6稠合的芳环。更优选的U基团的实例是:

        其中R19、D、E、G、J、L、M、R、T、T2、T3和T4是如前面所定义的。

        进而更优选的、特别用于抑制克鲁兹蛋白酶的通式(I)和(II)化合物含有这样一种U基团,它包含6-元Ar环,其中在对位含有庞大的烷基或芳基,其中Ar是如前面所定义的:

        其中R19、D、E、G、J、L、M、R和T是如前面所定义的。

        进而更优选的通式(I)和(II)化合物含有U基团,它包含但不限于如下:

        其中R19、D、E、G、J和L是如前面所定义的。

        本文使用肽与化学领域常用的缩合和符号来描述本发明的化合物,遵照由IUPAC-IUB生物化学命名联合委员会提供的一般性指导,如Eur.J.Biochem.,158,9-,1984。式(I)和(II)化合物和用于制备它们的中间体和原料是按照IUPAC命名规则命名的,其中特征基团的引用优先级低于主要基团。式(I)化合物的一个实例是化合物(1),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是亚甲基,Z是氧,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aS,6aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        式(I)化合物的第二个实例是化合物(2),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是亚甲基,Z是硫,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮

        式(I)化合物的第三个实例是化合物(3),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是亚甲基,Z是亚甲基,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aS)1-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮

        式(I)化合物的第四个实例是化合物(4),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是亚甲基,Z是NH,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aS,6aR)1-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮

        式I)化合物的第五个实例是化合物(5),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是NH,Z是氧,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aS)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮

        式(I)化合物的第六个实例是化合物(6),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是NH,Z是硫,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮

        式(I)化合物的第七个实例是化合物(7),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是NH,Z是亚甲基,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aS)1-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢环戊二烯并吡唑-6-酮

        式(I)化合物的第八个实例是化合物(8),其中R1是H,P1是亚甲基,Q是NH,Z是NH,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,6aS)1-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮

        式(II)化合物的一个实例是化合物(9),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是亚甲基,Z是氧,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aS,7aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        式(II)化合物的第二个实例是化合物(10),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是亚甲基,Z是硫,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aR,7aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮

        式(II)化合物的第三个实例是化合物(11),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是亚甲基,Z是亚甲基,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (4aS,7aS)1-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮

        式(II)化合物的第四个实例是化合物(12),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是亚甲基,Z是NH,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (3aS,7aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮

        式(II)化合物的第五个实例是化合物(13),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是NH,Z是氧,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (4aR,7aS)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮

        式(II)化合物的第六个实例是化合物(14),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是NH,Z是硫,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (4aR,7aR)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮

        式(II)化合物的第七个实例是化合物(15),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是NH,Z是亚甲基,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (4aR,7aS)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮

        式(II)化合物的第八个实例是化合物(16),其中R1是H,P1是亚甲基,P2是亚甲基,Q是NH,Z是NH,Y是4-甲基戊基,(X)0是零,(W)n是氧,(V)m是亚甲基,U是苯基,因而被命名为:

        (4aR,7aS)4-(2S-苄氧基-4-甲基戊?;?八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮

        本发明的化合物包括但不限于下列实例,它们是通式(I)的(3aS,6aR)异构体,其中Z=O,R1=H,还包括为Z和R1的完整定义所包括的等价类似物:

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-异丙基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        萘-1-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        联苯-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        4-咪唑-1-基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-[1,2,3]噻二唑-4-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-味唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-4-基甲基乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-吡啶-3-基甲基乙基]酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-bJ吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(3,4-二氯苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-噻吩-2-基甲基乙基]酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-氨基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-[2-(4-叔丁基-苄硫基)-4-甲基-戊?;鵠-四氢呋喃并[3,2-b]吡咯3-酮

        4-[2-(4-叔丁基-苄硫基)-3-(4-羟基-苯基)-丙?;鵠-四氢-呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        2-异丁基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-4-(3-苯基-吡咯-1-基)-丁烷-1,4-二酮

        2-异丁基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-4-(3-苯基-吡咯烷-1-基)丁烷-1,4-二酮

        2-(4-羟基苄基)-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-4-(3-苯基-吡咯-1-基)-丁烷-1,4-二酮

        2-(4-羟基苄基)-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-4-(3-苯基-吡咯烷-1-基)-丁烷-1,4-二酮

        4-(1,3-二氢-异吲哚-2-基)-2-异丁基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)丁烷-1,4-二酮

        4-(1,3-二氢-异吲哚-2-基)-2-(4-羟基苄基)-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-丁烷-1,4-二酮

        4-(3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-2-异丁基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-丁烷-1,4-二酮

        4-(3,4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-2-(4-羟基苄基)-1-(3-氧代-六氢-呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-丁烷-1,4-二酮

        本发明的其他化合物包括但不限于下列实例,它们是通式(II)的(3aS,7aR)或(3aR,7aS)异构体,其中Z=O,R1=H,还包括为Z和R1的完整定义所包括的等价类似物:

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-异丙基苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-咪唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b吡啶-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-异丙基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        萘-1-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        联苯-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        4-咪唑-1-基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-[1,2,3]噻二唑-4-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        本发明的其他化合物包括但不限于下列实例,它们是通式(I)的(3aS,6aR)异构体,其中Z=O,R1=H,还包括为Z和R1的完整定义所包括的等价类似物:

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-异丙基-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        4-咪唑-1-基-N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-[1,2,3]噻二唑-4-基苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-环丙基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺4-叔丁基-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        4-二甲氨基-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-异丙基-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-二氟甲氧基-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-三氟甲基苯甲酰胺

        4-溴-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        3-溴-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        萘-1-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        喹啉-6-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并[b]噻吩-3-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        苯并噻唑-5-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        4-咪唑-1-基-N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-[1,2,3]噻二唑-4-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-吡唑-1-基苯甲酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        N-[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-6-苯基烟酰胺

        2-苯基噻唑-4-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        5-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        5-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        4-苯基噻吩-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        4-吡啶-3-基噻吩-2-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-噻吩-2-基噻唑-4-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        2-甲基-5-(吡咯烷-1-磺?;?呋喃-3-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        3-苯基吡咯-1-羧酸[1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        4-甲基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        4-甲氧基-N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-吗啉-4-基苯甲酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-甲氧基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-甲氧基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-甲氧基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        4-叔丁基-N-[1-(4-羟基甲基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-2-羧酸[1-(4-羟基甲基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        联苯-4-羧酸[1-(4-羟基甲基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基-3-苯基丙酰胺

        呋喃-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-2-苯基乙酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯基丙酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-2-苯基乙酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        4-(2-苄氧基-3-环己基-丙?;?四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[2-(4-叔丁基苄氧基)-4-甲基-戊?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[2-(萘-1-基甲氧基)-3-苯基-丙?;鵠-四氢-呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲硫基)丙?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-3-基甲硫基)丙?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲磺?;?丙?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-3-基甲磺?;?丙?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        吗啉-4-羧酸1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢-呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-乙基酯

        吗啉-4-羧酸3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)-丁基酯

        吗啉-4-羧酸3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)-丁基酯

        2-环己基甲基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)丁烷-1,4-二酮

        2-异丁基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-丁烷-1,4-二酮

        2-(2,2-二甲基-丙基)-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)-丁烷-1,4-二酮

        4-(2-联苯-3-基-4-甲基戊?;?四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        本发明的其他化合物包括但不限于下列实例,它们是通式(II)的(3aS,7aR)或(3aR,7aS)异构体,其中Z=O,R1=H,还包括为Z和R1的完整定义所包括的等价类似物:

        呋喃-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        N-[1-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        呋喃-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-2-苯基乙酰胺

        N-[3-甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-3-苯基丙酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        N-[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-2-苯基乙酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        N-[3,3-二甲基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        N-[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        N-[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[1-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        呋喃-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        呋喃-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        噻吩-3-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]-2-苯基乙酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]-3-苯基丙酰胺

        苯并[b]噻吩-2-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        N-[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]苯甲酰胺

        萘-1-羧酸[2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)-1-(苯基甲磺?;谆?乙基]酰胺

        吗啉-4-羧酸1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基酯

        4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲硫基)丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲磺?;?丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-3-基甲硫基)丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        4-[3-环己基-2-(呋喃-3-基甲磺?;?丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        2-环己基甲基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)丁烷-1,4-二酮

        考虑到所有上述实施例,还打算包括封端基团的氧化类似物,这些基团含有容易被氧化的氮,得到N-氧化物,或者含有容易被氧化的硫,得到砜。下列结构是示例:

        对有机化学领域技术人员而言,通式(I)和(II)化合物可以容易地利用大量化学策略加以合成,在溶液中或者在固相上进行(参见Atherton,E.和Sheppard,R.C.“Solid?Phase?Peptide?Synthesis:A?Practical?Approach”,Oxford?University?Press,Oxford,U.K.1989关于固相合成原理的一般性评述)。固相合成策略的诱人之处在于通过既定的平行合成方法,它能够生成数以千计的类似物,通常为5-100mg规模(例如参见(a)Bastos,M.;Maeji,N.J.;Abeles,R.H.Proc.Natl.Acad.Sci.USA,92,6738-6742,1995)。

        因此,通式(I)和(II)化合物的一种合成策略包含:

        (a)在溶液中制备被适当官能化和?;さ亩吠辜?。

        (b)通过连接剂连接构件(a)与固相,该连接剂对合成条件是稳定的,但是在合成结束时容易裂解(参见James,I.W.,Tetrahedron,55(Report?N0?489),4855-4946,1999关于用于固相合成的“连接剂”功能实例)。

        (c)固相有机化学(参见Brown,R.D.J.Chem.Soc.,PerkinTrans.1,19,3293-3320,1998),以构建分子的其余部分。

        (d)化合物从固相上裂解到溶液中。

        (e)裂解操作和化合物分析。

        通式(I)和(II)化合物合成的第一阶段是在溶液中制备被官能化和?;さ墓辜?。针对四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮(19)的典型流程如流程1所述。下列流程1-13中的说明同样能够适用替代的通式(I)和(II)骨架。

        流程1.(a)iBuOCOCl,NMM,DCM,-15℃,10min,在氩下。(b)含重氮甲烷的二乙醚,历经1hr从-15℃至RT。(c)乙酸。(d)含LiCl(10eq)的80%含水乙酸,历经1hr从5℃至RT。

        FmOC(O)表示熟知的胺?;せ?-芴基甲氧羰基(Fmoc,参见Atherton,E.和Sheppard,R.C.,1989),“Pg”表示游离羟基或羟基?;せ?,例如叔丁基醚。举例而言,与重氮甲烷缩合得到R1=H。尽管在反应1小时时明显观察到重氮酮的生成,不过与醚性重氮甲烷反应24小时观察到单独的收率全面提高。

        考虑到步骤(a),合成可以开始于被适当?;さ摩?羟脯氨酸(17)(或被?;さ摩?羟基哌啶酸),后者可通过各种文献方法获得,例如(a)Heffner,R.J.等,J.Am.Chem.Soc.,114,10181-10189,1992;(b)Hughes,P.Cardy,J.,J.Org.Chem.,54,3260-3264,1989;(c)Heffner,R.J.,Jouille,M.M.,Tet.Lett,30,7021-7024,1989;(d)Ewing,W.R.,Jouille,M.M.,Heterocycles,27,2843-2850,1988;(e)Kolodziej,S.A.,Marshall,G.R.,Int.J.Pept.Prot.Res.,48,274-280,1996;(f)Evans,D.A.,Weber,A,E.,J.Am.Chem.Soc.,109,7151-7157,1987;(g)Langlois,N.,Rakotondradany,F.,Tetrahedron,56,2437-2448,2000;(h)Sugisaki,C.H.等,Bet.Lett.,39,3413-3416,1998;(i)Greck,C.等,Tet.Lett.,37,2031-,1996;(j)Agami,C.等,Tet.Lett.,37,4001-,1996。

        被适当?;さ摩?羟脯氨酸(17)经由异丁基氯甲酸酯混合型酸酐而活化,然后与重氮甲烷缩合,得到重氮甲基酮中间体(18)。在含水乙酸中将重氮甲基酮中间体(18)用氯化锂处理,得到被?;さ乃那膺秽3,2-b]吡咯-3-酮(19)。简单R1取代基的引入可以这样实现,活化(17)与重氮甲烷替代物缩合,例如重氮乙烷(R1=CH3)或1-苯氧基重氮乙烷(R1=CH2OPh)。

        流程1所述被?;さ墓辜?以四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮(19)为例合成)可以用在抑制剂分子的固相合成中(步骤(b)至(e))。步骤(b)是醛或酮的固相连接,以前已被各种方法描述过(例如参见(a)James,I.W.,1999,(b)Lee,A.,Huang,L.,Ellman,J.A.,J.Am.Chem.Soc,121(43),9907-9914,1999,(c)Murphy,A.M.等,J.Am.Chem.Soc,114,3156-3157,1992)。适合于烷基酮官能度、例如(19)的可逆连接的方法是通过前述化学的组合??梢允褂冒被?,即4-[[(肼基羰基)氨基]甲基]环己烷羧酸三氟乙酸盐(20)(Murphy,A.M.等,J.Am.Chem.Soc,114,3156-3157,1992),如流程2所述,以四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮(19)的连接为例。

        通式(I)

        流程2.(a)含(19)的90%EtOH/H2O/1.5eq?NaOAc/4-[[(肼基羰基)氨基]甲基]环己烷羧酸三氟乙酸盐(20),2hr回流.(b)3eq构建体(21)/3eq?HBTU/3eq?HOBt/6eq?NMM,NH2-固相,DMF,RT,o/n.(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)引入U-V-W-X-Y的化学范围.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        构建体(21)是这样制备的,在含水乙醇/乙酸钠中回流,使连接剂分子(20)与四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮(19)反应。利用标准固相技术(例如参见Atherton,E.和Sheppard,R.C.,1989)将构建体通过(21)的游离羧酸官能度固定于氨基官能化的固相上,得到负载构建体(22)。

        负载构建体(22)可以与商业上可得到的或文献中的多种羧酸反应,以引入通式(I)中的左手部分“U-V-W-X-Y”。在最简单的实例中,通式(I)的完整左手部分包含封端的氨基酸(流程3),例如得到通式(I)的类似物,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=NH,R16=H,n=1,(V)m=CO,m=1,U=芳基:

        流程3.(a)20%哌啶/DMF,30min.(b)20eq?Fmoc-氨基酸/20eqHBTU/20eq?HOBt/40eq?NMM,DMF,o/n.(c)5eq羧酸/5eq?HBTU/5eqHOBt/10eq?NMM,DMF,RT,o/n.(d)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        作为替代选择,可以利用传统的有机化学方法在溶液中制备羧酸,再在固相上与构建体(22)偶联(流程4-8)。例如(流程4),在溶液中将氨基酸——以(24)为例——用亚硝酸钠/H2SO4处理,得到α-羟基酸——以(25)为例(Degerbeck,F.等,J.Chem.Soc,Perkin?Trans.1,11-14,1993)。在二甲基甲酰胺/二氯甲烷混合物中将α-羟基酸(25)用氢化钠处理,然后加入苄基溴,得到2RS-苄氧基-3-环己基丙酸(26)。(26)与固相构建体(22)偶联,然后裂解,得到(27),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=0,n=1,(V)m=CH2,也就是R17,R18=H,m=1,U=苯基。对有机合成领域技术人员而言,遵照所述的一般条件,多种氨基酸——例如(24)——可以转化为对应的α-羟基酸——例如(25)。另外,遵照所述的一般条件,苄基溴可以用任意合理的Ar-CR17R18-卤化物代替,得到羧酸(26)的很多变体。在某些情形中,可能有利的是在与烷基卤反应之前暂时?;人嵛谆?例如化合物(32),流程6)。酯中间体然后被简单地水解为酸(26)。通式(I)中具有多种(V)m和U的(27)类似物可以通过流程4所述的一般条件加以制备。由于最终的合成步骤牵涉三氟乙酸(TFA)介导的与固相结合的化合物的裂解,可以通过替代途径在溶液中制备其中被取代的醚对TFA不稳定的类似物(参见流程11)。

        流程4.(a)NaNO2/H2SO4,0℃→RT,2hr.(b)2.3eq?NaH,1∶1DMF/DCM,1.4eq苄基溴,o/n.(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)10eq(26)/10eq?HBTU/10eq?HOBt/20eq?NMM,DMF,RT,o/n.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        作为替代选择,构建体(22)(在除去Fmoc之后)与α-羟基酸(25)偶联,得到通式(I)中多用的与固相结合的中间体Y取代基,它可以与很多试剂反应。例如,α-羟基可以在Mitsunobu条件下反应(Hughes,D.L.Org.React.(N.Y),42,335-656,1992),得到醚(也就是在通式(I)中X=-,W=O)(参见Grabowska,U.等,J.Comb.Chem.,2(5),475-490,2000关于固相上的Mitsunobu反应实例)。作为替代选择,α-羟基可以与氨基甲酰氯反应,得到氨基甲酸酯(也就是在通式(I)中X=-,W=O,V=NHC(O))。

        作为替代选择(流程5),在溶液中将氨基酸——以(24)为例——用亚硝酸钠/H2SO4/溴化钾处理,得到α-溴代酸——以(28)为例(Souers,A.J.等,Synthesis,4,583-585,1999),构型得以保留。在二甲基甲酰胺/三乙胺中将α-溴代酸(28)用烷基硫醇——以4-叔丁基苯基甲硫醇(29)为例——处理,得到2S-(4-叔丁基苄硫基)-4-甲基丙酸(30),构型得以反转。(30)与固相构建体(22)偶联,然后裂解,得到(31),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=S,n=1,(V)m=CH2,也就是R17,R18=H,m=1,U=4-叔丁基苯基。对有机合成领域技术人员而言,遵照所述的一般条件,多种氨基酸——例如(24)——可以转化为对应的α-溴代酸——例如(28)。另外,从(24)的S-异构体开始,得到(28)的S-溴代酸类似物和(30)的R-硫醚类似物。另外,遵照所述的一般条件,(4-叔丁基苯基)甲硫醇(29)可以用任意合理的Ar-CR17R18-SH代替,得到羧酸(30)的很多变体。因而,通式(I)中具有多种(V)m和U的(31)类似物可以通过流程5所述的一般条件加以制备。

        流程5.(a)NaNO2/H2SO4,KBr,0℃→RT,2hr.(b)烷基硫醇(29)/DMF/NEt3,o/n.(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)10eq(30)/10eqHBTU/10eq?HOBt/20eq?NMM,DMF,RT,o/n.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        作为替代选择,构建体(22)(在除去Fmoc之后)与α-溴代酸——例如(28)——偶联,得到通式(I)中多用的中间体Y取代基,它可以与很多试剂反应。例如,α-溴化物可以被亲核试剂置换,例如醇、硫醇、阴碳离子等,得到醚(也就是在通式(I)中X=-,W=O)、硫醚(也就是在通式(I)中X=-,W=S)。硫醚可以可选地被氧化为砜(参见流程9,也就是在通式(I)中X=-,W=SO2)(参见Grabowska,U.等,J.Comb.Chem.,2(5),475-490,2000关于在固相上置换溴化物和氧化硫醚的实例)。

