• 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03
    • / 12
    • 下载费用:30 金币  

    重庆时时彩线上技巧: 一种大豆及其制品中异黄酮的分析方法.pdf

    摘要
    申请专利号:

    重庆时时彩单双窍门 www.4mum.com.cn CN201310236278.4

    申请日:

    2013.06.16

    公开号:

    CN103323557A

    公开日:

    2013.09.25

    当前法律状态:

    驳回

    有效性:

    无权

    法律详情: 发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):G01N 30/06申请公布日:20130925|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 30/06申请日:20130616|||公开
    IPC分类号: G01N30/06; G01N30/08 主分类号: G01N30/06
    申请人: 中国科学院成都生物研究所
    发明人: 青琳森; 廖循; 薛莹; 彭树林; 丁立生
    地址: 610041 四川省成都市武侯区人民南路四段九号
    优先权:
    专利代理机构: 代理人:
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201310236278.4

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2015.11.04|||2013.10.30|||2013.09.25

    法律状态类型:

    发明专利申请公布后的驳回|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明属于食品化学技术领域,具体公开了使用表面键合黄芩苷的磁性纳米粒子测定大豆及其制品中大豆异黄酮类成分的含量的方法。首先合成氨基末端磁性纳米粒子和表面键合黄芩苷磁性纳米粒子。然后配制大豆及其制品原始溶液,使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附大豆异黄酮成分,使用外磁场分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,将大豆异黄酮从键合黄芩苷磁性纳米粒子上洗脱下来,使用外磁场将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,然后将上述的洗脱溶液吸取出来,供仪器分析使用。本发明具有操作简便、节能环保的优点。

    权利要求书

    权利要求书
    1.   一种大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征是:使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子在大豆及其制品的溶液中选择性地富集和萃取大豆异黄酮类化合物。

    2.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征在于:所述的大豆制品是指以大豆为主要原料生产的食品、保健品。

    3.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征在于:所述的大豆制品是豆奶、豆浆、豆芽、豆腐、豆腐丝、豆腐皮、豆腐干、腐竹、素火腿、腐乳、豆豉、大豆蛋白胶囊、大豆异黄酮片、大豆异黄酮胶囊或大豆异黄酮口服液。

    4.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征在于:所述大豆异黄酮类化合物为:大豆苷元(daidzein,De)、染料木素(genistein,Ge)、黄豆黄素(glycitein,Gle)、大豆苷(daidzin,Di)、染料木苷(genistin,Gi)和黄豆黄苷(glycitin,Gli)。

    5.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征在于:所述的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子是将氨基末端磁性纳米粒子与黄芩苷反应生成,磁性纳米粒子为超顺磁的纳米四氧化三铁,整个纳米粒子的粒度为1nm~200nm之间,黄芩苷的键合量为4~8%。

    6.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征是:所述的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子的制备方法为:
    首先合成氨基末端磁性纳米粒子:将5~7g1,6?己二胺、1~3g无水醋酸钠和1g的FeC3·6H2O溶解在20~50mL的乙二醇中,于40~60°C搅拌至透明澄清;然后将此溶液转移至聚四氟乙烯内衬的高压釜中190~205°C反应4~8h;用磁铁吸附分离并依次用纯水、乙醇清洗2~4次,最后减压干燥即得到氨基末端磁性纳米粒子;
    然后合成表面键合黄芩苷磁性纳米粒子:将黄芩苷和氨基末端磁性纳米粒子以1:2~1:5的质量比混悬于8~12mL75%的DMSO/磷酸缓冲液(10mM,pH5.5)中,再加入35mg1?(3?二甲基氨基丙基)?3?乙基碳二亚胺和N?羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐,震荡1~5h;用磁铁吸附分离得到的磁性纳米粒子并依次用75%的DMSO和水重新分散清洗2~3次,减压干燥即得表面键合黄芩苷磁性纳米粒子。

    7.   权利要求1所述的大豆及其制品中异黄酮的分析方法,其特征是:具体方法为:
    1)大豆及其制品原始溶液的获得:对于固态的大豆及其制品,粉碎,过5~9号《中国药典》所规定的标准药典筛,取粉末适量,加入0~20%的甲醇/水或乙醇/水至0.001~0.1mg/mL,超声波辅助提取5~30min;对于液态的大豆制品,直接使用该溶液即可;
    2)使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附大豆异黄酮成分:将10~500mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子分散于上述溶液中,充分混合,用力振摇1~10min,使大豆异黄酮类化合物充分吸附在表面键合黄芩苷磁性纳米粒子上;
    3)使用外磁场分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子:使用外磁场将吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子聚集在一起,将所剩溶液倾倒、丢弃;
    4)将大豆异黄酮从键合黄芩苷磁性纳米粒子上洗脱下来:撤去外磁场,加入0.1~1mL洗脱溶剂,充分混合,用力振摇1~10min,使大豆异黄酮类化合物与表面键合黄芩苷磁性纳米粒子分离,而溶解于洗脱溶剂甲醇或乙醇或乙腈或乙酸乙酯或二甲亚砜或N,N?二甲基甲酰胺中;
    5)使用外磁场将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,然后将上述的洗脱溶液吸取出来,供仪器分析使用。