        作为替代选择(流程6),将α-羟基酸——以(25)为例——用三甲代甲硅烷基氯和甲醇处理,得到甲基酯(32)。在二氯甲烷中将游离羟基用光气活化为氯甲酸酯,然后加入吗啉,然后水解,得到吗啉-4-羧酸-1S-羧基-2-环己基乙基酯(33)。(33)与固相构建体(22)偶联,然后裂解,得到(34),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=O,n=1,(V)m=CO,U=吗啉代基。对有机合成领域技术人员而言,遵照所述的一般条件,多种α-羟基酸酯——例如(32)——可以转化为活化的氯甲酸酯。另外,遵照所述的一般条件,吗啉可以用任意合理的胺代替,得到羧酸(33)的很多变体。因而,通式(I)中具有多种(V)m和U的(34)类似物可以通过流程6所述的一般条件加以制备。

        流程6.(a)Me3SiCl,MeOH,RT,o/n.(b)i.COCl2/DCM,o/n,ii.吗啉/DCM,0℃,2hr,iii.含LiOH的H2O/二烷,0℃(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)10eq(33)/10eq?HBTU/10eq?HOBt/20eq?NMM,DMF,RT,o/n.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        作为替代选择(流程7),多种烷基琥珀酸酯——以2R-环己基甲基琥珀酸1-甲基酯(35)为例——是商业上可得到的或者容易通过已知方法制备(参见(a)Azam等,J.Chem.Soc.Perkin?Trans.1,621-,1996;(b)Evans等,J.Chem.Soc.Perkin?Trans.1,103,2127,1981;(c)Oikawa等,Tet.Lett,37,6169,1996)?;罨榛晁狨?35)的羧基,然后加入含吗啉的二甲基甲酰胺,随后水解酯,得到2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸(36)。(36)与固相构建体(22)偶联,然后裂解,得到(37),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=CH2,也就是R14,R15=H,o=1,(W)n=CO,n=1,(V)m=-,U=吗啉代基。对有机合成领域技术人员而言,遵照所述的一般条件,可以制备多种烷基琥珀酸酯——例如(35),并转化为对应的取代的烷基琥珀酸——例如(36)。另外,遵照所述的一般条件,吗啉可以用任意合理的胺代替,得到羧酸(36)的很多变体。因而,通式(I)中具有多种(X)o、(V)m和U的(37)类似物可以通过流程7所述的一般条件加以制备。

        流程7.(a)i.EDC/1-羟基苯并三唑/DMF,0℃,30min.ii.吗啉,RT,o/n.(b)含LiOH的H2O/二烷,0℃(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)10eq(36)/10eq?HBTU/10eq?HOBt/20eq?NMM,DMF,RT,o/n.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        作为替代选择(流程8),多种联芳烷基乙酸——以2RS-联苯-3-基-4-甲基戊酸(39)为例——是商业上可得到的或者容易通过已知方法制备(参见(a)DesJarlais,R.L.等,J.Am.Chem.Soc,120,9114-9115,1998;(b)Oballa,R.M.等,WO?0149288)。联芳烷基乙酸(39)与固相构建体(22)偶联,然后裂解,得到(40),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=-,(V)m=-,U=间-联苯。对有机合成领域技术人员而言,多种联芳烷基乙酸——例如(39)——可以通过(38)的游离酸类似物的α-阴离子的烷基化作用加以制备,后者继而是通过苯基代硼酸与3-溴苯基乙酸甲酯的Suzuki偶联作用制备的。遵照所述的一般条件,在Suzuki偶联中苯基代硼酸可以用多种芳基代硼酸代替,得到羧酸(39)的很多变体。因而,通式(I)中具有多种基团U的(40)类似物可以通过流程8所述的一般条件加以制备。

        流程8.(a)含LiOH的H2O/二烷,0℃.(b)i.LDA,THF,2-甲基丙烯基溴.ii.Pd/C,EtOH,H2.(c)20%哌啶/DMF,30min.(d)10eq(39)/10eq?HBTU/10eq?HOBt/20eq?NMM,DMF,RT,o/n.(e)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        固相有机化学的很多其他可能性(例如参见Brown,R.D.J.Chem.Soc.,Perkin?Trans.1,19,3293-3320,1998关于最新SPOC公报的评论)可以用于从构建体(22)衍生出通式(I)化合物(类似地,通过适当负载的衍生物衍生出通式(II)化合物)。例如,可以在溶液中部分地构建通式(I)中的左手部分“U-V-W-X-Y”,与构建体(22)偶联,进一步在固相上修饰。例如(流程9),在裂解之前在二氯甲烷中用间-氯过苯甲酸氧化与中间体固相结合的种类,简单地延伸流程5,得到砜类似物(42)。从羧酸(30)的变体3-环己基-2S-(呋喃-2-基甲硫基)丙酸(41)开始,制备砜(42),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=SO2,n=1,(V)m=CH2,也就是R17,R18=H,m=1,U=2-呋喃基。如流程5所述,羧酸(30)的很多变体可以遵照例如(41)所述的一般条件加以制备。因而,通式(I)中具有多种(V)m和U的(42)类似物可以通过流程5和9所述的一般条件加以制备。

        流程9.(a)20%哌啶/DMF,30min.(b)5eq(41)/5eq?HBTU/5eqHOBt/10eq?NMM,DMF,RT,o/n.(c)5eq间-氯过苯甲酸/DCM,RT,5hr.(d)TFA/H2O(95∶5,v/v),RT,2hr。

        最后,用三氟乙酸/水处理,从固相上释放通式(I)和(II)化合物,然后是蒸发、冷冻干燥和标准的分析鉴别。

        通式(I)和(II)化合物的第二种合成策略包含:

        (a)在溶液中制备被适当官能化和?;さ乃那膺秽3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮构件。溶液相化学所优选的?;せ攀荖α-叔丁氧羰基和Nα-苄氧羰基。

        (b)标准的有机化学方法,用于转化构件(a)为通式(I)和(II)化合物。

        在最简单的实例中,可以通过传统的有机化学方法在溶液中制备通式(I)和(II)抑制剂的完整左手部分,再与构件(a)偶联(参见流程10,以3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸叔丁酯(45)的制备和使用为例)。

        ??????????通式(I)

        流程10.(a)iBuOCOCl,NMM,DCM,-15℃,10min,在氩下.(b)含重氮甲烷的二乙醚,历经24hr从-15℃至RT.(c)乙酸.(d)含LiCl(10eq)的80%含水乙酸,历经1hr从5℃至RT.(e)含4M?HCl的二烷,0℃,2hr.(f)预先制备的U-V-W-X-Y-COOH/活化,例如HATU/HOAt/NMM,DMF,RT,o/n。

        当通式(I)化合物含有对三氟乙酸不稳定的取代基时,流程10所述-般策略是特别有用的,三氟乙酸是用在每种固相流程4-9中的最终试剂。例如(流程11),在二甲基甲酰胺/二氯甲烷混合物中将α-羟基酸(47)的溶液用氢化钠处理,然后加入4-叔丁基苄基溴,得到2RS-(4-叔丁基苄氧基)-4-甲基戊酸(48)。(48)与盐酸盐(46)偶联,得到(49),是通式(I)的一个实例,其中R12=H,(X)o=-,(W)n=O,n=1,(V)m=CH2,也就是R17,R18=H,m=1,U=4-叔丁基苯基。对有机合成领域技术人员而言,在所示条件下,4-叔丁基苄基可以用任意合理的Ar-CR17R18-卤化物代替,得到羧酸(48)的很多变体。因而,通式(I)中具有多种(V)m和U的(49)类似物可以通过流程11所述的条件加以制备。

        流程11.(a)2.2eq?NaH,1∶1DMF/DCM,1.25eq?4-叔丁基苄基溴,2hr.(b)1eq(48),1eq?1BuOCOCl,2eq?NMM,DCM,-15℃,1hr,在氩下,然后1eq(46),RT,o/n。

        通式(I)和(II)化合物的第三种合成策略——其中向被?;さ墓辜尤險-V-W-X-Y牵涉多个有机反应——包含:

        (a)在溶液中制备被适当官能化和?;さ乃那膺秽3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮构件。溶液相化学所优选的?;せ攀荖α-叔丁氧羰基和Nα-苄氧羰基。

        (b)?;に那膺秽3,2-b]吡咯-3-酮、四氢噻吩并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢吡咯并[3,2-b]吡咯-3-酮、六氢环戊二烯并[b]吡咯-6-酮、四氢呋喃并[3,2-c]吡唑-6-酮、四氢噻吩并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢吡咯并[3,2-c]吡唑-6-酮、六氢环戊二烯并吡唑-6-酮、六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮、六氢噻吩并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢吡咯并[3,2-b]吡啶-3-酮、八氢环戊二烯并[b]吡啶-7-酮、六氢呋喃并[3,2-c]哒嗪-7-酮、六氢噻吩并[3,2-c]哒嗪-7-酮、八氢吡咯并[3,2-c]哒嗪-7-酮或八氢环戊二烯并[c]哒嗪-7-酮构件的酮官能度,例如成为二甲基乙缩醛。作为替代选择,酮可以被还原为非手性仲醇,再随着最终的合成步骤被重新氧化。

        (c)标准的有机化学方法,用于转化构件(b)为通式(I)和(II)化合物。

        (d)可以在溶液中制备中间体,然后与构件(b)偶联,进一步衍生为通式(I)和(II)化合物(参见流程12,以3-羟基六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸叔丁基酯(50)的制备和使用为例)。

        流程12.(a)还原,例如NaBH4.(b)含4M?HCl的二烷,0℃,2hr.(c)逐步与Y,X,W等中间体反应,逐步构建化合物(52).(d)氧化,例如Dess-Martin?periodane,CH2Cl2。

        作为替代选择,根据用于构建通式(I)和(II)化合物的左手侧U-V-W-X-Y的化学类型,酮可能需要?;?,例如成为二甲基乙缩醛。这样一种方法详细描述在流程13中,以3,3-二甲氧基六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸苄基酯(54)的制备和使用为例。

        流程13.(a)原甲酸三乙酯/pTSA/MeOH.(b)H2,Pd-C.(c)逐步与Y,X,W等中间体反应,逐步构建化合物(56).(d)三氟乙酸/CH2Cl2/H2O。

        本发明延及上述新颖的中间体和从每种它们的中间体前体制备通式(I)或(II)化合物的方法。继而,从它们的中间体前体制备中间体的方法也构成本发明的一部分。

        通式(I)和(II)化合物既可用作实验室工具,也可用作治疗剂。在实验室中,某些本发明化合物可用于确立一种已知的或新发现的半胱氨酸蛋白酶在疾病状态的确立或进展期间是否有助于决定性的或至少显著性的生物化学功能,这种方法普遍被称为“靶验证”。

        按照本发明的第二方面,提供了验证已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶是否为治疗靶的方法,该方法包含:

        (a)评估上述化合物体外与孤立的已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶的结合,得到效力的量度;和可选的一个或多个下列步骤:

        (b)评估化合物与靶密切相关性同系蛋白酶和一般的常见蛋白酶(例如胰蛋白酶)的结合,得到选择性的量度;

        (c)在化合物的存在下,监测基于细胞的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记;和

        (d)在化合物的存在下,监测基于动物模型的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记。

        本发明因此提供验证已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶是否为治疗靶的方法。不同的方法和复杂水平适合于特定靶的有效抑制和“验证”。在第一种情形中,该方法包含评估通式(I)或(II)化合物体外与孤立的已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶的结合,得到“效力”的量度。另外评估通式(I)或(II)化合物与靶密切相关性同系蛋白酶和一般的常见蛋白酶(例如胰蛋白酶)的结合,得到“选择性”的量度。第二种复杂性水平可以这样评估,在通式(I)或(II)化合物的存在下,监测基于细胞的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记。例如,“人破骨细胞吸收测定法”已经用作基于细胞的第二体外试验系统,用于监测组织蛋白酶K的活性和蛋白酶抑制剂的生化效果(例如参见WO-A-9850533)?!癕HC-II加工性T细胞活化测定法”已经用作基于细胞的第二体外试验系统,用于监测组织蛋白酶S的活性和蛋白酶抑制剂的生化效果(Shi,G-P.等,Immunity,10,197-206,1999)。在调查病毒或细菌感染时,这样一种标记能够作为病毒(例如mRNA副本数)或细菌负载的功能性评估,以评估蛋白酶抑制剂的生化效果。第三种复杂性水平可以这样评估,在通式(I)或(II)化合物的存在下,监测基于动物模型的特定半胱氨酸蛋白酶活性的功能标记。例如,利什曼原虫感染、P.vinckei感染、疟疾(镰状蛋白酶的抑制)和克鲁兹锥虫感染(克鲁兹蛋白酶)的鼠模型表明,在病原体传播中起关键作用的半胱氨酸蛋白酶有效遏制疾病症状,“验证”了所述的靶。

        本发明因此延及通式(I)或(II)化合物的用途,用于验证已知的或推定的半胱氨酸蛋白酶是否为治疗靶。

        通式(I)和(II)化合物可用于体内治疗或预防其中有半胱氨酸蛋白酶参与的疾病。

        按照本发明的第三方面,提供了用于医药的通式(I)或(II)化合物,尤其用于预防或治疗这样的疾病,其中该疾病的病理学可能被抑制半胱氨酸蛋白酶所改变。

        按照本发明的第四方面,提供了通式(I)或(II)化合物在药剂制备中的用途,该药剂用于预防或治疗这样的疾病,其中该疾病的病理学可能被抑制半胱氨酸蛋白酶所改变。

        某些半胱氨酸蛋白酶在动物、包括人的蛋白质降解的正常生理过程中发挥作用,例如结缔组织的降解。不过,体内这些酶的水平升高可以导致病理性条件,引起疾病。因而,半胱氨酸蛋白酶已经参与各种疾病状态,包括但不限于由Pneumocystis?carinii、克鲁兹锥虫、Trypsanoma?brucei?brucei和Crithidia?fusiculata所致感染;以及骨质疏松、自体免疫性、血吸虫病、疟疾、肿瘤转移、异染性脑白质病、肌营养不良、肌萎缩等。参见WO-A-9404172和EP-A-0603873及其中引用的参考文献。另外,从金黄色葡萄球菌分泌的细菌半胱氨酸蛋白酶被称为葡菌蛋白酶,已被推断为细菌毒性因子(Potempa,J.等,J.Biol.Chem,262(6),2664-2667,1998)。

        本发明可用于预防和/或治疗上面提到或暗示的每种疾病状态。本发明还可用在由病理水平的半胱氨酸蛋白酶、特别是木瓜蛋白酶总科的半胱氨酸蛋白酶所导致的疾病的治疗或预防方法中,该方法包含对需要的动物、确切为哺乳动物、最确切为人给以本发明的化合物。本发明特别提供治疗其中有半胱氨酸蛋白酶参与的疾病的方法,包括由Pneumocystis?carinii、克鲁兹锥虫、Trypsanoma?brucei、Leishmania?mexicana、溶组织梭菌、金黄色葡萄球菌、口蹄疫病毒和Crithidia?fusiculata所致感染;以及骨质疏松、自体免疫性、血吸虫病、疟疾、肿瘤转移、异染性脑白质病、肌营养不良和肌萎缩。

        克鲁兹蛋白酶的抑制剂、特别是克鲁兹蛋白酶特异性化合物可用于治疗恰加斯氏病。

        按照本发明,可以给以有效量的通式(I)或(II)化合物,以抑制与特定病症或疾病有牵连的蛋白酶。当然,这种剂量将进一步根据化合物的给药类型加以调整。例如,为了达到对急性治疗的“有效量”,通式(I)或(II)化合物的肠胃外给药是优选的?;衔镌?%葡萄糖水溶液或生理盐水中的静脉内输液或含有适合赋形剂的相似制剂是最有效的,尽管肌内大丸剂注射也是有用的。通常,肠胃外剂量将是约0.01至约100mg/kg;优选在0.1与20mg/kg之间,以维持血浆中的药物浓度在有效抑制半胱氨酸蛋白酶的浓度为准?;衔锟梢悦咳崭┮恢了拇?,以达到约0.4至约400mg/kg/天的总每日剂量为准。通过对比药物的血液水平与具有治疗效果所需的浓度,本领域普通技术人员容易确定本发明化合物在治疗上有效的精确剂量和这类化合物的最佳给药途径。本发明化合物的前体药物可以通过任意适合的方法制备。关于其中前体药物部分是酮官能度的那些化合物,具体为缩酮和/或半缩醛,转化作用可以按照常规方法进行。

        本发明化合物还可以被口服对患者给药,其方式使药物浓度足以抑制骨吸收或者达到如本文所公开的任意其他治疗指征。通常,含有该化合物的药物组合物的口服给药剂量在约0.1至约50mg/kg之间,其方式与患者的病症是一致的。优选地,口服剂量将是约0.5至约20mg/kg。

        当本发明的化合物按照本发明给药时,预期没有不可接受的毒理学效果。本发明的化合物具有良好的生物利用度,可以在若干生物学测定法之一中进行试验,以测定化合物具有所给出的药理学效果所需的浓度。

        按照本发明的第五方面,提供了药物或兽用组合物,包含一种或多种通式(I)或(II)化合物和药学上或兽医上可接受的载体?;箍梢源嬖谄渌钚晕镏?,这对所治疗或预防的疾病或病症而言可以被认为是适当的或明智的。

        载体、或者——如果存在一种以上——每种载体必须在与制剂的其他成分相容并且对接受者无害的意义上是可接受的。

        制剂包括适合于直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内和真皮内)给药的那些,但是优选地,该制剂是一种口服给药的制剂。制剂可以适宜地呈现单元剂型的形式,例如片剂和缓释胶囊剂,并且可以通过药学领域熟知的任意方法加以制备。

        这类方法包括使上述活性药物与载体缔合的步骤。一般而言,制剂是这样制备的,使活性药物与液体载体或微细粉碎的固体载体或者这两者均匀和紧密地缔合,然后如果必要的话使产物成型。本发明延及制备药物组合物的方法,包含使通式(I)或(II)化合物与药学上或兽医上可接受的载体或赋形剂结合或缔合。

        本发明的口服给药制剂可以呈现为:离散的单元,例如胶囊剂、扁囊剂或片剂,各自含有预定量的活性药物;粉剂或胶囊剂;活性药物在水性液体或非水性液体中的溶液或悬液;或水包油型液体乳剂或油包水型液体乳剂;或大丸剂等。

        关于口服给药的组合物(例如片剂和胶囊剂),术语“可接受的载体”包括赋形剂,例如普通的赋形剂,例如粘合剂,例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、蔗糖和淀粉;填充剂和载体,例如玉米淀粉、明胶、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、高岭土、甘露糖醇、磷酸二钙、氯化钠和藻酸;和润滑剂,例如硬脂酸镁、硬脂酸钠和其他金属硬脂酸盐、甘油硬脂酸酯、硬脂酸、硅酮液、滑石、蜡、油和胶体二氧化硅?;箍梢允褂媒梦都?,例如薄荷、冬青油、樱桃味剂等?;箍赡苄枰尤胱派?,以使剂型容易鉴别。片剂还可以通过本领域熟知的方法包衣。

        片剂可以这样制备,可选地与一种或多种辅助性成分一起进行压制或模制。压制的片剂可以这样制备,在适合的机器中压缩自由流动形式的活性药物,例如粉末或颗粒,可选地混合有粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。模制的片剂可以这样制备,在适合的机器中模制用惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物的混合物。片剂可以可选地被包衣或作记号,并且经过配制可以提供活性药物的缓慢或控制释放。