    说明书

    说明书一种大豆及其制品中异黄酮的分析方法
    技术领域
    本发明属于食品化学技术领域,具体公开了使用表面键合黄芩苷的磁性纳米粒子测定大豆及其制品中大豆异黄酮类成分的含量。
    技术背景
    大豆营养极为丰富,是惟一能够代替动物蛋白的植物性食物,对女性尤其是更年期女性的健康十分有益,大豆摄入量较大的亚洲国家(如中国、日本等)妇女比美国妇女的乳腺癌发病率低得多【Coward,L.,N.C.Barnes,et al.Journal of Agricultural and Food Chemistry.1993,41(11):1961?1967】。大豆对女性健康的影响主要决定于其所含的大豆异黄酮,其主要由大豆苷元(daidzein,De)染料木素(genistein,Ge)黄豆黄素(glycitein,Gle)、大豆苷(daidzin,Di)、染料木苷(genistin,Gi)和黄豆黄苷(glycitin,Gli)组成。它是一种结构与雌激素相似、具有雌激素活性的植物雌激素。大豆异黄酮具有双向调节平衡功能,对低雌激素水平者能发挥弱的雌激素样作用,可防治一些和雌激素水平下降有关的病症,如更年期综合征、骨质疏松、血脂升高等;而对于高雌激素水平者,如乳腺癌患者,表现为抗雌激素活性,可防治乳腺癌、子宫内膜癌,预防早老性痴呆。
    在我国,大豆的常见食用方式有大豆本身以及豆奶、豆浆、豆芽、豆腐等多种豆制品形式;而以大豆异黄酮为主要成分的保健食品也已成为一种新型畅销食品,国内外市场上含有大豆异黄酮的保健食品达数十种之多,如威海清华紫光科技生产的金奥力大豆异黄酮胶囊,成都中科生物技术开发有限公司生产的天雌大豆异黄酮营养片、红牛维他命饮料有限公司开发的大豆异黄酮保健饮料、广东九极日用保健品有限公司生产的九极牌丽延口服液等、美国C1ifbar公司开发出添加了大豆异黄酮的运动饮料和美国加州Imagine食品公司开发含大豆异黄酮的能量饮料等。
    不同的豆制品食品,大豆异黄酮的含量不同;而不同的大豆异黄酮类保健品其含量差别更大,甚至有的产品的实际含量远小于标示含量。为了保障消费者的利益,也为企业提供更好的技术支持,因此建立一种简便适用、快速方便大豆异黄酮含量的检测方法很有必要。目前,关于大豆异黄酮的测定方法已有不少文献以及两个国标【GB/T23788?2009《保健食品中大豆异黄酮的测定方法测定高效液相色谱法》和GB/T26625?2011《粮油检验大豆异黄酮含量测定高效液相色谱法》】的报道,但这些方法的样品制备大都是基于有机溶剂提取后离心,选择性低、费时费力;而且,由于液态产品基质极其复杂,因此有机溶剂提取后离心的方法不适合液体产品中大豆异黄酮的测定。为此,部分研究文献提出采用冷冻干燥法制备液体样品,如Toro?Funes等最近发表的论文即先将液态的豆奶冷冻干燥成为固态,然后按照固态样品的方法进行有机溶剂提取【Toro?Funes,N.,et al.Food Chemistry,2012,135(4):2832?2838】。虽然,冷冻干燥法解决了液态产品的测定制样问题,但是该法需要2天的样品制备时间,甚为不便,急需进一步改进。
    最近几年开始发展的磁性固相萃取技术极大地推动了样品前处理领域的进步。申请人曾经申请了黄芩苷修饰的磁性纳米粒子用于黄酮类化合物的富集与分离的专利【一种表面键合黄芩苷磁性纳米粒子及其制备方法和用途.申请号:201010545352】。经过进一步的研究,对表面键合黄芩苷的磁性纳米粒子的合成方法进行了优化和改进,从而得到了粒度更均匀、黄芩苷键合量更大的材料;而且发现其应用于大豆及其制品中大豆异黄酮类化合物的富集与分离。吸附在表面键合黄芩苷磁性纳米粒子表面的大豆异黄酮可以通过外磁场与黄芩苷修饰的磁性纳米粒子本身一起被方便地分离出来,大大提高样品制备的选择性和速率,适合各种状态的样品测定,从而解决了目前存在的问题。
    发明内容
    本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种大豆异黄酮富集和萃取方法,操作简单、效率高、选择性好,并应用于大豆及大豆制品中大豆异黄酮的含量测定。
    本发明提供的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,是将超顺磁的纳米四氧化三铁与黄芩苷反应,生成表面键合黄芩苷的磁性纳米粒子,其结构如附图1所示,其制备方法如下:
    首先合成氨基末端磁性纳米粒子:将5~7g1,6?己二胺、1~3g无水醋酸钠和1g的FeC3·6H2O溶解在20~50mL的乙二醇中,于40~60°C搅拌至透明澄清;然后将此溶液转移至聚四氟乙烯内衬的高压釜中190~205°C反应4~8h。用磁铁吸附分离并依次用纯水、乙醇清洗2~4次,最后减压干燥即得到氨基末端磁性纳米粒子。
    然后合成表面键合黄芩苷磁性纳米粒子:将黄芩苷和氨基末端磁性纳米粒子以1:2~1:5的质量比混悬于8~12mL75%的DMSO/磷酸缓冲液(10mM,pH5.5)中,再加入35mg1?(3?二甲基氨基丙基)?3?乙基碳二亚胺和N?羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐,震荡1~5h;用磁铁吸附分离得到的磁性纳米粒子并依次用75%的DMSO和水重新分散清洗2~3次,减压干燥即得表面键合黄芩苷磁性纳米粒子。
    本发明所述的使用黄芩苷修饰的磁性纳米粒子富集和萃取大豆及大豆制品中的大豆异黄酮类化合物由以下步骤组成:
    1)大豆及大豆制品原始溶液的获得:对于固态的大豆及大豆制品,粉碎,过5~9号标准药典筛(《中国药典》规定),取粉末适量,加入0~20%的甲醇/水或乙醇/水至0.001~0.1mg/mL,超声波辅助提取5~30min,即得;对于液态的大豆制品,直接使用该溶液即可。
    2)使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附大豆异黄酮成分:将10~500mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子分散于上述溶液中,充分混合,用力振摇1~10min,使大豆异黄酮类化合物充分吸附在表面键合黄芩苷磁性纳米粒子上。
    3)使用外磁场分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子:使用磁铁等外磁场将吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子聚集在一起,将溶液丢弃。