        其他适合于口服给药的制剂包括锭剂,在经过矫味的基质中包含活性药物,基质通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶;软锭剂,在惰性基质中包含活性药物,基质例如明胶与甘油、或蔗糖与阿拉伯胶;和漱口剂,在适合的液体载体中包含活性药物。

        肠胃外制剂一般将是无菌的。

        按照本发明的第六方面,提供了如上所述的药物或兽用组合物的制备方法,该方法包含使活性化合物与载体缔合,例如借助混合。

        本发明每个方面的优选特性如同彼此在细节上作必要的修改。

        现在将用下列实施例阐述本发明。

        溶液相化学——一般方法

        所有溶剂均购自ROMIL?Ltd(Waterbeach,Cambridge,UK),为SpS或Hi-Dry级,除非有相反陈述。一般的肽合成试剂得自Chem-ImpexIntl.Inc.(Wood?Dale?IL?60191.USA)。薄层色谱(TLC)是在预涂板(Merck铝片二氧化硅60?F254,part?no.5554)上进行的?;衔锏墓鄄馐窃谧贤獾?254nm)下实现的或者使用适当的染色试剂??焖僦炕窃诠杞?0(Merck?9385)上进行的。全部分析型HPLC均是在Phenomenex?Jupiter?C4,5μ,300A,250×4.6mm上得到的,使用溶剂A=0.1%含水三氟乙酸(TFA)与溶剂B=90%乙腈/10%溶剂A的混合物,在自动Agilent系统上利用215和/或254nm?UV检测。除非有相反陈述,历经25分钟进行含10-90%B的A的梯度,流速1.5ml/min,用于全分析型HPLC分析。HPLC-MS分析是在Agilent?1100系列LC/MSD上进行的,使用自动Agilent?HPLC系统,梯度为历经10分钟含10-90%B的A,柱子为Phenomenex?Columbus?C8,5μ,300A,50×2.0mm,流速为0.4ml/min。核磁共振(NMR)是在Bruker?DPX400(400MHz?1H频率;QXI探针)上得到的,溶剂和温度如文中所示?;埔园偻蚍种菔?δ)表示,指的是溶剂中的残留信号。偶合常数(J)以Hz表示。

        固相化学——一般方法

        通过溶液相与固相基于Fmoc的化学制备实施例抑制剂(1-156)(参见’Solid?Phase?Peptide?Synthesis’,Atherton,E.和Sheppard,R.C.,IRL?Press?Ltd,Oxford,UK,1989关于一般说明)。在溶液中制备被适当?;ず凸倌芑墓辜?例如通用化合物(19),流程1),然后通过适当的连接剂可逆地与固相连接。然后进行偶联/去?;?化学修饰(例如氧化)的循环,直至完成全长的所需分子(流程2)。然后从固相上释放(裂解)实施例抑制剂(1-156),分析,纯化,测定对一定蛋白酶的抑制作用。

        一般而言,利用multipin(聚酰胺1.2→10μmol负载,参见www.mimotopes.com)进行固相合成,不过可以选择任意适合的固相表面。一般而言,利用1.2μmol齿轮提供小规模粗样本的初步筛选,利用10μmol冠进行优选实施例的大规模合成和纯化。采用标准的偶联和Fmoc去?;し椒?参见Grabowska,U.等,J.Comb.Chem.2(5),475-490,2000关于固相multipin方法的详细说明)。

        最初的组件的制备

        在二甲基甲酰胺(DMF,通常1至10ml)中,将构件-连接剂构建体(例如(21),通常100mg至2g)用2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,1摩尔当量)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBT,1摩尔当量)和N-甲基吗啉(NMM,2摩尔当量)活化羧基5分钟。加入氨基官能化的DA/MDA冠或HEMA齿轮(10μmol每冠/1.2μmol每齿,与活化的构建体相比,总表面氨基官能化为0.33摩尔当量),然后加入另外的DMF,以覆盖固相表面。负载反应持续过夜。负载过夜后,通过标准的循环洗涤、Fmoc去?;ず透涸亓炕〕龉?齿轮(参见Grabowska,U.等),以得到负载的构件-连接剂构建体(例如(22))。分析表明全部样本事实上均被定量负载。

        偶联循环

        标准Fmoc-氨基酸(10或20摩尔当量)的偶联是这样进行的,在二甲基甲酰胺中,经由用2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,10或20摩尔当量)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBT,10或20摩尔当量)和N-甲基吗啉(NMM,20或40摩尔当量)活化羧基,预活化5分钟。按照合成所需的方式,将活化的物质分配到聚丙烯96孔平板的适当小孔内(Beckman,1ml小孔,关于冠,每孔500μl溶液,关于齿轮,每孔250μl溶液)。加入所负载的游离氨基构件-连接剂构建体(例如(22)),偶联反应持续过夜。偶联过夜后,通过标准的循环洗涤和Fmoc去?;と〕龉?齿轮(参见Grabowska,U.等)。同等的活化和偶联条件用于一定羧酸(R-COOH)的偶联。作为替代选择,在DMF中偶联氯甲酸酯,例如吗啉-4-碳酰氯(10摩尔当量),并加入NMM(10摩尔当量)。

        酸解裂解循环

        按照相当于合成的方式,将95%TFA/5%水混合物预分配至两个聚丙烯96孔平板内(Beckman,1ml小孔,关于冠,每孔600μl溶液,关于齿轮,每孔300μl溶液)。向第一个平板(母板)加入所完成的multipin组件,将构件包在锡箔内,裂解2小时。然后从第一个平板除去所裂解的multipin组件,加入到第二个平板(洗涤板)达15分钟。然后弃去耗尽了的multipin组件,在HT-4GeneVac平板蒸发器上蒸发母板/洗涤板。

        所裂解的实施例的分析和纯化

        (a)Ex?1.2μmol齿轮

        向每个裂解和干燥后的洗涤板小孔加入100μl二甲基亚砜(DMSO),充分混合,转移至对应的裂解和干燥后的母板小孔,再次充分混合。将10μl该DMSO溶液用90%乙腈/10%0.1%含水TFA混合物稀释至100μl。利用HPLC-MS和全分析型HPLC分析20μl等分试样。在每种情况下,粗的实施例分子产生预期的[M+H]+离子和>80%的HPLC峰(215nm?UV分析)。这提供了良好质量粗实施例的大约10mM?DMSO储备溶液,用于初步的蛋白酶抑制作用筛选。

        (b)Ex?10μmol冠

        向每个洗涤板小孔加入500μl?90%乙腈/10%0.1%含水TFA混合物,充分混合,转移至对应的母板小孔,再次充分混合。将5μl该溶液用90%乙腈/10%0.1%含水TFA混合物稀释至100μl。利用HPLC-MS和全分析型HPLC分析20μl等分试样。在每种情况下,粗的实施例分子产生预期的[M+H]+离子和>80%的HPLC峰(215nm?UV分析)。然后将含有粗实施例的聚苯乙烯构件冷冻干燥。

        (c)将各实施例(ex(b))再次溶于0.1%含水TFA/乙腈(1ml)的1∶1混合物,经过半制备型HPLC纯化(Phenomenex?Jupiter?C4,5μ,300A,250×10mm,含25-90%B的A梯度,历经25min,4.0ml/min,215nmUV检测)。将各部分冷冻干燥至预涂焦油的玻璃样本小瓶内,得到纯化的样本(通常2至4mg,收率40至80%)。

        (d)将纯化的样本溶于适当体积的DMSO,得到10mM储备溶液,用于精确的蛋白酶抑制筛选。

        实施例1(通式(I)实例)(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        遵照流程1的一般细节,如下分8个步骤制备所需的双环构件(3aS,6aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(19)。

        (1)(2S,3S)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        向剧烈搅拌的冰冷却的碳酸钠(16.90g,160.2mmol)的水(100ml)溶液加入反式-3-羟基-L-脯氨酸(10.0g,76.3mmol)。加入1,4-二烷(75ml),得到不透明而可移动的混合物。历经1小时加入9-芴基甲基氯甲酸酯(20.31g,80mmol)的1,4-二烷(75ml)溶液,然后除去冰冷却,将混合物在RT下搅拌另外2小时。加入另外的水(300ml),反应混合物用氯仿洗涤(2×250ml),合并有机层,弃去。含水相用1N?HCl酸化至~pH2,得到浓稠的不透明混合物。酸化后的含水混合物用氯仿萃取(2×500ml),新的澄清的含水相弃去。将不透明的混合氯仿层干燥(Na2SO4),过滤,在真空中浓缩,得到第1批(5.70g)。残留的沉淀(产物与干燥剂的混合物)用热甲醇研制(2×250ml),合并甲醇溶液,在真空中浓缩,得到第2批(10.25g)。第1和2批分别用TLC(单一UV斑点,Rf=0.15,含20%MeOH的CHCl3)和HPLC-MS分析(单一的主UV峰,Rt=7.069min,354.2[M+H]+,376.2[M+Na]+),发现是等同的,总收率为15.95g(45.2mmol,59.2%)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(DMSO-d6?at?298K);1.80-2.02(2Hγ,m),3.49-3.62(2Hδ,m),4.12-4.38(Hα,Hβ,Fmoc?H-9?and?CH2,m),5.55/5.62(OH),7.30-7.31(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.35-7.37(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.43-7.45(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.63-7.65(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5),12.8-13.0(COOH).

        δC(DMSO-d6?at?298K);31.70/32.70(d,Cγ),44.68/45.32(d,Cδ),46.94/46.97(u,Fmoc?C-9),67.04/67.33(d,Fmoc?CH2),68.24/68.51(u,Cα),73.12/74.23(u,Cβ),120.49/120.52(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.49/125.58(u,Fmoc?C-1and?C-8),127.50(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.04(u,Fmoc?C-3?and?C-6),140.99/141.09(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.02/144.16(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),154.33/154.54(q,O-CON),172.10/172.39(COOH).

        (2)(2S,3S)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在迪安-斯塔克设备中,将(2S,3S)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(10.9g,30.8mmol)溶于甲苯(75ml)。加入烯丙醇(20ml),然后加入对甲苯磺酸酐(6.05g,31.4mmol)。将混合物回流1小时,冷却,加入CHCl3(300ml)。将有机层用NaHCO3(300ml)、0.1N?HCl(300ml)和盐水(300ml)洗涤,然后干燥(Na2SO4)。过滤和在真空中浓缩,得到淡黄色泡沫(13.5g)。粗的泡沫经过硅胶(150g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至无色胶状物,收率10.34g(26.3mmol,85.4%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.30,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=18.849min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=8.354min,394.2[M+H]+,416.2[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);2.00-2.21(2Hγ,m),2.70/2.85(OH,b),3.72-3.81(2Hδ,m),4.12-4.67(Hα,Hβ,Fmoc?H-9?and?CH2,2x?COOCH2CH=CH2,m),5.20-5.40(2x?COOCH2CH=CH2,m),5.82-5.99(1x?COOCH2CH=CH2,m),7.28-7.33(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.34-7.41(2H?aromatic,Fmoc?H-3and?H-6),7.53-7.66(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.77-7.81(2Haromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);32.28/33.04(d,Cγ),44.98/45.32(d,Cδ),47.56/47.63(u,Fmoc?C-9),66.44(d,COOCH2CH=CH2),68.01/68.11(d,Fmoc?CH2),68.32/68.72(u,Cα),74.49/75.67(u,Cβ),119.20/119.48(d,COOCH2CH=CH2),120.34/120.37(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.36/125.60(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.47(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.06/128.12(u,FmocC-3?and?C-6),131.79/131.94(u,COOCH2CH=CH2),141.65/141.71(q,FmocC-4’and?C-5’),144.12/144.34(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.13/155.59(q,OCON),170.53/170.55(COOCH2CH=CH2).

        (3)(2S,3R)(3-甲酰氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在氮过滤层下,在搅拌和冰冷却下,将三苯膦(2.76g,10.5mmol,TPP)溶于无水四氢呋喃(75ml)。历经15分钟滴加二异丙基偶氮二羧酸酯(2.12g,2.07ml,10.5mmol,DIAD),得到沉淀状白色混合物。将(2S,3S)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(4.15g,10.5mmol)和甲酸(0.97g,0.79ml,21.0mmol)混合在无水四氢呋喃(30ml)中,历经15分钟加入到TPP/DIAD混合物中。将反应在0℃下搅拌另外1小时,然后在RT下搅拌过夜。在真空中除去溶剂,得到粘性淡黄色油(11.1g)。粗油经过硅胶(250g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯4∶1→1∶1的梯度洗脱。鉴别产物部分,在真空中浓缩,得到(2S,3R)(3-甲酰氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯/DIAD的双酰肼,白色固体,收率4.0g。TLC(单一UV斑点,Rf=0.50,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=19.064min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=9.721min,422.2[M+H]+,444.1[M+Na]+和非UV峰,Rt=5.057min,205.1[M+H]+,431.2[2M+Na]+)。

        (4)(2S,3R)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        将(2S,3R)(3-甲酰氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯/DIAD的双酰肼混合物(4.0g)溶于烯丙醇(18ml),加入浓H2SO4(75μl),加热至回流达90分钟。将混合物冷却,加入EtOAc(200ml),用NaHCO3(200ml)、盐水(200ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到粘性黄褐色油(4.2g)。粗油经过硅胶(150g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯2∶1→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至无色胶状物,收率1.75g(4.44mmol,42.4%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=17.795min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=8.574min,394.2[M+H]+,416.2[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);2.09-2.19(2Hγ,m),2.52(OH,dd,J?1.0,6.0),3.54-3.65/3.70-3.82(2Hδ,m),4.14-4.20/4.22-4.30(Fmoc?H-9,dm),4.30-4.39(1xFmoc?CH2,m),4.43-4.58(Hα+1x?Fmoc?CH2,m),4.60-4.65(Hβ,m)4.65-4.76(2x?COOCH2CH=CH2,m),5.23-5.36(2x?COOCH2CH=CH2,m),5.81-6.00(1x?COOCH2CH=CH2,m),7.28-7.38(2H?aromatic,Fmoc?H-2?andH-7),7.39-7.46(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.53-7.69(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.73-7.81(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).δC(CDCl3?at?298K);32.34/33.22(d,Cγ),44.65/44.90(d,Cδ),47.57/47.63(u,Fmoc?C-9),63.89/64.22(u,Cα),66.38/66.41(d,COOCH2CH=CH2),68.02(d,Fmoc?CH2),71.84/72.80(u,Cβ),119.08/119.31(d,COOCH2CH=CH2),120.39(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.32/125.46/125.56(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.46(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.12(u,Fmoc?C-3?and?C-6),132.03/132.14(u,COOCH2CH=CH2),141.65/141.69(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.00/144.16/144.43/144.48(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),154.88/155.25(q,OCON),169.94/169.99(COOCH2CH=CH2).

        (5)(2S,3R)(3-叔丁氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在50ml玻璃压力试管内,将(2S,3R)(3-羟基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.75g,4.45mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml),冷却至-78℃。将异丁烯气体(~10ml)压缩至溶液内,加入浓H2SO4(100μl)。加入搅拌棒,密封试管,除去冷却装置,在RT下搅拌72小时。将已密封的试管冷却至-78℃,加入N-甲基吗啉(200μl,1eq?w.r.t.cH2SO4),温热至RT,开启密封,搅拌2小时。加入二氯甲烷(75ml),将有机层用NaHCO3(75ml)和盐水(75ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到可移动的淡黄褐色油(2.41g)。粗油经过硅胶(150g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯4∶1→3∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至浓稠澄清的油,收率1.66g(3.69mmol,83.0%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.45,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=22.811min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=11.193min,450.2[M+H]+,472.2[M+Na]+,921.4[2M+Na]+)。

        (6)(2S,3R)(3-叔丁氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在搅拌下,将(2S,3R)(3-叔丁氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.60g,3.56mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml)。加入四(三苯膦)钯(0)(83mg,0.071mmol,0.02eq),然后加入苯基硅烷(0.77g,0.674ml,7.12mmol,2eq)。2小时后,加入二氯甲烷(150ml),将有机层用0.01N?HCl(150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到深灰色固体(2.14g)。粗固体经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯2∶1→1∶6的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶,收率0.89g(2.17mmol,61.1%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.30,庚烷∶乙酸乙酯1∶2),分析型HPLC?Rt=19.135min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=9.386min,351.4[M+H-But]+,410.2[M+H]+,432.1[M+Na]+,841.1[2M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3at?298K);1.23(9H,s),1.98-2.28(2Hγ,m),3.40-3.50(1Hδ,m),3.68-3.81(1Hδ,m),4.10-4.50(Hα+Hβ+Fmoc?H-9+2x?Fmoc?CH2,m),7.29-7.40(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.42-7.47(2H?aromatic,FmocH-3?and?H-6),7.55-7.70(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.73-7.85(2Haromatic,Fmoc?H-4?and?H-5),6.30-8.30(COOH,b).

        δC(CDCl3?at?298K);28.285(u,(CH3)C),31.47/32.29(d,Cγ),44.13/44.38(d,Cδ),47.51/47.60(u,Fmoc?C-9),62.73/62.95(u,Cα),67.96/68.13(d,FmocCH2),71.77/72.67(u,Cβ),120.33(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.39/125.50/125.55/125.61(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.46(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.01/128.07(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.58/141.66(q,Fmoc?C-4’andC-5’),144.04/144.23/144.46(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),154.95/155.32(q,OCON),175.19/175.65(COOH).

        (7)(2S,3R)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲基酯的制备

        在搅拌下,将(2S,3R)(3-叔丁氧基)吡咯烷-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(615mg,1.5mmol)溶于无水二氯甲烷(15ml)。将反应用氮冲洗,冷却至-15℃。历经15分钟同时加入异丁基氯甲酸酯(225mg,1.6mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液和N-甲基吗啉(303mg,3.0mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液,每次加入0.5ml。向活化的氨基酸溶液加入醚性重氮甲烷(在60℃下,将diazald(4.7g,~15mmol)的二乙醚(75ml)溶液倒在氢氧化钠(5.25g)的水(7.5ml)/乙醇(15ml)溶液上而生成),在RT下搅拌24小时。加入乙酸(~2m1)以猝灭反应,然后加入叔丁基甲基醚(150ml),将有机层用水洗涤(3×200ml),然后干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到浓稠黄色的油(890mg)。粗油经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→2∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩,得到(2S,3R)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,淡黄色固体,收率270mg(0.624mmol,41.6%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.55,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=20.085min,HPLC-MS(2个主UV峰,Rt=7.48min,350.1[M+H]+,372.1[M+Na]+,721.0[2M+Na]+和Rt=9.949min,406.2[M+H-N2]+,456.2[M+Na]+,889.3[2M+Na]+)。

        注意到HPLC-MS分析后,m/z?350.1相当于所需双环产物(3aS,6aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(19)。

        (8)环化为(3aS,6aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯

        向(2S,3R)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(209mg,0.483mmol)加入氯化锂(205mg,4.8mmol)的水(1.25ml)与乙酸(5.0ml)溶液。有气体放出,黄色油性固体在1小时内溶解,得到事实上无色的溶液。90分钟后,加入氯仿(150ml),将有机层用NaHCO3(2×150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到浓稠黄色胶状物(200mg)。粗胶状物经过硅胶(40g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶2→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶性固体,收率133mg(0.38mmol,18.6%,以原料酸计)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC宽峰Rt=15.2-17.6min,HPLC-MS(单一宽UV峰,Rt=7.45-8.56min,350.1[M+H]+,372.1[M+Na]+,721.2[2M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.61-1.97(2Hγ,m),3.32-3.45(1Hδ,m),3.66-3.75/3.85-3.95(1/2Hδ+1/2Hδ,dm),3.95/4.10(1x?COCH2α+1x?COCH2β,dm),4.15-4.30(Fmoc?H-9+2x?Fmoc?CH2,m),4.40-4.60/4.80-4.92(Hα+Hβ,complex),7.20-7.30(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.31-7.42(2Haromatic,Fmoc?H-3and?H-6),7.50-7.57/7.60-7.66(2H?aromatic,Fmoc?H-1and?H-8),7.68-7.76(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);31.76/32.28(d,Cγ),45.59/45.95(d,Cδ),47.64(u,FmocC-9),62.26/62.77(u,Cα),68.03/68.65(d,Fmoc?CH2),71.28(d,COCH2),82.17/83.11(u,Cβ),120.38(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.41/125.59/125.88(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.45/127.49(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.13(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.73(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.16/144/37/144.88(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.33(q,OCON),209.32(COCH2).

        遵照流程2的一般细节,如下转化所需双环构件(3aS,6aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(19)为构件-连接剂构建体(21):

        将(3aS,6aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(19)(100mg,0.286mmol)溶于含有乙酸钠.三水合物(59mg,0.428mmol,1.5eq)的乙醇(5.0ml)与水(0.75ml)的混合物。加入4-[[(肼基羰基)氨基]甲基]环己烷羧酸.三氟乙酸盐(95mg,0.286mmol,1.0eq,Murphy,A.M.等,J.Am.Chem.Soc.,114,3156-3157,1992),将混合物回流90分钟。加入氯仿(50ml),将有机层用HCl洗涤(50ml,~pH3),干燥(Na2SO4),在真空中浓缩,得到粗的构件-连接剂构建体(21),为无色胶状物。收率172mg,分析型HPLC2个峰Rt=16.477和18.512min(顺式/反式几何异构体),HPLC-MS(2×UV峰,Rt=7.75和8.82min,547.3[M+H]+,569.3[M+Na]+)。粗的(21)直接用于构建体负载。

        遵照流程2的一般细节,如下连接所需构件-连接剂构建体(21)与固相,得到负载了的构件-连接剂构建体(22):

        将构件-连接剂构建体(21)(0.26mmol)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,98.6mg,0.26mmol)、1-羟基苯并三唑.水合物(HOBT,39.8mg,0.26mmol)溶于二甲基甲酰胺(3ml),加入N-甲基吗啉(NMM,58μl,0.52mmol)。预活化5分钟后,加入游离胺齿轮(72×1.2μmol),然后加入二甲基甲酰胺(5.5ml),放置过夜。然后向游离胺冠(10×10μmol)加入用尽了的偶联溶液,放置过夜。标准的洗涤和分析表明负载是定量的。

        遵照流程2的一般细节,如下在固相上加工所需负载了的构件-连接剂构建体(22):

        利用标准的Fmoc去?;?,再先后与Fmoc-Tyr(OBut)-OH和苯甲酸偶联,将负载了的构建体(22)加工成实施例1(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺。HPLC?Rt=10.15min(>95%),HPLC-MS?395.1[M+H]+

        如实施例1所述制备下列实施例(2-82),与所需试剂偶联,得到全长分子。

        实施例2(3aS,6aR)联苯基-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.94-15.46min(>90%),HPLC-MS?471.2[M+H]+

        实施例3.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.29-15.89min(>90%),HPLC-MS?451.3[M+H]+

        实施例4.(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        HPLC?Rt=11.12min(>90%),HPLC-MS?478.2[M+H]+

        实施例5.(3aS,6aR)2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=8.58min(>90%),HPLC-MS?479.2[M+H]+

        实施例6.(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=14.77-15.31min(>90%),HPLC-MS?477.2[M+H]+

        实施例7.(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=14.68min(>90%),HPLC-MS?479.2[M+H]+

        实施例8.(3aS,6aR)联苯-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=16.90-18.04min(>90%),HPLC-MS?421.3[M+H]+

        实施例9.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.45-18.62min(>90%),HPLC-MS?401.2[M+H]+

        实施例10.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-苯氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.26-18.38min(>90%),HPLC-MS?437.2[M+H]+

        实施例11.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.34-18.52min(>90%),HPLC-MS?437.2[M+H]+

        实施例12.(3aS,6aR)4-溴-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=14.81min(>90%),HPLC-MS?423.2/425.2[M+H]+

        实施例13.(3aS,6aR)3-溴-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=14.85-16.20min(>90%),HPLC-MS?423.2/425.2[M+H]+

        实施例14.(3aS,6aR)4-异丙基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=16.41-17.65min(>90%),HPLC-MS?387.2[M+H]+

        实施例15.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-乙烯基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=14.63min(>90%),HPLC-MS?371.1[M+H]+

        实施例16.(3aS,6aR)4-咪唑-1-基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=9.20min(>90%),HPLC-MS?411.2[M+H]+

        实施例17.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=16.49-18.34min(>90%),HPLC-MS?427.2[M+H]+

        实施例18.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-唑-5-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.79min(>90%),HPLC-MS?412.2[M+H]+

        实施例19.(3aS,6aR)2-苯基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=16.41-17.80min(>90%),HPLC-MS?428.2[M+H]+

        实施例20.(3aS,6aR)5-苯基噻吩-2-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=16.89min(>90%),HPLC-MS?427.2[M+H]+

        实施例21.(3aS,6aR)喹啉-6-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=9.08min(>90%),HPLC-MS?396.2[M+H]+

        实施例22.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-[1,2,3]噻二唑-4-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=13.41min(>90%),HPLC-MS?429.2[M+H]+

        实施例23.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        HPLC?Rt=13.24min(>90%),HPLC-MS?428.2[M+H]+

        实施例24.(3aS,6aR)2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=10.22min(>90%),HPLC-MS?429.2[M+H]+

        实施例25.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=16.90-18.34min(>90%),HPLC-MS?429.2[M+H]+

        实施例26.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[1S-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=16.14-17.02min(>90%),HPLC-MS?451.2[M+H]+

        实施例27.(3aS,6aR)N-[1S-(3-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.31-16.07min(>90%),HPLC-MS?477.2[M+H]+

        实施例28.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[1S-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=18.37-19.63min(>90%),HPLC-MS?453.1[M+H]+

        实施例29.(3aS,6aR)N-[1S-(4-氟苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.45-18.59min(>90%),HPLC-MS?479.2[M+H]+

        实施例30.(3aS,6aR)吗啉-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=7.38min(>95%),HPLC-MS?404.2[M+H]+.

        实施例31.(3aS,6aR)吗啉-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基酰胺

        HPLC-MS?354.2[M+H]+.

        实施例32.(3aS,6aR)吗啉-4-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC-MS?394.2[M+H]+.

        实施例33.(3aS,6aR)吗啉-4-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=10.07min(>95%),HPLC-MS?388.1[M+H]+.

        实施例34.(2RS,3aS,6aR)4-(2-苄氧基-3-[环己基]丙?;?四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        HPLC?Rt=17.5-19.7min(>90%),HPLC-MS?372.4[M+H]+,390.3[M+H+18]+。

        (a)3-环己基-2S-羟基丙酸的制备(化合物(25),流程4)

        在0℃下,历经1.5小时向搅拌着的(S)-α-氨基环己烷丙酸水合物(5g,26.5mmol)的0.5M硫酸(120ml,60mmol)悬液滴加亚硝酸钠(12.1g,175mmol)的水(40ml)溶液。使混合物历经20小时温热至环境温度。产物用二乙醚萃取(2×25ml),然后将醚层用饱和氯化钠水溶液洗涤(2×25ml),干燥(Na2SO4),在真空中除去溶剂。残余物(5.3g)从二乙醚(10ml)和庚烷(25ml)中重结晶,得到3-环己基-2S-羟基丙酸,为白色固体,收率2.4g(53%)。

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.89-1.35(5H,m)and?1.51-1.86(7H,m)(OCHCH2and?cyclohexyl),4.32(1H,OCHCH2,m)

        (b)2RS-苄氧基-3-环己基丙酸的制备(化合物(26),流程4)

        在0℃下,历经5分钟向搅拌着的3-环己基-2S-羟基丙酸(0.52g,3.0mmol)、二甲基甲酰胺(5ml)与二氯甲烷(5ml)的混合物分两批加入氢化钠(265mg,60%油分散系,6.6mmol)。将混合物在0℃下搅拌5分钟,然后在环境温度下搅拌45分钟。然后加入苄基溴(0.45ml,3.8mmol),将混合物搅拌1小时,然后加入二甲基甲酰胺(5ml)。搅拌4小时后,加入碘化钾(50mg,0.3mmol)。将混合物搅拌20小时,然后在55℃下加热1小时,然后冷却至环境温度,倒入水(15ml)中。然后加入饱和氯化钠水溶液(5ml),混合物用二氯甲烷萃取(5ml,10ml),弃去。含水层用1M盐酸(10ml)酸化,然后用二氯甲烷萃取(2×10ml)。将二氯甲烷层干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂。将残余物(0.55g)溶于二甲基甲酰胺(8ml),然后冷却至0℃,然后加入氢化钠(190mg,60%油分散系,4.75mmol)。将混合物搅拌30分钟,然后加入与聚合物键合的异氰酸酯(380mg,2mmolNg-1)。将混合物在环境温度下搅拌2小时,然后倒入水(15ml)中。然后加入1M盐酸(10ml),产物用二氯甲烷萃取(2×10ml),干燥(Na2SO4),在真空中除去溶剂。残余物经过硅胶快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷0∶1→1∶20的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到2RS-苄氧基-3-环己基丙酸,为无色的油,收率41mg(5.2%)。

        HPLC-MS(单-的主UV峰,Rt=9.47min,261.2[M-H]-,285.2[M+Na]+,547.3[2M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.72-1.03(2H,cyclohexane,m),1.08-1.38(3H,cyclohexane,m),1.45-1.93(6H+2Hβ,cyclohexane,m),3.93-4.18(1Hα,OCHCO),4.35-4.53(1H,CH2O,d,J=11.52Hz),4.68-4.88(1H,CH2O,d,J=11.54Hz),7.20-7.47(5H,ArH,m),9.36(1H,OH,brs).

        在标准条件下偶联化合物(26)与负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例34。

        实施例35.(3aS,6aR)吗啉-4-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=12.15min(>95%),HPLC-MS?434.1[M+H]+.

        实施例36.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.43min(>95%),HPLC-MS?345.2[M+H]+.

        实施例37.(3aS,6aR)N-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.09min(>95%),HPLC-MS?425.1[M+H]+.

        实施例38.(3aS,6aR)N-[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.63min(>90%),HPLC-MS?385.3[M+H]+,791.3[2M+Na]+.

        实施例39.(3aS,6aR)N-[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.85min(>90%),HPLC-MS?379.1[M+H]+.

        实施例40.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=13.23min(>95%),HPLC-MS?361.2[M+H]+.

        实施例41.(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        HPLC?Rt=10.71min(>95%),HPLC-MS?409.1[M+H]+.

        实施例42.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-2-苯基乙酰胺

        HPLC?Rt=13.00min(>95%),HPLC-MS?359.2[M+H]+.

        实施例43.(3aS,6aR)N-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        HPLC?Rt=15.53min(>90%),HPLC-MS?439.1[M+H]+.

        实施例44.(3aS,6aR)N-[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        HPLC?Rt=18.5min(>90%),HPLC-MS?399.2[M+H]+.

        实施例45.(3aS,6aR)N-[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-2-苯基乙酰胺

        HPLC?Rt=13.2min(>90%),HPLC-MS?393.2[M+H]+。

        实施例46.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=8.65min(>95%),HPLC-MS?385.2[M+H]+.

        实施例47.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=10.95min(>90%),HPLC-MS?335.1[M+H]+,357.1[M+Na]+.

        实施例48.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=13.68min(>90%),HPLC-MS?415.1[M+H]+.

        实施例49.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.39min(>90%),HPLC-MS?375.2[M+H]+,771.3[2M+Na]+.

        实施例50.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=11.51min(>90%),HPLC-MS?369.1[M+H]+.

        实施例51.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.07min(>95%),HPLC-MS?377.3[M+H]+.

        实施例52.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=11.75min(>95%),HPLC-MS?401.3[M+H]+.

        实施例53.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=14.01min(>90%),HPLC-MS?351.1[M+H]+,373.1[M+Na]+.

        实施例54.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.51min(>95%),HPLC-MS?431.1[M+H]+.

        实施例55.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.11min(>90%),HPLC-MS?391.1[M+H]+,803.3[2M+Na]+.

        实施例56.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=12.27min(>95%),HPLC-MS?385.1[M+H]+,407.1[M+Na]+,791.2[2M+Na]+.

        实施例57.(3aS,6aR)呋喃-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=12.50min(>95%),HPLC-MS?349.2[M+H]+.

        实施例58.(3aS,6aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        HPLC?Rt=11.72min(>90%),HPLC-MS?423.2[M+H]+.

        实施例59.(3aS,6aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]-3-苯基丙酰胺

        HPLC?Rt=13.46min(>90%),HPLC-MS?373.1[M+H]+,767.3[2M+Na]+.

        实施例60.(3aS,6aR)N-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        HPLC?Rt=16.22min(>90%),HPLC-MS?453.2[M+H]+,475.0[M+Na]+.

        实施例61.(3aS,6aR)N-[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        HPLC-MS?413.2[M+H]+.

        实施例62.(3aS,6aR)N-[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]-3-苯基丙酰胺

        HPLC?Rt=16.68min(>90%),HPLC-MS?407.2[M+H]+,835.2[2M+Na]+.

        实施例63.(3aS,6aR)噻吩-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=13.24min(>95%),HPLC-MS?365.2[M+H]+.

        实施例64.(3aS,6aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=13.10min(>85%),HPLC-MS?451.1[M+H]+,923.2[2M+Na]+.

        实施例65.(3aS,6aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=15.62min(>90%),HPLC-MS?401.1[M+H]+,823.2[2M+Na]+.

        实施例66.(3aS,6aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.47min(>90%),HPLC-MS?481.1[M+H]+,983.2[2M+Na]+.

        实施例67.(3aS,6aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=18.15min(>90%),HPLC-MS?441.2[M+H]+,903.2[2M+Na]+.

        实施例68.(3aS,6aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.58min(>85%),HPLC-MS?435.1[M+H]+,891.2[2M+Na]+.

        实施例69.(3aS,6aR)萘-1-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=12.42min(>85%),HPLC-MS?445.1[M+H]+,911.3[2M+Na]+.

        实施例70.(3aS,6aR)萘-1-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=14.81min(>85%),HPLC-MS?395.2[M+H]+,811.3[2M+Na]+.

        实施例71.(3aS,6aR)萘-1-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.10min(>90%),HPLC-MS?475.2[M+H]+.

        实施例72.(3aS,6aR)萘-1-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.45min(>90%),HPLC-MS?435.2[M+H]+,891.4[2M+Na]+.

        实施例73.(3aS,6aR)萘-1-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.17min(>90%),HPLC-MS?429.1[M+H]+,879.3[2M+Na]+.

        实施例74.(1S,3aS,6aR)吗啉-4-羧酸1-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基酯

        HPLC-MS?395.2[M+H]+,811.4[2M+Na]+.

        (a)3-环己基-2S-羟基丙酸甲基酯的制备(化合物(32),流程6)

        向搅拌着的3-环己基-2S-羟基丙酸(化合物(25),1.31g,7.6mmol)的甲醇(35ml)溶液滴加三甲代甲硅烷基氯(1.78ml,14.0mmol)。将混合物在室温下搅拌20小时,然后在真空中除去溶剂,得到淡黄色油(1.38g)。粗油经过硅胶色谱纯化,用正庚烷∶乙酸乙酯(4∶1)的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到3-环己基-2S-羟基丙酸甲基酯,为无色的油,收率1.26g(89%)。HPLC-MS(单一的主峰Rt=7.43min,187.14[M+H]+,395.2[2M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.84-1.04(2H,CH2(cyclohexane),m),1.09-1.36(3H,CH2(cyclohexane),CH(cyclohexane),m),1.45-1.77(7H,CH2(cyclohexane),CH(cyclohexane),m),1.80-1.90(1Hβ,m),2.72(1H,OH,d,J=5.99Hz),3.80(3H,CH3O,s),4.20-4.31(1Hα,m).

        (b)吗啉-4-羧酸1-羧基-2-环己基乙基酯的制备(化合物(33),流程6)

        向3-环己基-2S-羟基丙酸甲基酯(化合物(32),0.7g,4.03mmol)加入光气溶液(33.6ml,20%甲苯溶液),然后加入6滴二甲基甲酰胺。将混合物在环境温度下搅拌16小时,然后在真空中除去溶剂。将残余物与甲苯共沸(3×20ml),溶于无水二氯甲烷(11ml)。将溶液冷却至0℃,然后加入吗啉(0.86g,9.85mmol)。将混合物搅拌2小时,然后在二氯甲烷(30ml)与0.5M盐酸(30ml)之间分配。将二氯甲烷层用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)、饱和氯化钠水溶液(30ml)洗涤,干燥(Na2SO4),在真空中除去溶剂。残余物经过硅胶色谱纯化,用乙酸乙酯∶庚烷1∶1洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到吗啉-4-羧酸2-环己基-1-甲氧羰基乙基酯(0.13g,10%),为一种油。向冰水冷却的吗啉-4-羧酸2-环己基-1-甲氧羰基乙基酯(110mg,0.367mmol)的二烷(1.5ml)溶液加入氢氧化锂一水合物(17.5mg,0.418mmol)的水(0.76ml)溶液。将混合物在环境温度下搅拌1小时,然后用水(10ml)稀释。将含水层用二乙醚萃取(2×10ml),弃去,然后用6M盐酸酸化至pH=2。产物用二乙醚萃取(2×10ml),然后合并醚层,用饱和氯化钠水溶液(10ml)洗涤,干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂,得到吗啉-4-羧酸1-羧基-2-环己基乙基酯,为白色固体,收率0.11g(100%,以酯计)。TLC(单一斑点,Rf=0.20,甲醇∶二氯甲烷1∶9),HPLC-MS(单一的主峰,Rt=7.614min,286.2[M+H]+,287.2[M+2H]+,593.3[2M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.75-1.00(2H,CH2(cyclohexane),m),1.02-1.28(4H,CH2(cyelohexane),m),1.33-1.46(1H,CH(cyclohexane),m),1.50-1.79(6H,CH2(cyclohexane),m),3.28-3.73(8H,CH2OCH2?and?CH2NCH2,m),4.92-5.02(1Hα,m),5.99(1H,OH,brs).

        在标准条件下偶联化合物(33)与负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例74。

        实施例75.(3aS,6aR)4-[2-(4-叔丁基苄硫基)-4-甲基戊?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        HPLC?Rt=21.3-23.4min(>80%),HPLC-MS?404.4[M+H]+.