    4)将大豆异黄酮从键合黄芩苷磁性纳米粒子上洗脱下来:撤去外磁场,加入0.1~1mL洗脱溶剂,充分混合,用力振摇1~10min,使大豆异黄酮类化合物与表面键合黄芩苷磁性纳米粒子分离,而溶解于洗脱溶剂中。所述的洗脱溶剂为甲醇或乙醇或乙腈或乙酸乙酯或二甲亚砜或N,N?二甲基甲酰胺。
    5)使用磁铁等外磁场将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,然后将上述的洗脱溶液吸取出来,供仪器分析使用。
    经过上述制样过程,即将食品、保健品中的大豆异黄酮成分富集、萃取至洗脱液中。对洗脱液进行仪器分析,即可测定出食品、保健品中的大豆异黄酮含量。洗脱液的仪器分析方法可以使用薄层扫描法、紫外比色法、高效液相色谱法、气相色谱法等,含量计算方法可以采用内标法或外标法。均按照常规操作进行。
    本发明与现有技术相比具有的有益效果:
    1)对大豆异黄酮类化合物具有高度选择性。
    2)可利用外磁场方便快捷地进行操作。
    3)键合黄芩苷磁性纳米粒子可回收重复使用。
    4)制样方法非常简单、快速;尤其是对液态的食品、保健品,避免了长达一天的冷冻干燥过程,大大节约了时间与能源。
    5)制样过程仅需要极少量的有机试剂,绿色环保。尤其是在食品、保健品工业中,可使用乙醇作为溶剂,避免了有毒溶剂残留问题。
    附图说明
    图1为表面键合黄芩苷磁性纳米粒子结构示意图。
    图2为表面键合黄芩苷磁性纳米粒子的透射电镜图。
    图3为表面键合黄芩苷磁性纳米粒子用于食品、保健品中大豆异黄酮类化合物分离、富集、定量测定的过程示意图。
    图4六个大豆异黄苷(大豆苷元、染料木素、黄豆黄素、大豆苷、染料木苷、黄豆黄苷)和内标(毛蕊异黄酮)的结构图。
    图5六个大豆异黄苷(大豆苷元、染料木素、黄豆黄素、大豆苷、染料木苷、黄豆黄苷)和LCMS定量分析图。
    具体实施方式
    通过实例对本发明所公开的使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子富集和萃取大豆异黄酮类化合物并用于食品及保健品中该类化合物的定量分析作进一步说明。
    实施例1.表面键合黄芩苷磁性纳米粒子的制备
    首先合成氨基末端磁性纳米粒子:将6.5g1,6?己二胺、2g无水醋酸钠和1g的FeC3·6H2O溶解在30mL的乙二醇中,于50°C搅拌至透明澄清;然后将此溶液转移至聚四氟乙烯内衬的高压釜中198°C反应6h。用磁铁吸附分离并依次用纯水、乙醇清洗3次,最后减压干燥即得到氨基末端磁性纳米粒子。
    然后合成表面键合黄芩苷磁性纳米粒子:将黄芩苷和氨基末端磁性纳米粒子以1:3的质量比混悬于10mL75%的DMSO/磷酸缓冲液(10mM,pH5.5)中,再加入35mg1?(3?二甲基氨基丙基)?3?乙基碳二亚胺和N?羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐,震荡2h;用磁铁吸附分离得到的磁性纳米粒子并依次用75%的DMSO和水重新分散清洗3次,减压干燥即得表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,经过透射电镜分析粒径约150nm,黄芩苷键合量为5.3%。
    实施例2.使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子富集和萃取黄豆中大豆异黄酮类化合物并进行定量分析
    将大豆粉碎,过7号标准药典筛,取粉末25mg,加入10%的乙醇/水250mL,和内标毛蕊异黄酮10μg,超声波辅助提取10min;向提取液中加入100mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,分散,充分混合,用力振摇5min;使用磁铁分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,并将所剩溶液倾倒、丢弃;撤去外磁场,加入0.1mL甲醇,充分混合,用力振摇1min;最后再用磁铁将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,吸取出洗脱溶液供HPLC—ESI/MS使用。
    使用SUPELCOSILTM LC?18(150mm×2.1mm id5μm)作为分离色谱柱,流动相条件:(A)10%乙腈(含0.1%甲酸),(B)90%乙腈(含0.1%甲酸),B%在0–20.00min从10%梯度上升至45%,流速0.25mL/min。质谱条件为:喷雾电压3KV、喷雾温度300°C、透镜电压150V、毛细管电压35V、毛细管温度270°C、壳气和辅助气流速分布为35和10;化合物采用SRM检测:大豆苷元m/z255→199、染料木素m/z271→153、黄豆黄素m/z285→242、毛蕊异黄酮m/z285→242、大豆苷m/z417→255、染料木苷m/z433→271、黄豆黄苷m/z447→285?;毓榍叻直鹞?
    大豆苷元    Y=0.8505X+0.0366    r2=0.993
    染料木素    Y=1.0713X+0.0323    r2=0.995
    黄豆黄素    Y=0.6809X+0.0230    r2=0.993
    大豆苷      Y=5.0499X+0.0650    r2=0.998
    染料木苷    Y=5.1745X+0.0560    r2=0.994
    黄豆黄苷    Y=4.9001X+0.0183    r2=0.997
    进样20μL,通过以上回归曲线,计算得黄豆中各大豆异黄酮含量分别为:大豆苷元0.011%、染料木素0.023%、黄豆黄素0.0034%、大豆苷0.61%、染料木苷0.87%、黄豆黄苷0.34%。
    实施例3.使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子富集和萃取豆奶中大豆异黄酮类化合物并进行定量分析
    取中国产某品牌豆奶0.1mL,加入内标毛蕊异黄酮10μg,再加入100mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,分散,充分混合,用力振摇5min;使用磁铁分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,并将所剩溶液倾倒、丢弃;撤去外磁场,加入0.1mL甲醇,充分混合,用力振摇1min;最后再用磁铁将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,吸取出洗脱溶液供HPLC—ESI/MS使用。
    使用SUPELCOSILTM LC?18(150mm×2.1mm id5μm)作为分离色谱柱,流动相条件:(A)10%乙腈(含0.1%甲酸),(B)90%乙腈(含0.1%甲酸),B%在0–20.00min从10%梯度上升至45%,流速0.25mL/min。质谱条件为:喷雾电压3KV、喷雾温度300°C、透镜电压150V、毛细管电压35V、毛细管温度270°C、壳气和辅助气流速分布为35和10;化合物采用SRM检测:大豆苷元m/z255→199、染料木素m/z271→153、黄豆黄素m/z285→242、毛蕊异黄酮m/z285→242、大豆苷m/z417→255、染料木苷m/z433→271、黄豆黄苷m/z447→285?;毓榍叻直鹞?
    大豆苷元    Y=0.8505X+0.0366    r2=0.993
    染料木素    Y=1.0713X+0.0323    r2=0.995
    黄豆黄素    Y=0.6809X+0.0230    r2=0.993
    大豆苷      Y=5.0499X+0.0650    r2=0.998
    染料木苷    Y=5.1745X+0.0560    r2=0.994
    黄豆黄苷    Y=4.9001X+0.0183    r2=0.997
    进样20μL,通过以上回归曲线,计算得豆奶中各大豆异黄酮含量分别为:大豆苷元0.003mg/mL、染料木素0.007mg/mL、黄豆黄素0.001mg/mL、大豆苷0.061mg/mL、染料木苷0.075mg/mL黄豆黄苷0.054mg/mL。
    实施例4.使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子富集和萃取豆奶中大豆异黄酮类化合物并进行定量分析
    取美国产某品牌豆奶0.1mL,加入内标毛蕊异黄酮10μg,再加入100mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,分散,充分混合,用力振摇5min;使用磁铁分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,并将所剩溶液倾倒、丢弃;撤去外磁场,加入0.1mL甲醇,充分混合,用力振摇1min;最后再用磁铁将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,吸取出洗脱溶液供HPLC—ESI/MS使用。
    使用SUPELCOSILTM LC?18(150mm×2.1mm id5μm)作为分离色谱柱,流动相条件:(A)10%乙腈(含0.1%甲酸),(B)90%乙腈(含0.1%甲酸),B%在0–20.00min从10%梯度上升至45%,流速0.25mL/min。质谱条件为:喷雾电压3KV、喷雾温度300°C、透镜电压150V、毛细管电压35V、毛细管温度270°C、壳气和辅助气流速分布为35和10;化合物采用SRM检测:大豆苷元m/z255→199、染料木素m/z271→153、黄豆黄素m/z285→242、毛蕊异黄酮m/z285→242、大豆苷m/z417→255、染料木苷m/z433→271、黄豆黄苷m/z447→285?;毓榍叻直鹞?
    大豆苷元    Y=0.8505X+0.0366    r2=0.993
    染料木素    Y=1.0713X+0.0323    r2=0.995
    黄豆黄素    Y=0.6809X+0.0230    r2=0.993
    大豆苷      Y=5.0499X+0.0650    r2=0.998
    染料木苷    Y=5.1745X+0.0560    r2=0.994
    黄豆黄苷    Y=4.9001X+0.0183    r2=0.997
    进样20μL,通过以上回归曲线,计算得豆奶中各大豆异黄酮含量分别为:大豆苷元0.002mg/mL、染料木素0.009mg/mL、黄豆黄素0.001mg/mL、大豆苷0.045mg/mL、染料木苷0.082mg/mL黄豆黄苷0.014mg/mL。
    实施例5.使用表面键合黄芩苷磁性纳米粒子富集和萃取保健品中大豆异黄酮类化合物并进行定量分析
    取某含有大豆异黄酮的口服液0.1mL,加入内标毛蕊异黄酮10μg,再加入100mg表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,分散,充分混合,用力振摇5min;使用磁铁分离吸附有大豆异黄酮类化合物的表面键合黄芩苷磁性纳米粒子,并将所剩溶液倾倒、丢弃;撤去外磁场,加入0.1mL甲醇,充分混合,用力振摇1min;最后再用磁铁将表面键合黄芩苷磁性纳米粒子吸附在一起,吸取出洗脱溶液供HPLC—ESI/MS使用。
    使用SUPELCOSILTM LC?18(150mm×2.1mm id5μm)作为分离色谱柱,流动相条件:(A)10%乙腈(含0.1%甲酸),(B)90%乙腈(含0.1%甲酸),B%在0–20.00min从10%梯度上升至45%,流速0.25mL/min。质谱条件为:喷雾电压3KV、喷雾温度300°C、透镜电压150V、毛细管电压35V、毛细管温度270°C、壳气和辅助气流速分布为35和10;化合物采用SRM检测:大豆苷元m/z255→199、染料木素m/z271→153、黄豆黄素m/z285→242、毛蕊异黄酮m/z285→242、大豆苷m/z417→255、染料木苷m/z433→271、黄豆黄苷m/z447→285?;毓榍叻直鹞?
    大豆苷元    Y=0.8505X+0.0366    r2=0.993
    染料木素    Y=1.0713X+0.0323    r2=0.995
    黄豆黄素    Y=0.6809X+0.0230    r2=0.993
    大豆苷      Y=5.0499X+0.0650    r2=0.998
    染料木苷    Y=5.1745X+0.0560    r2=0.994
    黄豆黄苷    Y=4.9001X+0.0183    r2=0.997
    进样20μL,通过以上回归曲线,计算得口服液中各大豆异黄酮含量分别为:大豆苷元0.009mg/mL、染料木素0.011mg/mL、黄豆黄素0.002mg/mL、大豆苷0.048mg/mL、染料木苷0.091mg/mL黄豆黄苷0.037mg/mL。