        (a)2R-溴-4-甲基戊酸的制备(化合物(28),流程5)

        在0℃下,历经5小时向搅拌着的D-亮氨酸(8.75g,67mmol)、溴化钾(29.75g,0.25mol)与浓硫酸(8.6ml)在水(100ml)中的混合物滴加亚硝酸钠(5.1g,73mmol)的水(15ml)溶液。将混合物在0℃下搅拌30分钟,然后在环境温度下搅拌20小时。产物用二乙醚萃取(2×150ml),然后合并醚层,用饱和氯化钠水溶液萃取(2×100ml),干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂。残余物经过硅胶快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷1∶50→1∶20的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到2R-溴-4-甲基戊酸(28),为无色的油,收率1.60g(12.3%)。TLC(单一斑点,Rf=0.2,甲醇∶二氯甲烷1∶20)。另外,得到第二批略微不纯的产物(5.2g,40%)。

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.95?and?0.99(both?3H,CH3CH,d,J=6.55Hz),1.77-1.89(1H,CH3CH,m),1.93(2Hβ,m),4.31(1Hα,t,J=7.7Hz),9.3(1H,CO2H,brs).

        (b)2S-(4-叔丁基苄硫基)-4-甲基戊酸的制备(化合物(30),流程5)

        将2R-溴-4-甲基戊酸(化合物(28),1.1g,5.6mmol)与(4-(叔丁基)苯基)甲硫醇(1.0g,5.6mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液用氮净化5分钟,然后冷却至0℃。历经1分钟滴加三乙胺(0.79ml,5.7mmol),然后将混合物在环境温度下搅拌两天。在真空中除去溶剂,残余物经过硅胶快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷0∶1→1∶20的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到残余物,经过硅胶快速色谱纯化,用乙酸乙酯∶庚烷2∶5洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到2S-(4-叔丁基苄硫基)-4-甲基戊酸(30),为无色的油,收率150mg(9%)。TLC(单一斑点,Rf=0.2,庚烷∶乙酸乙酯5∶2),分析型HPLC,主峰Rt=22.117min,HPLC-MS(主UV峰Rt=11.072min,317.2[M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.70and?0.85(both?3H,CH3CH,d,J=6.3),1.29(9H,(CH3)3C,s),1.44-1.51(1H,CH3CH,m),1.62-1.75(2Hβ,m),3.15-3.20(1Hα,m),3.81?and?3.88(both?1H,SCH2,d,J=13.2Hz),7.25-7.35(4H,aromatic).

        在标准条件下偶联化合物(30)与负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例75。

        实施例76.(3aS,6aR)4-[3-环己基-2S-(呋喃-2-基甲磺?;?丙?;鵠四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        HPLC?Rt=12.8-15.1min(>90%),HPLC-MS?410.1[M+H]+,841.2[2M+Na]+.

        (a)(R)-α-溴环己烷丙酸的制备

        在0℃下,历经4小时向搅拌着的(R)-α-氨基环己烷丙酸(1g,5.8mmol)、溴化钾(2.3g,19.2mmol)与浓硫酸(0.66ml)在水(7ml)中的混合物滴加亚硝酸钠(0.45g,6.5mmol)的水(1.2ml)溶液。将混合物在0℃下搅拌5小时,然后在环境温度下搅拌16小时。产物用二乙醚萃取(4×20ml),然后合并醚层,用饱和氯化钠水溶液洗涤(2×50ml),干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂。残余物经过硅胶色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷1∶50→1∶20的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到(R)-α-溴环己烷丙酸,为淡黄色油0.374g(27%)。TLC(单一斑点,Rf=0.45,含10%甲醇的二氯甲烷),HPLC-MS(单一的主峰Rt=8.88min,234.1/236.1[M+H]+,257.2/259.2[M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.83-1.88(11H,CH(cyclohexane),CH2(cyclohexane),m),1.89-2.05(2Hβ,m),4.32-4.44(1Hα,m).

        (b)3-环己基-2S-(呋喃-2-基甲硫基)丙酸的制备(化合物(41),流程9)

        将(R)-α-溴环己烷丙酸(0.37g,1.58mmol)和呋喃-2-基甲硫醇(0.18g,1.58mmol)溶于二甲基甲酰胺(10ml),用氮净化10分钟。将溶液冷却至0℃,然后历经1分钟滴加三乙胺(0.22ml,1.58mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟,然后在环境温度下搅拌16小时。在真空中除去溶剂,残余物经过硅胶色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷1∶100作为洗脱剂。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到3-环己基-2S-(呋喃-2-基甲硫基)丙酸(41),为浅褐色油,收率142mg(33%)。分析型HPLC峰Rt=18.68min,TLC(单一斑点,Rf=0.45,含10%甲醇的二氯甲烷),HPLC-MS(单一的主峰Rt=9.53min,291.0[M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.68-0.89(2H,CH2(cyclohexane),m),0.97-1.77(11H,CH(cyclohexane),CH2(cyclohexane),m),3.21-3.32(1Hα,t,J=7.79Hz),3.69-3.79(1H,CH2S,d,J=14.79Hz),3.84-3.94(1H,CH2S,d,J=14.8Hz),6.15-6.28(2H,furan?H-3?and?H-4,d,J=27.34Hz),7.30(1H,furan?H-5,s).

        在标准条件下偶联化合物(41)与负载了的构件-连接剂构建体(22)。将中间体负载了的硫醚(1.2μmol齿轮)用间氯过苯甲酸(5eq,65%试剂,1.6mg)的二氯甲烷(200μl)氧化5小时,然后是标准的洗涤,再裂解,得到实施例76。

        实施例77.(3aS,6aR)2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)丁烷-1,4-二酮

        HPLC-MS?393.1[M+H]+,807.3[2M+Na]+.

        (a)2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸甲基酯的制备

        在0℃氩下,向搅拌着的2R-(环己基甲基)琥珀酸1-甲基酯(化合物(35),1.0g,4.38mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺.HCl(1.12g,5.69mmol)和1-羟基苯并三唑一水合物(0.87g,5.69mmol)。将混合物搅拌25分钟,然后历经1分钟滴加吗啉(0.7ml,8.76mmol),继续在环境温度下搅拌16小时。产物用乙酸乙酯(200ml)萃取,然后用1.0M盐酸(3×100ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×100ml)、水(100ml)和饱和氯化钠水溶液(100ml)洗涤,干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂,得到2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸甲基酯,为灰白色固体,收率1.22g(94%)。HPLC-MS(单峰Rt=7.91min,298.1[M+H]+,617.3[2M+Na]+).

        (b)2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸的制备(化合物(36),流程7)

        在0℃下,向搅拌着的2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸甲基酯(1.21g,4.06mmol)的四氢呋喃(55ml)与甲醇(27ml)溶液加入氢氧化锂一水合物(0.51g,12.18mmol)的水(27ml)溶液。将混合物在环境温度下搅拌1小时,然后用水(100ml)稀释。含水层用二乙醚萃取(2×50ml),弃去,然后用1M盐酸酸化至pH=1-2。产物用二氯甲烷萃取(3×50ml),然后合并醚层,用水(2×50ml)、饱和氯化钠水溶液(2×50ml)洗涤,干燥(MgSO4),在真空中除去溶剂,得到残余物。残余物经过硅胶色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷1∶100→3∶100的梯度洗脱。合并适当的部分,在真空中除去溶剂,得到2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-4-氧代-丁酸(36),为白色固体,收率0.82g(71%)。HPLC-MS(单峰Rt=6.769min,284.2[M+H]+,589.2[2M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.77-0.90(2H,CH2(cyclohexane),m),1.05-1.40(4H,CH2(cyclohexane),m),1.50-1.90(7H,CH(cyclohexane)CH2(cyclohexane),m),2.30-2.44(2Hβ,m),2.64-2.77(1Hα,m),2.96-3.10(1H,OH,brs),3.40-3.78(8H,CH2OCH2?and?CH2NCH2,m).

        在标准条件下偶联化合物(36)与负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例77。

        实施例78.(3aS,6aR)4-(2-联苯-3-基-4-甲基戊?;?四氢呋喃并[3,2-b]吡咯-3-酮

        HPLC?Rt=19.09-20.76min(>90%),HPLC-MS?378.4[M+H]+

        (a)联苯-3-基-乙酸甲基酯的制备(化合物(38),流程8)

        向3-溴苯基乙酸(10g,46.5mmol)的甲醇(100ml)溶液加入浓硫酸(588μl)。将混合物回流1.5小时,然后冷却至环境温度,在减压下蒸发,得到残余物。将残余物再次溶于二乙醚(500ml),用水(2×100ml)、盐水(100ml)洗涤,干燥(MgSO4),然后在减压下蒸发,得到3-溴苯基乙酸甲基酯(10.65g)。将3-溴苯基乙酸甲基酯溶于甲苯(117ml),然后加入苯基代硼酸(6.8g,55.69mmol),然后加入碳酸钠水溶液(93ml,2M)和四(三苯膦)钯(1.6g,1.41mmol)。将混合物搅拌过夜,然后冷却至环境温度,加入饱和氯化铵水溶液(100ml)。将混合物用乙酸乙酯萃取(2×200ml),干燥(Na2SO4),在减压下蒸发,得到残余物。残余物经过二氧化硅(200g)快速色谱纯化,用乙酸乙酯∶庚烷(3∶48)作为洗脱剂,得到联苯-3-基乙酸甲基酯,收率10.5g(99%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.24,含10%乙酸乙酯的庚烷),分析型HPLC?Rt=19.55min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=9.35min,227.1[M+H]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K)3.76(2H,s,CH2CO2CH3),3.77(3H,s,OCH3),7.34-7.66(9H,m,biphenyl-3-yl).

        (b)联苯-3-基乙酸的制备

        向联苯-3-基乙酸甲基酯(11.43g,50.57mmol)的甲醇(265ml)溶液加入水(39ml),然后加入氢氧化锂一水合物(4.2g,101.5mmol)。将混合物在环境温度下搅拌2小时,然后在减压下除去有机层。将混合物用稀盐酸(1M,80ml)酸化,用氯仿萃取(2×100ml),干燥(MgSO4),在减压下蒸发,得到联苯-3-基乙酸,为白色固体,收率10.6g(99%),分析型HPLC?Rt=16.565min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=7.91min,213.1[M+H]+)。

        δH(400MHz,CDCl3at?298K)3.77(2H,s,CH2CO2CH3),7.28-7.52(9H,m,biphenyl-3-yl).

        (c)2RS-联苯-3-基-4-甲基戊-4-烯酸的制备

        在-78℃下,向二异丙氨基化锂(36.4ml,2M己烷溶液)的无水四氢呋喃(84ml)溶液滴加联苯-3-基乙酸(7.0g,33mmol)的无水四氢呋喃(84ml)溶液。使混合物温热至0℃,搅拌40分钟。然后将混合物冷却至-78℃,迅速加入3-溴-2-甲基丙烯(4.97ml)。将混合物在-78℃下搅拌1小时,然后加入水(28ml),在减压下除去有机层。然后将混合物用盐酸(6M,14ml)酸化,用乙酸乙酯萃取(3×100ml),干燥(MgSO4),在减压下蒸发,得到残余物。残余物经过二氧化硅(400g)快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷(3∶97)作为洗脱剂,得到不纯的2-联苯-3-基-4-甲基戊-4-烯酸(8.3g)。经过二氧化硅(400g)快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷(1.5∶98.5)洗脱,得到纯的2-联苯-3-基-4-甲基戊-4-烯酸,收率5.27g(60%),TLC(单一UV斑点,Rf=0.28,含5%甲醇的二氯甲烷),分析型HPLC?Rt=19.99min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=9.57min,267.1[M+H]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),1.765(3H,s,CH3),2.53(1H,dd,J=6.6?and?14.7Hz,3-H1),2.91(1H,dd,J=8.9?and?14.7Hz,3-H1),3.92(1H,dd,J=6.6?and?8.9Hz,2-H),4.79(2H,d,J=10.7Hz,5-H2),7.30-7.62(9H,m,biphenyl-3-yl).

        (d)2RS-联苯-3-基-4-甲基戊酸的制备(化合物(39),流程8)

        在0℃下,向2-联苯-3-基-4-甲基戊-4-烯酸(1g,3.76mmol)的乙醇(40ml)溶液分批加入披钯碳(10%,300mg)。然后引入氢气氛,使混合物温热至环境温度。将混合物搅拌18小时,然后除去氢气氛,通过C盐过滤混合物,催化剂用乙醇(40ml)洗涤。合并有机滤液,在减压下浓缩,得到残余物,经过二氧化硅(150g)快速色谱纯化,用甲醇∶二氯甲烷(1∶99)作为洗脱剂,得到2RS-联苯-3-基-4-甲基戊酸,收率980mg(98%),TLC(单一UV斑点,Rf=0.45,含5%甲醇的二氯甲烷),分析型HPLC?Rt=20.92min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=10.15min,269.1[M+H]+,291.1[M+Na]+).

        δH(400MHz,CDCl3?at?298K),0.93(6H,d,J=6.6Hz,2x?CH3),1.52-1.57(1H,m,4-H1),1.71-1.76(1H,m,3-H1),1.97-2.05(1H,m,3-H1),3.66(1H,t,J=7.8Hz,2-H1),7.32-7.60(9H,m,biphenyl-3-yl).

        在标准条件下偶联化合物(39)与负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例78。

        实施例79.(3aS,6aR)4-甲基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=13.74-14.85min(>90%),HPLC-MS?359.2[M+H]+.

        实施例80.(3aS,6aR)4-甲氧基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.95-13.87min(>90%),HPLC-MS?375.2[M+H]+.

        实施例81.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[1S-(4-溴苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=18.40-19.10min(>90%),HPLC-MS?513.2/515.2[M+H]+.

        实施例82.(3aS,6aR)4-叔丁基-N-[1S-(4-甲氧基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡咯-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.50-18.31min(>90%),HPLC-MS?465.2[M+H]+.

        实施例83(通式(II)的实例).(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        如下分8个步骤制备所需的双环构件(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯。

        (1)顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        向剧烈搅拌着的冰冷却的碳酸钠(22.90g,217.1mmol)的水(200ml)溶液加入顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-2-羧酸(通过商业上可得到的3-羟基吡啶甲酸的氢化作用获得,参见Drummond,J.等,J.Med.Chem.,32,2116-2128,1989)(15.0g,103.4mmol)。加入1,4-二烷(100ml),得到澄清的淡黄色溶液。历经1小时加入9-芴基甲基氯甲酸酯(27.52g,108.4mmol)的1,4-二烷(100ml)溶液,然后除去冰冷却装置,将混合物在RT下搅拌另外1小时。加入另外的水(150ml),反应混合物用氯仿洗涤(2×250ml),合并有机层,抛去。含水相用1N?HCl酸化至~pH2,得到浓稠的不透明混合物。将酸化的含水混合物用氯仿萃取(2×500ml),新的澄清的含水相弃去。合并不透明的氯仿层,干燥(Na2SO4),过滤,在真空中浓缩,得到白色泡沫,收率30.2g(82.2mmol,79.5%)。TLC(次要UV斑点,Rf=0.58,主要UV斑点Rf=0.25,甲醇∶氯仿1∶4),分析型HPLC主峰Rt=16.990min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=7.976min,368.0[M+H]+,390.0[M+Na]+。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δC(DMSO-d6?at?298K);23.29/23.57(d,Cδ),28.89(d,Cγ),40.19(d,Cε),47.59(u,Fmoc?C-9),59.11/59.43(u,Cα),67.34(u,Cβ),67.75/67.87(d,Fmoc?CH2),121.13(u,Fmoc?C-4?and?C-5),126.90/127.02(u,Fmoc?C-1?andC-8),128.11(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.68(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.73(q,Fmoc?C-4’?and?C-5’),144.58/144.76(q,Fmoc?C-1’?and?C-8’),155.71/156.23(q,OCON),172.37/172.63(COOH).

        (2)顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在迪安-斯塔克设备中,将顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(28.2g,76.7mmol)溶于甲苯(200ml)。加入烯丙醇(50ml),然后加入对甲苯磺酸.水合物(15.1g,78.2mmol)。将混合物回流1小时,冷却,加入CHCl3(500ml)。将有机层用NaHCO3(2×250ml)、0.1N?HCl(250ml)和盐水(250ml)洗涤,然后干燥(Na2SO4)。过滤和在真空中浓缩,得到淡黄色可移动的油(35g)。粗油经过硅胶(240g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至无色胶状物,收率20.4g(50.1mmol,65.3%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.20,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=20.003min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=9.473min,408.1[M+H]+,430.1[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3at?298K);1.55(2Hγ?or?2Hδ,d,/9.3),1.81(1Hγ?or?1Hδ,d,J3.2),2.06(1Hγ?or?1Hδ,d,J3.2),2.78/2.92(1Hε,dbt),3.55(1Hβ,dd,J12.6,9.2),3.78(OH,b),3.95/4.11(1Hε,d,J13),4.31(Fmoc?H-9,m),4.49(Fmoc?CH2,m),4.71(2x?COOCH2CH=CH2,m),4.99/5.17(Hα,d,J4.8),5.31(2xCOOCH2CH=CH2,m),5.87(1x?COOCH2CH=CH2,m),7.37(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.47(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.62(2Haromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.83(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).δC(CDCl3?at?298K);23.87/24.11(d,Cδ),30.59(d,Cγ),41.26/41.56(d,Cε),47.62(u,Fmoc?C-9),58.29/59.54(u,Cα),66.44/66.54(d,COOCH2CH=CH2),68.28(d,Fmoc?CH2),69.14/69.42(u,Cβ),119.67/119.90(d,COOCH2CH=CH2),120.43(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.22/125.35(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.48(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.15(u,Fmoc?C-3?and?C-6),131.43/131.57(u,COOCH2CH=CH2),141.73(q,Fmoc?C4’?and?C-5’),144.19/144.38(q,Fmoc?C-1’?and?C-8’),155.67/156.27(q,OCON),171.56(COOCH2CH=CH2).

        (3)顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯被酶拆分为(2R,3S)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯和(2S,3R)(3-乙酰氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯

        将顺式-外消旋-(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(19.6g,48.1mmole)、脂酶PS(25g,ex?Amano?Enzyme?Inc.)、乙酸乙烯酯(300ml)和异丙醚(200ml)在38℃下搅拌5天后,HPLC表明有2个峰处于平衡(52%∶48%,表明转化率95%),通过C盐(3cm×10cm床)过滤反应混合物。C盐床用氯仿洗涤(3×250ml),合并有机滤液,在真空中浓缩至粘性黄褐色油(23.0g)。粗油经过硅胶(300g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→1∶2的梯度洗脱。鉴别了两个主要部分,在真空中浓缩。

        产物1.(2S,3R)(3-乙酰氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯

        粘性、非常淡的黄色的油,收率9.5g(21.1mmol,43.9%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.40,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=22.633min,HPLC-MS(单一的主W峰Rt=10.714min,450.1[M+H]+,472.1[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.25-1.32/1.52-1.70/1.72-2.00(2Hγ+2Hδ,bm),2.05-2.15(OCOCH3,bs),3.35-3.58(1Hε,m),3.98-4.10/4.18-4.22(1Hε,dd),4.24-4.31(Fmoc?H-9,m),4.32-4.52(Fmoc?CH2,m),4.60-4.82(2xCOOCH2CH=CH2,m),4.92-4.99(Hβ,m),5.22-5.32(Hα,m),5.28-5.32/5.34-5.41(2x?COOCH2CH=CH2,dd,J17.2),5.89-6.00(1xCOOCH2CH=CH2,m),7.30-7.37(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.38-7.46(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.59-7.76(2H?aromatic,Fmoc?H-1and?H-8),7.78-7.80(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5,d,J7.5).δC(CDCl3?at?298K);21.22(u,OCOCH3),23.01(d,Cδ),25.54(d,Cγ),40.51/40.88(d,Cε),47.44(u,Fmoc?C-9),55.55(u,Cα),66.08(d,COOCH2CH=CH2),68.30/68.65(d,Fmoc?CH2),69.21/69.59(u,Cβ),118.94/119.22(d,COOCH2CH=CH2),120.31(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.34/125.49(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.43(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.04(u,Fmoc?C-3?and?C-6),131.93(u,COOCH2CH=CH2),141.61(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.15(q,Fmoc?C-1’?and?C-8’),155.50/156.36(q,OCON),169.42/169.91/170.37(COOCH2CH=CH2+OCOCH3).

        产物2.(2R,3S)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯

        白色结晶性固体,收率9.05g(22.2mmol,46.1%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.20,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=19.970min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=9.450min,408.1[M+H]+,430.1[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.47-1.61(1Hγ+1Hδ,m),1.71-1.81(1Hδ,b),2.02-2.11(1Hγ,b),2.71-2.81/2.84-2.94(1Hε,dt),3.54-3.59(Hβ,m),3.70-3.82(OH,b),3.93-3.96/4.10-4.16/4.11(1Hε,d,J10),4.24-4.31(Fmoc?H-9,m),4.40-4.56(Fmoc?CH2,m),4.61-4.78(2x?COOCH2CH=CH2,m),4.98/5.18(Hα,d,J5.0),5.25-5.37(2x?COOCH2CH=CH2,m),5.86-5.96(1xCOOCH2CH=CH2,m),7.30-7.34(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.41-7.48(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.53-7.62(2H?aromatic,Fmoc?H-1and?H-8),7.79-7.81(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);23.87/24.12(d,Cδ),30.60(d,Cγ),41.27/41.57(d,Cε),47.62(u,Fmoc?C-9),58.29/59.54(u,Cα),66.44/66.54(d,COOCH2CH=CH2),68.28(d,Fmoc?CH2),69.15/69.42(u,Cβ),119.67/119.91(d,COOCH2CH=CH2),120.42(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.22/125.35(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.48(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.15(u,Fmoc?C-3?and?C-6),131.42/131.57(u,COOCH2CH=CH2),141.73(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.12/144.37(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.67/156.26(q,OCON),171.57(COOCH2CH=CH2).

        (4)(2S,3R)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        将(2S,3R)(3-乙酰氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(4.5g,10mmol)溶于烯丙醇(50ml),加入浓H2SO4(200μl),加热至回流达24小时。将混合物冷却,加入EtOAc(250ml),用NaHCO3(250ml)、盐水(250ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到黄褐色油(4.2g)。粗油经过硅胶(170g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶性固体,收率3.0g(7.37mmol,73.7%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.20,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=19.474min,HPLC-MS(单一的主UV峰Rt=9.507min,408.2[M+H]+,430.2[M+Na]+)。1H和13CNMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.46-1.59(1Hγ+1Hδ,m),1.74-1.81(1Hδ,b),2.01-2.10(1Hγ,b),2.70-2.82/2.88-2.99(1Hε,dt),3.49-3.62(Hβ,m),3.70-3.80(OH,b),3.90-3.94/4.09-4.14(1Hε,dd),4.26-4.32(Fmoc?H-9,m),4.41-4.58(Fmoc?CH2,m),4.60-4.80(2x?COOCH2CH=CH2,m),4.96-4.98/5.17-5.18(Hα,dd,J4.8),5.25-5.42(2x?COOCH2CH=CH2,m),5.82-5.97(1xCOOCH2CH=CH2,m),7.30-7.38(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7).7.42-7.48(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.55-7.63(2H?aromatic,Fmoc?H-1and?H-8),7.79-7.84(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);23.86/24.12(d,Cδ),30.62(d,Cγ),41.28/41.57(d,Cε),47.62(u,Fmoc?C-9),58.29/59.54(u,Cα),66.43/66.54(d,COOCH2CH=CH2),68.27(d,Fmoc?CH2),69.15/69.43(u,Cβ),119.69/119.91(d,COOCH2CH=CH2),120.42(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.22/125.35(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.47(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.14(u,Fmoc?C-3?and?C-6),131.43/131.57(u,COOCH2CH=CH2),141.73(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.12/144.37(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.67/156.26(q,OCON),171.57(COOCH2CH=CH2).

        (5)(2S,3R)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在50ml玻璃压力试管内,将(2S,3R)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.75g,4.30mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml),冷却至-78℃。将异丁烯气体(~10ml)压缩至溶液内,加入浓H2SO4(100μl)。加入搅拌棒,密封试管,除去冷却装置,在RT下搅拌72小时。将已密封的试管冷却至-78℃,加入N-甲基吗啉(200μl,1eqw.r.t.cH2SO4),温热至RT,开启密封,搅拌2小时。加入二氯甲烷(75ml),将有机层用NaHCO3(75ml)和盐水(75ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到淡黄褐色油(1.91g)。粗油经过硅胶(100g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯5∶1→3∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至浓稠澄清的油,收率1.59g(3.43mmol,79.8%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.50,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=24.123min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=11.91min,408.2[M+H-But]+,486.3[M+Na]+,949.5[2M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.23(9x?C(CH3)3,s),1.46-1.98(2Hγ+2Hδ,m),3.37-3.45/3.46-3.57(1Hε,dt),3.61-3.72(Hβ,b),3.90-3.99/4.02-4.10(1Hε,dd),4.20-4.72(Fmoc?H-9+Fmoc?CH2+2x?COOCH2CH=CH2,bm),4.89/5.01(Hα,dd,J6.3),5.24(1x?COOCH2CH=CH2,d,J10.5),5.38(1xCOOCH2CH=CH2,d),5.88-5.99(1x?COOCH2CH=CH2,m),7.29-7.36(2Haromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.38-7.47(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.56-7.69(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.76-7.81(2H?aromatic,FmocH-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);23.69/23.99(d,Cδ),28.38/28.65(u,C(CH3)3),28.75(d,Cγ),40.40/40.72(d,Cε),47.61(u,Fmoc?C-9),58.36/58.47(u,Cα),65.67(d,COOCH2CH=CH2),67.82(u,Cβ),67.99/68.13(d,Fmoc?CH2),74.97(q,C(CH3)3),118.44/118.57(d,COOCH2CH=CH2),120.40(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.39/125.48(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.46(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.10(u,Fmoc?C-3?and?C-6),132.49(u,COOCH2CH=CH2),141.71(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.14/144.30(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.44/157.00(q,OCON),170.43/171.05(COOCH2CH=CH2).

        (6)(2S,3R)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在搅拌下,将(2S,3R)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.52g,3.29mmol)溶于无水二氯甲烷(25ml)。加入四(三苯膦)钯(0)(76mg,0.066mmol,0.02eq),然后加入苯基硅烷(0.71g,0.622ml,6.58mmol,2eq)。1小时后,加入二氯甲烷(150ml),将有机层用0.01N?HCl(150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到深灰色固体(2.05g)。粗固体经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯2∶1→1∶2的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶,收率0.97g(2.29mmol,69.6%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=21.310min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=10.254min,368.2[M+H-But]+,446.2[M+Na]+,869.3[2M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.32/1.40(9x?C(CH3)3,ds),1.42-1.58(1Hγ+1Hδ,m),1.72-1.80(1Hδ,bm),1.82-1.96(1Hγ,bm),2.76-2.82/2.90-2.97(1Hε,dt),3.70-3.84(Hβ,b),3.90-4.07(1Hε,dd),4.22-4.32(Fmoc?H-9),4.40-4.58(Fmoc?CH2,bm),4.59-4.61/5.02-5.04(Hα,dd,J5.7),7.29-7.36(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.39-7.43(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.53-7.67(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.76-7.81(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5),10.90-11.10(COOH,bs).

        δC(CDCl3?at?298K);23.71/24.23(d,Cδ),28.21/28.28(u,C(CH3)3),30.58/30.72(d,Cγ),40.49/40.79(d,Cε),47.58/47.63(u,Fmoc?C-9),58.20/58.43(u,Cα),67.78/68.32(u,Cβ),68.69/68.88(d,Fmoc?CH2),78.48/78.67(q,C(CH3)3),120.31(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.16/125.27/125.50/125.53(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.42/127.46/127.59(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.03/128.10(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.55/141.69/141.79(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.06/144.12/144.38/144.48(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.73/156.49(q,OCON),169.26/169.52(COOH).

        (7)(2S,3R)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在搅拌下,将(2S,3R)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(830mg,1.96mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml)。将反应用氮冲洗,冷却至-15℃。历经15分钟同时加入异丁基氯甲酸酯(296mg,2.16mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液和N-甲基吗啉(397mg,3.92mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液,每次加入0.5ml。向活化的氨基酸溶液加入醚性重氮甲烷(在60℃下,将diazald(2.5g,~8mmol)的二乙醚(40ml)溶液倒在氢氧化钠(2.75g)的水(4.3ml)/乙醇(8.6ml)溶液上而生成),在RT下搅拌24小时。加入乙酸(~2ml)以猝灭反应,然后加入叔丁基甲基醚(100ml),将有机层用水洗涤(3×150ml),然后干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到浓稠黄色的油(1.02g)。粗油无需纯化即可用于下一阶段。TLC(单一UV斑点,Rf=0.40,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=18.887min(50.8%)加大量次要的峰,HPLC-MS(2个主UV峰,Rt=9.095min,364.2[M+H]+,749.2[2M+Na]+和Rt=10.856min,420.2[M+H-N2]+,470.2[M+Na]+,917.3[2M+Na]+)。

        注意到HPLC-MS分析后,m/z?364.2相当于所需双环产物(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯。

        (8)环化为(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯

        向(2S,3R)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1000mg,~2mmol)加入氯化锂(844mg,20mmol)的水(5ml)与乙酸(20ml)溶液。有气体放出,黄色油性固体在1小时内溶解,得到事实上无色的溶液。90分钟后,加入氯仿(150ml),将有机层用NaHCO3(2×150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到淡黄色胶状物(920mg)。粗胶状物经过硅胶(135g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→1∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶性固体,收率370mg(1.02mmol,51.9%,以原料酸计)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=18.734min,HPLC-MS(单一UV峰,Rt=9.051min,364.2[M+H]+,386.2[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.29-1.49(1Hγ+1Hδ,m),1.61-1.80(1Hδ,bm),2.06-2.19(1Hγ,bm),2.50-2.62/2.63-2.80(1Hε,m).3.96(1Hε,b),3.97(COCH2A,d,J16.3),4.15(Fmoc?H-9,bt),4.25-4.34(Hβ,b),4.36-4.60(FmocCH2+COCH2B,bm),4.75-4.82/5.11-5.19(Hα,bd),7.30-7.36(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.41-7.49(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.52-7.68(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.75-7.85(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);21.75/22.04(d,Cδ),26.60(d,Cγ),41.40/41.66(d,Cε),47.59(u,Fmoc?C-9),60.42(u,Cα),67.54(d,Fmoc?CH2),68.21/68.39(d,COCH2O),72.61(u,Cβ),120.39(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.43(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.51(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.14(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.73(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.30(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.79/156.35(q,OCON),211.10/211.4(q,COCH2O).

        遵照流程2的一般细节,如下转化所需双环构件(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯为构件-连接剂构建体:

        将(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(250mg,0.689mmol)溶于含有乙酸钠。三水合物(141mg,1.03mmol,1.5eq)的乙醇(12.0ml)与水(1.75ml)的混合物。加入4-[[(肼基羰基)氨基]甲基]环己烷羧酸。三氟乙酸盐(227mg,0.689mmol,1.0eq,Murphy,A.M.等,J.Am.Chem.Soc.,114,3156-3157,1992),将混合物回流4小时。加入氯仿(150ml),将有机层用HCl洗涤(150ml,~pH3),干燥(Na2SO4),在真空中浓缩,得到粗的构件-连接剂构建体,为澄清粘性油。收率350mg,分析型HPLC2个峰Rt=17.101(74.7%)和18.547min(25.3%)(顺式/反式几何异构体),HPLC-MS(2x?UV峰,Rt=8.037和8.972min,561.2[M+H]+)。粗的构建体直接用于构建体负载。

        遵照流程2的一般细节,如下连接所需构件-连接剂构建体与固相,得到负载了的构件-连接剂构建体:

        将构件-连接剂构建体(0.595mmol)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,226.0mg,0.596mmol)、1-羟基苯并三唑。水合物(HOBT,92mg,0.596mmol)溶于二甲基甲酰胺(3ml),加入N-甲基吗啉(NMM,131μl,1.197mmol)。预活化5分钟后,加入游离胺齿轮(160×1.2μmol),然后加入二甲基甲酰胺(17.5ml),放置过夜。然后向游离胺冠(18×10μmol)加入用尽了的偶联溶液,放置过夜。标准的洗涤和分析表明在两者情况下负载都是定量的。

        遵照流程2的一般细节,如下在固相上加工所需负载了的构件-连接剂构建体:

        利用标准的Fmoc去?;?,再先后与Fmoc-Cys(SBzl)-OH和吗啉-4-羰基氯偶联,将负载了的构建体加工成实施例83(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺。裂解粗实施例,加以分析(参见一般技术)。HPLCRt=15.59min(>80%),HPLC-MS?449.2[M+H]+

        如实施例83所述制备下列实施例(84-130),与所需试剂偶联,得到全长分子。

        实施例84.(3aS,7aR)萘-2-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.79min(>80%),HPLC-MS?459.3[M+H]+.

        实施例85.(3aS,7aR)4-二甲氨基-N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=10.98min(>80%),HPLC-MS?452.2[M+H]+.

        实施例86.(3aS,7aR)萘-1-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=17.71min(>80%),HPLC-MS?409.2[M+H]+.

        实施例87.(3aS,7aR)萘-2-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=18.28min(>80%),HPLC-MS?409.2[M+H]+.

        实施例88.(3aS,7aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        HPLC?Rt=13.16min(>80%),HPLC-MS?492.2[M+H]+.

        实施例89.(3aS,7aR)2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=10.45min(>80%),HPLC-MS?493.2[M+H]+.

        实施例90.(3aS,7aR)联苯-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.38min(>80%),HPLC-MS?485.2[M+H]+.

        实施例91.(3aS,7aR)4-叔丁基-N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.90min(>80%),HPLC-MS?485.2[M+H]+.

        实施例92.(3aS,7aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.00min(>80%),HPLC-MS?491.2[M+H]+.

        实施例93.(3aS,7aR)N-[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.07min(>80%),HPLC-MS?493.2[M+H]+.

        实施例94.(3aS,7aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-5-噻吩-2-基烟酰胺

        HPLC?Rt=15.82min(>80%),HPLC-MS?442.2[M+H]+.

        实施例95.(3aS,7aR)2-吡啶-3-基噻唑-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=12.55min(>80%),HPLC-MS?443.2[M+H]+.

        实施例96.(3aS,7aR)联苯-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=19.88min(>80%),HPLC-MS?435.2[M+H]+.

        实施例97.(3aS,7aR)4-叔丁基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=20.42min(>80%),HPLC-MS?415.2[M+H]+.

        实施例98.(3aS,7aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-噻吩-2-基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=19.60min(>80%),HPLC-MS?441.2[M+H]+.

        实施例99.(3aS,7aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]-4-三氟甲氧基苯甲酰胺

        HPLC?Rt=19.66min(>80%),HPLC-MS?443.2[M+H]+.

        实施例100.(3aS,7aR)2-甲基-5-苯基呋喃-3-羧酸[3-甲基1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=20.48min(>80%),HPLC-MS?439.2[M+H]+.

        实施例101.(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC-MS?418.2[M+H]+.

        实施例102.(3aS,7aR)N-[1S-(4-羟基苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基)苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.71min(>85%),HPLC-MS?409.2[M+H]+.

        实施例103.(3aS,7aR)萘-1-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.88min(>85%),HPLC-MS?459.2[M+H]+.

        实施例104.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=11.14min(>85%),HPLC-MS?399.2[M+H]+.

        实施例105.(3aS,7aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.99min(>85%),HPLC-MS?465.2[M+H]+.

        实施例106.(3aS,7aR)苯并[b]噻吩-3-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.58min(>85%),HPLC-MS?465.2[M+H]+,951.3[2M+Na]+.

        实施例107.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.44min(>85%),HPLC-MS?383.2[M+H]+.

        实施例108.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.34min(>80%),HPLC-MS?399.2[M+H]+.

        实施例109.(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC-MS?368.2[M+H]+.

        实施例110.(3aS,7aR)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.42min(>85%),HPLC-MS?359.2[M+H]+.

        实施例111.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=13.74min(>85%),HPLC-MS?349.2[M+H]+.

        实施例112.(3aS,7aR)苯并[b]噻吩-2-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=18.52min(>85%),HPLC-MS?415.2[M+H]+,851.3[2M+Na]+.

        实施例113.(3aS,7aR)4-二甲氨基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=13.55min(>85%),HPLC-MS?402.2[M+H]+.

        实施例114.(3aS,7aR)苯并[b]噻吩-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=18.26min(>85%),HPLC-MS?415.2[M+H]+.

        实施例115.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=14.80min(>85%),HPLC-MS?365.2[M+H]+.

        实施例116.(3aS,7aR)N-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.78min(>90%),HPLC-MS?439.2[M+H]+,899.3[2M+Na]+.

        实施例117.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=16.41min(>85%),HPLC-MS?429.2[M+H]+,451.2[M+Na]+.

        实施例118.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.23min(>85%),HPLC-MS?445.2[M+H]+,911.2[2M+Na]+.

        实施例119.(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)乙基]酰胺

        HPLC-MS?408.3[M+H]+,430.3[M+Na]+.

        实施例120.(3aS,7aR)N-[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=18.47min(>85%),HPLC-MS?399.2[M+H]+,819.2[2M+Na]+.

        实施例121.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.12min(>85%),HPLC-MS?389.2[M+H]+,411.2[2M+Na]+.

        实施例122.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.95min(>85%),HPLC-MS?405.2[M+H]+,831.2[2M+Na]+.

        实施例123.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.80min(>80%),HPLC-MS?375.2[M+H]+,771.3[2M+Na]+.

        实施例124.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=16.72min(>85%),HPLC-MS?391.1[M+H]+,803.3[2M+Na]+.

        实施例125.(3aS,7aR)呋喃-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=15.06min(>90%),HPLC-MS?363.2[M+H]+,747.4[2M+Na]+.

        实施例126.(3aS,7aR)噻吩-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=15.75min(>85%),HPLC-MS?379.2[M+H]+,779.3[2M+Na]+.

        实施例127.(3aS,7aR)吗啉-4-羧酸1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基酯

        HPLC-MS?409.2[M+H]+,839.5[2M+Na]+.

        如实施例74所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(33)与(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例127。

        实施例128.(2S,3aS,7aR)4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲硫基)丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        HPLC-MS?392.1[M+H]+,805.2[2M+Na]+.

        如实施例76所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(41)与(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例128。

        实施例129.(2S,3aS,7aR)4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲磺?;?丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        HPLC?Rt=19.015min(>%),HPLC-MS?424.1[M+H]+,869.2[2M+Na]+。

        如实施例76所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(41)与(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22)。将中间体负载了的硫醚(1.2μmol齿轮)在二氯甲烷(200μl)中用间氯过苯甲酸(5eq,65%试剂,1.6mg)氧化5小时,然后是标准的洗涤和裂解,得到实施例129。

        实施例130.(3aS,7aR)2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)丁烷-1,4-二酮

        HPLC-MS?407.1[M+H]+,833.3[2M+Na]+.