    关 键 词:
    一种 大豆 及其 制品 异黄酮 分析 方法
      专利查询网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
    关于本文
    本文标题:一种大豆及其制品中异黄酮的分析方法.pdf
    链接地址://www.4mum.com.cn/p-5778507.html
    关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服客服 - 联系我们

    [email protected] 2017-2018 www.4mum.com.cn网站版权所有
    经营许可证编号:粤ICP备17046363号-1 
     


    收起
    展开
  • 四川郎酒股份有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度环保奖 2019-05-13
  • 银保监会新规剑指大企业多头融资和过度融资 2019-05-12
  • 韩国再提4国联合申办世界杯 中国网友无视:我们自己来 2019-05-11
  • 中国人为什么一定要买房? 2019-05-11
  • 十九大精神进校园:风正扬帆当有为 勇做时代弄潮儿 2019-05-10
  • 粽叶飘香幸福邻里——廊坊市举办“我们的节日·端午”主题活动 2019-05-09
  • 太原设禁鸣路段 设备在测试中 2019-05-09
  • 拜耳医药保健有限公司获第十二届人民企业社会责任奖年度企业奖 2019-05-08
  • “港独”没出路!“梁天琦们”该醒醒了 2019-05-07
  • 陈卫平:中国文化内涵包含三方面 文化复兴表现在其中 2019-05-06
  • 人民日报客户端辟谣:“合成军装照”产品请放心使用 2019-05-05
  • 【十九大·理论新视野】为什么要“建设现代化经济体系”?   2019-05-04
  • 聚焦2017年乌鲁木齐市老城区改造提升工程 2019-05-04
  • 【专家谈】上合组织——构建区域命运共同体的有力实践者 2019-05-03
  • 【华商侃车NO.192】 亲!楼市火爆,别忘了买车位啊! 2019-05-03