        如实施例77所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(36)与(3aS,7aR)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例130。

        实施例131(通式(II)实例).(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        如下在进一步的4个步骤中从(2R,3S)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯制备所需的双环构件(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯。

        (1)(2R,3S)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在50ml玻璃压力试管内,将(2R,3S)(3-羟基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.75g,4.30mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml),冷却至-78℃。将异丁烯气体(~10ml)压缩至溶液内,加入浓H2SO4(100μl)。加入搅拌棒,密封试管,除去冷却装置,在RT下搅拌72小时。将已密封的试管冷却至-78℃,加入N-甲基吗啉(200μl,1eqw.r.t.cH2SO4),温热至RT,开启密封,搅拌2小时。加入二氯甲烷(75ml),将有机层用NaHCO3(75ml)和盐水(75ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到淡黄褐色油(1.93g)。粗油经过硅胶(100g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯5∶1→3∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至浓稠澄清的油,收率1.48g(3.19mmol,74.3%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.50,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=24.083min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=11.996min,408.2[M+H-But]+,486.3[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.24(9x?C(CH3)3,s),1.51-1.90(2Hγ+2Hδ,m),3.38-3.48/3.49-3.58(1Hε,dt),3.62-3.74(Hβ,b),3.95-4.02/4.06-4.14(1Hε,dd),4.24-4.78(Fmoc?H-9+Fmoc?CH2+2x?COOCH2CH=CH2,bm),4.88/5.01(Hα,dd,J5.8),5.25(1x?COOCH2CH=CH2,d,J5.7),5.37(1xCOOCH2CH=CH2,d,J16.8),5.88-6.00(1x?COOCH2CH=CH2,m),7.28-7.39(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.39-7.46(2H?aromatic,Fmoc?H-3and?H-6),7.57-7.71(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.78-7.86(2Haromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);23.69/24.00(d,Cδ),28.38(u,C(CH3)3),28.65(d,Cγ),40.41/40.72(d,Cε),47.61(u,Fmoc?C-9),58.46(u,Cα),65.67(d,COOCH2CH=CH2),67.82(u,Cβ),68.12(d,Fmoc?CH2),74.93(q,C(CH3)3),118.46/118.57(d,COOCH2CH=CH2),120.40(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.39(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.46(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.10(u,Fmoc?C-3and?C-6),132.49(u,COOCH2CH=CH2),141.71(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.12/144.35(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),156.24(q,OCON),170.42/171.06(COOCH2CH=CH2).

        (2)(2R,3S)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在搅拌下,将(2R,3S)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸2-烯丙基酯1-(9H-芴-9-基甲基)酯(1.42g,3.07mmol)溶于无水二氯甲烷(25ml)。加入四(三苯膦)钯(0)(71mg,0.062mmol,0.02eq),然后加入苯基硅烷(0.66g,0.581ml,6.14mmol,2eq)。1小时后,加入二氯甲烷(150ml),将有机层用0.01N?HCl(150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到深灰色固体(2.0g)。粗固体经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯2∶1→1∶2的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶,收率1.07g(2.53mmol,82.3%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯1∶1),分析型HPLC?Rt=21.306min,HPLC-MS(单一的主UV峰,Rt=10.269min,368.2[M+H-But]+,446.2[M+Na]+,869.3[2M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.32/1.41(9x?C(CH3)3,ds),1.43-1.59(1Hγ+1Hδ,m),1.70-1.81(1Hδ,bm),1.82-1.99(1Hγ,bm),2.75-2.82/2.90-2.97(1Hε,dt),3.73-3.85(Hβ,b),3.92-4.05(1Hε,dd),4.23-4.32(Fmoc?H-9),4.40-4.58(Fmoc?CH2,bm),4.60-4.62/5.02-5.04(Hα,dd,J5.7),7.29-7.36(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.39-7.44(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.54-7.67(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.77-7.82(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5),10.80-11.15(COOH,bs).

        δC(CDCl3?at?298K);23.71/24.24(d,Cδ),28.20/28.27(u,C(CH3)3),30.60/30.73(d,Cγ),40.50/40.79(d,Cε),47.58/47.63(u,Fmoc?C-9),58.20/58.44(u,Cα),67.77/68.33(u,Cβ),68.67/68.87(d,Fmoc?CH2),78.48/78.67(q,C(CH3)3),120.30(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.16/125.27/125.52(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.42/127.48/127.59(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.04/128.10(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.57/141.69/141.78(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.06/144.11/144.36/144.47(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.73/156.49(q,OCON),169.26/169.55(COOH).

        (3)(2R,3S)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯的制备

        在搅拌下,将(2R,3S)(3-叔丁氧基)哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(830mg,1.96mmol)溶于无水二氯甲烷(20ml)。将反应用氮冲洗,冷却至-15℃。历经15分钟同时加入异丁基氯甲酸酯(296mg,2.16mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液和N-甲基吗啉(397mg,3.92mmol)的无水二氯甲烷(2.5ml)溶液,每次加入0.5ml。向活化的氨基酸溶液加入醚性重氮甲烷(在60℃下,将diazald(2.5g,~8mmol)的二乙醚(40ml)溶液倒在氢氧化钠(2.75g)的水(4.3ml)/乙醇(8.6ml)溶液上而生成),在RT下搅拌3小时。加入乙酸(~3ml)以猝灭反应,然后加入叔丁基甲基醚(100ml),将有机层用水洗涤(3×150ml),然后干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到粘性淡黄色油(910mg)。粗油经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯4∶1→3∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至淡黄色油/固体,收率560mg(1.25mmol,63.9%)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.35,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=18.754min,HPLC-MS(UV峰,Rt=9.095min,364.2[M+H]+,386.1[M+Na]+,749.2[2M+Na]+和Rt=10.856min,420.2[M+H-N2]+,470.2[M+Na]+,917.3[2M+Na]+)。

        注意到HPLC-MS分析后,m/z?364.2相当于所需双环产物(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯。

        1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.29/1.46(9x?C(CH3)3,ds),1.40-1.85(2Hγ+2Hδ,bm),3.05/3.38(1Hε,dt),3.39-3.44/3.62-3.69(Hβ,dm),3.90-3.97(1Hε,dd),4.05-4.07/4.78-4.83(Hα,bm),4.24-4.33(Fmoc?H-9),4.36-4.42/4.46-4.51(1xFmoc?CH2,dm),4.61-4.68(1x?Fmoc?CH2,m),4.89/5.90(COCH=N2,s+bs),7.28-7.39(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.40-7.44(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6),7.53-7.67(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.76-7.81(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);23.94/24.51(d,Cδ),28.38/28.53(u,C(CH3)3),29.23/29.84(d,Cγ),40.83/41.45(d,Cε),47.57/47.64(u,Fmoc?C-9),55.50/56.38(u,COCH=N2),61.69/62.66(u,Cα),66.85/68.20(d,Fmoc?CH2),69.35/69.61(u,Cβ),75.11/75.54(q,C(CH3)3),120.29/120.32(u,Fmoc?C-4and?C-5),124.85/125.25/125.53(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.46/127.59(u,Fmoc?C-2?and?C-7),127.97/128.03/128.07(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.62/141.69/141.73(q,Fmoc?C-4’and?C-5’),144.24/144.31/144.50/144.61(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),155.68/156.89(q,OCON),191.90/192.37(COCH=N2).

        (4)环化为(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯

        向(2R,3S)(3-叔丁氧基)-2-(2-重氮乙?;?哌啶-1,2-二羧酸1-(9H-芴-9-基甲基)酯(520mg,1.16mmol)加入氯化锂(494mg,11.6mmol)的水(3ml)与乙酸(12ml)溶液。有气体放出,黄色油性固体在1小时内溶解,得到事实上无色的溶液。90分钟后,加入氯仿(150ml),将有机层用NaHCO3(2×150ml)、盐水(150ml)洗涤,干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶剂,得到白色结晶性固体(390mg)。粗固体经过硅胶(75g)纯化,用庚烷∶乙酸乙酯3∶1→2∶1的梯度洗脱。合并所需部分,在真空中浓缩至白色结晶性固体,收率340mg(0.94mmol,47.7%,以原料酸计)。TLC(单一UV斑点,Rf=0.25,庚烷∶乙酸乙酯2∶1),分析型HPLC?Rt=18.563min,HPLC-MS(单一UV峰,Rt=9.074min,364.2[M+H]+,386.2[M+Na]+)。1H和13C?NMR分析显示在3°酰胺键存在顺式与反式几何异构体。

        δH(CDCl3?at?298K);1.20-1.38(1Hγ+1Hδ,m),1.51-1.68(1Hδ,bm),1.96-2.08(1Hγ,bm),2.40-2.52/2.53-2.67(1Hε,m),3.87(COCH2A,d,J16.5),3.85-3.95(1Hε,b),4.09(Fmoc?H-9,bt),4.14(Hβ,b),4.21-4.46(Fmoc?CH2+COCH2B,bm),4.62-4.70/5.00-5.09(Hα,2x?b),7.23-7.27(2H?aromatic,Fmoc?H-2?and?H-7),7.32-7.35(2H?aromatic,Fmoc?H-3?and?H-6).7.41-7.53(2H?aromatic,Fmoc?H-1?and?H-8),7.69-7.71(2H?aromatic,Fmoc?H-4?and?H-5).

        δC(CDCl3?at?298K);22.08(d,Cδ),26.61(d,Cγ),41.67(d,Cε),47.58(u,Fmoc?C-9),60.54(u,Cα),67.55(d,Fmoc?CH2),68.40(d,COCH2O),72.61(u,Cβ),120.39(u,Fmoc?C-4?and?C-5),125.42(u,Fmoc?C-1?and?C-8),127.51(u,Fmoc?C-2?and?C-7),128.14(u,Fmoc?C-3?and?C-6),141.73(q,Fmoc?C-4,and?C-5’),144.16(q,Fmoc?C-1’and?C-8’),156.20(q,OCON),211.64(q,COCH2O)。

        遵照流程2的一般细节,如下转化所需双环构件(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯为构件-连接剂构建体:

        将(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯(290mg,0.80mmol)溶于含有乙酸钠。三水合物(163mg,1.198mmol,1.5eq)的乙醇(14.0ml)与水(2.0ml)的混合物。加入4-[[(肼基羰基)氨基]甲基]环己烷羧酸.三氟乙酸盐(263mg,0.80mmol,1.0eq,Murphy,A.M.等,J.Am.Chem.Soc.,114,3156-3157,1992),将混合物回流4小时。加入氯仿(150ml),将有机层用HCl洗涤(150ml,~pH3),干燥(Na2SO4),在真空中浓缩,得到粗的构件-连接剂构建体,为灰白色结晶性固体。收率450mg,分析型HPLC?2个峰Rt=17.109(67.6%)和18.565min(26.3%)(顺式/反式几何异构体),HPLC-MS(2x?UV峰,Rt=8.069和9.050min,561.2[M+H]+)。粗的构建体直接用于构建体负载。

        遵照流程2的一般细节,如下连接所需构件-连接剂构建体与固相,得到负载了的构件-连接剂构建体:

        将构件-连接剂构建体(0.680mmol)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU,258mg,0.680mmol)、1-羟基苯并三唑。水合物(HOBT,105mg,0.680mmol)溶于二甲基甲酰胺(3ml),加入N-甲基吗啉(NMM,150μl,1.36mmol)。预活化5分钟后,加入游离胺齿轮(190×1.2μmol),然后加入二甲基甲酰胺(17.5ml),放置过夜。然后向游离胺冠(18×10μmol)加入用尽了的偶联溶液,放置过夜。标准的洗涤和分析表明在两者情况下负载都是定量的。

        遵照流程2的一般细节,如下在固相上加工所需负载了的构件-连接剂构建体:

        利用标准的Fmoc去?;?,再先后与Fmoc-Cys(SBzl)-OH和吗啉-4-羰基氯偶联,将负载了的构建体加工成实施例91(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺。裂解粗实施例,加以分析(参见一般技术)。HPLCRt=15.59min(>80%),HPLC-MS?449.2[M+H]+

        如实施例131所述制备下列实施例(132-156),与所需试剂偶联,得到全长分子。

        实施例132.(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC-MS?418.2[M+H]+.

        实施例133.(3aR,7aS)N-[1S-(4-羟基苄基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=12.67min(>80%),HPLC-MS?409.1[M+H]+.

        实施例134.(3aR,7aS)萘-1-羧酸[1S-(4-羟基苄基)-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=14.87min(>80%),HPLC-MS?459.2[M+H]+.

        实施例135.(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC-MS?368.2[M+H]+,390.2[M+Na]+.

        实施例136.(3aR,7aS)N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=15.40min(>80%),HPLC-MS?359.2[M+H]+.

        实施例137.(3aR,7aS)呋喃-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=13.74min(>85%),HPLC-MS?349.2[M+H]+,371.2[2M+Na]+.

        实施例138.(3aR,7aS)苯并[b]噻吩-2-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=18.52min(>80%),HPLC-MS?415.2[M+H]+,851.3[2M+Na]+.

        实施例139.(3aR,7aS)4-二甲氨基-N-[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=13.55min(>80%),HPLC-MS?402.2[M+H]+,825.3[2M+Na]+.

        实施例140.(3aR,7aS)苯并[b]噻吩-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=18.26min(>80%),HPLC-MS?415.2[M+H]+,851.3[2M+Na]+.

        实施例141.(3aR,7aS)噻吩-3-羧酸[3-甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=14.80min(>80%),HPLC-MS?365.2[M+H]+,387.2[M+Na]+.

        实施例142.(3aR,7aS)N-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=17.78min(>80%),HPLC-MS439.2[M+H]+,899.3[2M+Na]+

        实施例143.(3aR,7aS)呋喃-3-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=16.41min(>85%),HPLC-MS?429.6[M+H]+,451.5[M+Na]+.

        实施例144.(3aR,7aS)噻吩-3-羧酸-[1R-苄硫基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.23min(>80%),HPLC-MS?445.1[M+H]+,911.2[2M+Na]+.

        实施例145.(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC-MS?408.2[M+H]+.

        实施例146.(3aR,7aS)N-[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]苯甲酰胺

        HPLC?Rt=18.47min(>80%),HPLC-MS?399.2[M+H]+,819.3[2M+Na]+.

        实施例147.(3aR,7aS)呋喃-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=17.12min(>80%),HPLC-MS?389.2[M+H]+.

        实施例148.(3aR,7aS)噻吩-3-羧酸[1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=18.05min(>85%),HPLC-MS?405.2[M+H]+,831.2[2M+Na]+.

        实施例149.(3aR,7aS)呋喃-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=15.84min(>85%),HPLC-MS?375.2[M+H]+,771.3[2M+Na]+.

        实施例150.(3aR,7aS)噻吩-3-羧酸[1S-环戊基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基]酰胺

        HPLC?Rt=16.78min(>85%),HPLC-MS?391.1[M+H]+,803.3[2M+Na]+.

        实施例151.(3aR,7aS)呋喃-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=15.05min(>85%),HPLC-MS?363.2[M+H]+,747.4[2M+Na]+.

        实施例152.(3aR,7aS)噻吩-3-羧酸[3,3-二甲基-1S-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羰基)丁基]酰胺

        HPLC?Rt=15.76min(>80%),HPLC-MS?379.2[M+H]+,779.3[2M+Na]+.

        实施例153.(3aR,7aS)吗啉-4-羧酸1S-环己基甲基-2-氧代-2-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)乙基酯

        HPLC-MS?409.2[M+H]+,839.5[2M+Na]+.

        如实施例127所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(33)与(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例153。

        实施例154(2S,3aR,7aS)4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲硫基)丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        HPLC-MS?392.1[M+H]+,805.3[2M+Na]+.

        如实施例128所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(41)与(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例154。

        实施例155.(2S,3aR,7aS)4-[3-环己基-2-(呋喃-2-基甲磺?;?丙?;鵠六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-3-酮

        HPLC?Rt=18.8-19.4min(>90%),HPLC-MS?424.1[M+H]+,869.2[2M+Na]+.

        如实施例129所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(41)与(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22)。将中间体负载了的硫醚(1.2μmol,齿轮)在二氯甲烷(200μl)中用间氯过苯甲酸(5eq,65%试剂,1.6mg)氧化5小时,然后是标准的洗涤和裂解,得到实施例155。

        实施例156.(3aR,7aS)2R-环己基甲基-4-吗啉-4-基-1-(3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-基)丁烷-1,4-二酮

        HPLC-MS?407.2[M+H]+,833.3[2M+Na]+.

        如实施例130所述,在标准条件下(除去Fmoc后)偶联化合物(36)与(3aR,7aS)3-氧代-六氢呋喃并[3,2-b]吡啶-4-羧酸9H-芴-9-基甲基酯,即负载了的构件-连接剂构建体(22),然后裂解,得到实施例156。

        实施例A.半胱氨酸蛋白酶活性测定

        可以在大量基于文献的生化测定法之一中试验本发明的化合物,这些测定法被设计用来阐明化合物抑制作用的特征。来自这些类型测定法的数据能够测量和量化化合物的效力和大鼠的反应。单独的这种信息或者与其他信息联合将可用于测定产生给定药理作用的化合物的量。

        一般材料和方法

        除非有相反陈述,所有一般的化学品和生化药品均购自SigmaChemical?Company,Poole,Dorset,U.K.或Fisher?Scientific?UK,Loughborough,Leicestershire,U.K.。吸光度测定是这样进行的,在平底96孔平板(Spectra;Greiner?Bio-One?Ltd.,Stonehouse,Gloucestershire,U.K.)上,利用SpectraMax?PLUS384平板读数器(Molecular?Devices,Crawley,U.K.)。荧光高通量测定是在384孔微量滴定板(Corning?Costar?3705plates,Fisher?Scientific)或96孔U形底Microfluor?Wl微量滴定板(Thermo?Labsystems,Ashford,Middlesex,U.K.)中进行的。利用SpectraMax?Gemini荧光平板读数器(Molecular?Devices)监测荧光测定。关于采用7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)或7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)荧光团的底物,激发波长为365nm,发射波长为450nm,荧光平板读数器用AMC校准。关于采用3-氨基-苯甲酰(Abz)荧光团的底物,激发波长为310nm,发射波长为445nm,荧光平板读数器用3-氨基-苯甲酰胺(Fluka)校准。除非有相反指示,所有肽酶底物均购自Bachem?UK,St.Helens,Merseyside,UK。利用已公开的方法(Atherton?&?Sheppard,SolidPhase?Peptide?Synthesis,IRL?Press,Oxford,U.K.,1989),在Incenta?Limited利用荧光共振能量转移工艺合成底物(即基于FRET的底物),采用Abz(2-氨基苯甲酰)作为荧光供体,3-硝基酪氨酸[Tyr(NO2)]作为荧光猝灭剂(Meldal,M.and?Breddam,K.,Anal.Biochem.,195,141-147,1991)。羟乙基哌嗪乙磺酸盐(HEPES)、三羟甲基氨基甲烷(tris)、双-tris-丙烷和所有生物清洁剂(例如CHAPS、zwittergent等)均购自CN?Biosciences?UK,Beeston,Nottinghamshire,U.K。甘油购自Amersham?Pharmacia?Biotech,Little?Chalfont,Buckinghamshire,U.K。底物或抑制剂的储备溶液被制成在100%二甲基亚砜(DMSO)(Rathburns,Glasgow,U.K.)中的10mM溶液,根据需要适当稀释。在所有情况下,测定中的DMSO浓度都保持在小于1%(vol./vol.)。

        测定方案基于在先文献(表1;Barrett,A.J.,Rawlings,N.D.and?Woessner,J.F.,1998,Handbook?of?Proteolytic?Enzymes,Academic?Press,London和其中的参考文献),根据需要加以调整,以适应当地的测定方案。根据需要加入酶,以引发反应和活性,这是根据底物转化为产物时的荧光变化加以判断的,监测随时间的变化。所有测定法都是在25±1℃下进行的。

        表1.本文所述酶测定法是按照在先文献进行的。??酶??缓冲液??底物??参考文献??组织蛋白酶B??I??Z-Phe-Arg-AMC??a,b??组织蛋白酶H??II??Bz-Phe-Val-Arg-AMC??a,b??组织蛋白酶L??I??Ac-Phe-Arg-AMC??b,c??组织蛋白酶S??I??Boc-Val-Leu-Lys-AMC??c,d??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶1??III??Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC??e??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶2??III??Z-Val-Asp-Val-Ala-Asp-AFC??f??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶3??III??Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC??g,h??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶4??III??Suc-Tyr-Val-Ala-Asp-AMC??f??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶5??III??Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶6??III??Ac-Val-Glu-Ile-Asp-AMC??i,j.k??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶7??III??Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶8??III??Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-AMC??1??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶9??III??Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC??天冬氨酸特异性半胱氨??酸蛋白酶10??III??Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-AMC??克鲁兹蛋白酶??IV??D-Val-Leu-Lys-AMC??m.n??CPB2.8ΔCTE??XI??Pro-Phe-Arg-AMC??q??金黄色葡萄球菌细胞外??半胱氨酸肽酶??I??Abz-Ile-Ala-Ala-Pro-Tyr(NO2)??-Glu-NH2??o??梭菌蛋白酶??Z-Gly-Gly-Arg-AMC??p??FMDV?LP??V??Abz-Arg-Lys-Leu-Lys-Gly-Ala??-Gly-Ser-Tyr(NO2)-Glu-NH2??r??胰蛋白酶??VI??Z-Gly-Gly-Arg-AMC??s??钙蛋白酶μ??VII??Abz-Ala-Asn-Leu-Gly-Arg-Pro??-Ala-Leu-Tyr(NO2)-Asp-NH2??t??钙蛋白酶m??VIII??Abz-Lys-Leu-Cys(Bzl)-Phe-Ser??-Lys-Gln-Tyr(NO2)-Asp-NH2??t??组织蛋白酶K??IX??Z-Phe-Arg-AMC??u??组织蛋白酶X??X??v,w

        I:10mM?BTP,pH?6.5,含有1mM?EDTA,5mM?2-巯基乙醇和1mM?CaCl2

        II:10mM?BTP,pH?6.5,含有1mM?EDTA,142mM?NaCl,1mM?DTT,1mM?CaCl2,0.035mM?Zwittergent?3-16

        III:50mM?HEPES,pH?7.2,10%甘油,0.1%CHAPS,142mM?NaCl,1mM?EDTA,5mM?DTT

        IV:100mM磷酸钠,pH?6.75,含有1mM?EDTA和10mM?L-半胱氨酸

        V:50mM?tris乙酸盐,pH?8.4,含有1mM?EDTA,10mM?L-半胱氨酸和0.25%(w/v)CHAPS

        VI:10mM?HEPES,pH?8.0,含有5mM?CaCl2

        VII:10mM?HEPES,pH?7.5,含有2mM?2-巯基乙醇和100μM?CaCl2

        VIII:10mM?HEPES,pH?7.5,含有2mM?2一巯基乙醇和200μM?CaCl2

        IX:100mM乙酸钠,pH?5.5,含有10mM?L-半胱氨酸和1mM?EDTA

        X:100mM乙酸钠,pH?5.5,含有10mM?L-半胱氨酸,0.05%(w/v)Brij35和1mM?EDTA

        XI:100mM乙酸钠,pH?5.5,含有10mM?L-半胱氨酸,142mM氯化钠和1mM?EDTA

        aBarrett,A.J.,Biochem.J.,187,909-912,1980

        bBarrett,A.J.and?Kirschke,H.,Methods?Enzymol.,80,535-561,1981

        cQuibell,M.and?Taylor,S.,WO0069855,2000

        dBromme,D.,Steinert,.,Freibe,S.,Fittkau,S.,Wiederanders,B.,and?Kirschke,H.,Biochem.J.,264,475-481,1989

        eRano,T.A.,et.al.,Chem.Biol.,4,149,1997

        fTalanian,R.V.,et.al.,J.Biol.Chem.,272,9677,1997

        gLazebnik,Y.A.,Kaufmann,S.H.,Desnoyers,S.,Poirer,G.G.and?Eamshaw,W.C.,Nature.,371,768-774,1994

        hHan,Z.,et.al.,J.Biol.Chem.,272,13432,1997

        iTakahashi,A.,et.al.,PNAS,93,8395,1996

        jMartins,L.M.,et.al.,J.Biol.Chem.,272,7421,1997

        kNagata,S.,Cell.,88,355,1997

        lHarris,J.L.,et.al.,J.Biol.Chem.,273,27364,1998

        mCazzulo,J.J.,Cazzulo?Franke,M.C.,Martinez,J.and?Franke?de?Cazzulo,B.M.,Biochim.Biophys.Acta.,1037,186-191,1990

        nCazzulo,J.J.,Bravo,M.,Raimondi,A.,Engstrom,U.,Lindeberg,G.and?Hellman,U.,Cell?Mol.Biol.,42,691-696,1996

        oPotempa,J.,Dubin,A.,Korzus,G.and?Travis,J.,Biochem.J.,263,2664-2667,1988

        pKembhavi,A.A.,Buttle,D.J.,Rauber,P.and?Barrett,A.J.,FEBS?Lett.,283,277-280,1991

        qAlves,L.C.,et.al.,Mol.Biochem.Parasitol,116,1-9,2001.

        rGuamé,et.al.,J.Mol.Biol.,302,1227-1240,2000.

        sHalfon?and?Craik,(Barret,Rawlings?and?Woessner,eds.),in?Handbook?ofProteolytic?Enzymes,Academic?Press,London,12-21,1998.

        tSasaki,et.al.,(1984),J.Biol.Chem.,259,12489-12494,1984.

        uBossard,M.J.,et.al.,J.Biol.Chem.,21,12517-12524,1996

        vSantamaria,I.,et.al.,J.Biol.Chem.,273,16816-16823,1998

        wKlemencic,J,et.al.,Eur.J.Biochem.,267,5404-5412,2000

        克鲁兹锥虫克鲁兹蛋白酶肽酶活性测定

        得自克鲁兹锥虫Dm28短膜虫期的野生型克鲁兹蛋白酶是从Dr.Julio?Scharfstein(Instituto?de?Biofisica?Carlos?ChagasFilho,Universidade?Federal?do?Rio?de?Janeiro,Rio?de?Janeiro,Brazil)得到的。使用2.5nM酶,在含有1mM?EDTA和10mM?L-半胱氨酸的100mM磷酸钠pH?6.75中进行活性测定。使用Ac-Phe-Arg-AMC(KMapp≈12μM)和D-Val-Leu-Lys-AMC(KMapp≈4μM)作为底物。习惯上,Ac-FR-AMC的使用浓度等于KMapp,D-Val-Leu-Lys-AMC的使用浓度为25μM。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        Leishmania?mexicana半胱氨酸蛋白酶B(CPB)肽酶活性测定

        没有C末端延长的野生型重组CPB(即CPB2.8ΔCTE;Sanderson,S.J.等,Biochem.J.,347,383-388,2000)是从Dr.JeremyMottram(Wellcome?Centre?for?Molecular?Parasitology,TheAnderson?College,University?of?Glasgow,Glasgow,U.K.)得到的。使用0.25nM酶,在含有1mM?EDTA、200mM?NaCl和10mM?DTT的100mM乙酸钠pH?5.5中进行活性测定(Alves,L.C.等,Mol.Biochem.Parasitol,116,1-9,2001)。使用Pro-Phe-Arg-AMC(KMapp≈38μM)作为底物,浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        组织蛋白酶肽酶活性测定

        牛组织蛋白酶S、人组织蛋白酶L、人组织蛋白酶H和人组织蛋白酶B是从CN?Biosciences得到的。重组人组织蛋白酶S、人组织蛋白酶K和人组织蛋白酶X是从Dr.Boris?Turk(Josef?StefanInstitute,Ljubljana,Slovenia)得到的。除非有相反陈述,所有肽酶活性测定都是在含有1mM?EDTA、5mM?2-巯基乙醇和1mM?CaCl2的10mM双-tris-丙烷(BTP)pH?6.5中进行的。人组织蛋白酶H活性测定是在10mM?BTP?pH?6.5,142mM?NaCl,1mM?CaCl2,1mM?EDTA,1mM?DTT,0.035mM?Zwittergent?3-16中进行的。人组织蛋白酶K测定是在含有20mM?L-半胱氨酸和1mM?EDTA的100mM乙酸钠pH?5.5中进行的(Bossard,M.J.等,J.Biol.Chem.,21,12517-12524,1996)。人组织蛋白酶X测定是在含有20mM?L-半胱氨酸、0.05%(w/v)Brij?35和1mM?EDTA的100mM乙酸钠pH?5.5中进行的(Santamaria,I.等,J.Biol.Chem.,273,16816-16823,1998;Klemencic,J.等,Eur.J?Biochem.,267,5404-5412,2000)。用在这些测定法中的最终酶浓度是0.5nM牛组织蛋白酶S、1nM组织蛋白酶L、0.1nM组织蛋白酶B、0.25nM组织蛋白酶K、1nM组织蛋白酶X和10nM组织蛋白酶H。关于抑制作用测定,用于组织蛋白酶S、组织蛋白酶L、组织蛋白酶B、组织蛋白酶K和组织蛋白酶H的底物分别是boc-Val-Leu-Lys-AMC(KMapp≈30μM),Ac-Phe-Arg-AMC(KMapp≈20μM),Z-Phe-Arg-AMC(KMapp≈40μM),Z-Leu-Arg-AMC(KMapp≈2μM)和Bz-Phe-Val-Arg-AMC(KMapp≈150μM)。在每种情况下,用在每项测定中的底物浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        胰蛋白酶肽酶活性测定

        使用0.1nM胰蛋白酶,在含有5mM?CaCl2的10mM?HEPES?pH?8.0中进行人胰蛋白酶(碘化级;CN?Biosciences)活性测定。关于抑制作用测定,使用Z-Gly-Gly-Arg-AMC(KMapp≈84μM)作为底物,浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        梭菌蛋白酶肽酶活性测定

        使用0.3nM酶,在含有1mM?EDTA、5mM?2-巯基乙醇和1mM?CaCl2的10mM?BTP?pH?6.5中进行梭菌蛋白酶(Sigma)活性测定。关于抑制作用测定,使用Z-Gly-Gly-Arg-AMC(KMapp≈100μM)作为底物,浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        钙蛋白酶肽酶活性测定

        使用25nM酶,在含有2mM?2-巯基乙醇和CaCl2的10mM?HEPES?pH7.5中进行钙蛋白酶(人红细胞μ-钙蛋白酶和猪肾m-钙蛋白酶;CNBiosciences)活性测定(Sasaki等,J.Biol.Chem.,259,12489-12494,1984)。关于μ-钙蛋白酶抑制作用测定,使用含有100μMCaCl2和Abz-Ala-Asn-Leu-Gly-Arg-Pro-Ala-Leu-Tyr(NO2)-Asp-NH2(KMapp≈20μM;Incenta?Limited)的缓冲液作为底物。关于m-钙蛋白酶抑制作用测定,使用含有200μM?CaCl2和Abz-Lys-Leu-Cys(Bzl)-Phe-Ser-Lys-Gln-Tyr(NO2)-Asp-NH2(KMapp≈22μM;Incenta?Limited)的缓冲液作为底物。在两者情况下,用在测定中的底物浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        细胞外金黄色葡萄球菌V8半胱氨酸肽酶(葡菌蛋白酶)活性测定

        金黄色葡萄球菌V8是从Prof.S.Arvidson,KarolinskaInstitute,Stockholm,Sweden得到的。细胞外金黄色葡萄球菌V8半胱氨酸肽酶(葡菌蛋白酶)活性测定是利用部分纯化的金黄色葡萄球菌V8培养上清液(从Dr.Peter?Lambert,Aston?University,Birmingham,U.K.得到)进行的。使用两倍稀释的部分纯化的提取物,在含有1mM?EDTA、5mM?2-巯基乙醇和1mM?CaCl2的10mM?BTP?pH?6.5中进行活性测定。关于抑制作用测定,使用Abz-Ile-Ala-Ala-Pro-Tyr(NO2)-Glu-NH2(KMapp≈117μM;IncentaLimited)作为底物,浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        口蹄疫引导肽酶(FMDV-LP)活性测定

        重组野生型FMDV-LP是从Dr.Tim?Skern(Institut?fürMedizinische?Biochemie,Abteilung?für?Biochemie,UniversttWien,Wien,Austria)得到的。使用10nM酶,在含有1mM?EDTA、10mM?L-半胱氨酸和0.25%(w/v)CHAPS的50mM?tris乙酸盐pH?8.4中进行活性测定。关于抑制作用测定,使用Abz-Arg-Lys-Leu-Lys-Gly-Ala-Gly-Ser-Tyr(NO2)-Glu-NH2(KMapp≈51μM;Incenta?Limited)作为底物,浓度等于KMapp。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶肽酶活性测定

        天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1-10是从CN?Biosciences或BioVision?Inc.(Mountain?View,CA,USA)得到的,所有测定均是在50mM?HEPES;pH?7.2,10%(v/v)甘油,0.1%(w/v)CHAPS,142mMNaCl,1mM?EDTA,5mM二硫苏糖醇(DTT)中进行的,每项测定使用0.1-1U。关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1,使用Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶2,使用Z-Val-Asp-Val-Ala-Asp-AFC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3,使用Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶4,使用Suc-Tyr-Val-Ala-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶5,使用Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶6,使用Ac-Val-Glu-Ile-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶7,使用Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8,使用Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9,使用Ac-Leu-Glu-His-Asp-AMC作为底物;关于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶10,使用Ac-Ile-Glu-Thr-Asp-AMC作为底物(Nicholson,D.W.和Thornberry,N.A.,TIBS,22,299-306,1997;Stennicke,H.R.和Salvesen,G.S.,J.Biol.Chem.,272(41),25719-25723,1997;Talanian,R.V.等,J.Biol.Chem.,272(15),9677-9682,1997;Wolf,B.B.和Green,D.R.,J.Biol.Chem.,274(29),20049-20052,1999)。底物向产物转化的比率得自在一定时间内连续监测的荧光增加的斜率。

        底物的表观宏观结合(Michaelis)常数(KMapp)的测量

        从对酶活性的依赖性计算每种底物的表观宏观结合常数(KMapp),作为底物浓度的函数。将所观察到的比率标在纵座标上,将相关的底物浓度标在横座标上,利用方程1对数据进行直接回归分析(Prism?v?3.02;GraphPad,San?Diego,USA)(Cornish-Bowden,A.Fundamentalsof?enzyme?kinetics,Portland?Press;1995,93-128)。

        vi=Vmaxapp·[S0][S0]+KMapp---(1)]]>

        方程1中,“vi”是所观察到的最初的比率,“Vmaxapp”是在饱和底物浓度下所观察到的最大活性,“KMapp”是底物的表观宏观结合(Michaelis)常数,“[S0]”是最初的底物浓度。

        抑制常数的测量

        抑制作用是可逆的,并且是按照纯竞争性机理发生的,在此基础上测定每种化合物的表观抑制常数(Ki)。利用方程2进行直接回归分析(Prism?v?3.02),从对酶活性的依赖性计算Ki值,作为抑制剂浓度的函数(Cornish-Bowden,A.,1995)。

        vi=Vmaxapp·[S][S]+{KMapp·([I]/Ki)}---(2)]]>

        方程2中,“vi”是所观察到的残留活性,“Vmaxapp”是所观察到的最大活性(也就是没有抑制剂的存在),“KMapp”是底物的表观宏观结合(Michaelis)常数,“[S]”是最初的底物浓度,“Ki”是表观离解常数,“[I]”是抑制剂浓度。

        在表观离解常数(Kiapp)接近酶浓度的情形中,利用方程3所述形式的二次解答计算Kiapp(Morrison,J.F.Trends?Biochem.Sci.,7,102-105,1982;Morrison,J.F.Biochim.Biophys.Acta2?185,269-286,1969;Stone,S.R.和Hofsteenge,J.Biochemistry,25,4622-4628,1986)。

        vi=F{E0-I0-Kiapp+(E0-I0-Kiapp)2+4·Kiapp·E0}2---(3)]]>

        Kiapp=Ki(1+[S0]/KMapp)---(4)]]>

        方程3中,“vi”是所观察到的残留活性,“F”是最大活性(也就是没有抑制剂的存在)与最小酶活性之差,“E0”是总的酶浓度,“Kiapp”是表观离解常数,“I0”是抑制剂浓度。利用固定的酶浓度值,通过非线性回归(Prism)分析标绘曲线。方程4用于解释底物动力学,其中“Ki”是抑制常数,“[S0]”是最初的底物浓度,“KMapp”是底物的表观宏观结合(Michaelis)常数(Morrison,1982)。

        抑制剂与酶反应的二阶速率

        在合适的时候,所观察到的每种化合物与酶反应的速率(kobs)的浓度依赖性是这样分析的,在底物的存在下,在伪一阶条件下测定酶失活的速率(Morrison,J.F.,TIBS,102-105,1982;Tian,W.X.和Tsou,C.L.,Biochemistry,21,1028-1032,1982;Morrison,J.F.和Walsh,C.T.,Meister(Ed.),Advances?in?Enzymol.,61,201-301,1988;Tsou,C.L.,Meister(Ed.),Advances?inEnzymol.,61,381-436,1988)。向含有底物的测定缓冲液加入不同浓度的抑制剂,进行测定。向反应混合物加入酶引发测定,监测荧光随时间的变化。在测定过程期间,底物消耗不到10%。

        利用方程5,通过非线性回归分析(Prism)标绘活性荧光发展曲线(Morrison,1969;Morrison,1982);其中“F”是荧光响应,“t”是时间,“v0”是最初的速度,“vs”是平衡稳态速度,“kobs”是所观察到的伪一阶速率常数,“D”是在零时间时的截距(也就是曲线的纵向位移)。二阶速率常数是从kobs点连线对抑制剂浓度的斜率(即kobs/[I])得到的。为了修正底物动力学,使用方程6,其中“[S0]”是最初的底物浓度,“KMapp”是底物的表观宏观结合(Michaelis)常数。

        kinact=kobs(1+[S0]/KMapp)[I]---(6)]]>

        通过上述测定法试验了本发明化合物,观察到它们表现克鲁兹蛋白酶抑制活性或对可供替代的CA?C1半胱氨酸蛋白酶的抑制活性,体外Ki抑制常数小于或等于100μM。表2给出了大量本发明化合物实例的示范性抑制数据。??实施例号??克鲁兹蛋白酶?牛组织蛋白酶S?人组织蛋白酶L?人组织蛋白酶K??3??0.2?>100?>35?>5??10??>5?>10?>25?0.1??48??>25?0.3?>100?>10??69??>5?>10?0.8?>100

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    本文标题:克鲁兹蛋白酶与其他半胱氨酸蛋白酶的抑制剂.pdf
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