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    重庆时时彩世纪星: 一种血细胞分析仪溶血剂.pdf

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    一种 血细胞 分析 溶血
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    摘要
    申请专利号:

    CN201310242975.0

    申请日:

    2013.06.18

    公开号:

    CN103323581A

    公开日:

    2013.09.25

    当前法律状态:

    撤回

    有效性:

    无权

    法律详情: 发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):G01N 33/48申请公布日:20130925|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/48申请日:20130618|||公开
    IPC分类号: G01N33/48 主分类号: G01N33/48
    申请人: 南京普朗医疗设备有限公司
    发明人: 尹小东; 管中来
    地址: 211102 江苏省南京市江宁经济技术开发区清水亭东路989号
    优先权:
    专利代理机构: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 柏尚春
    PDF完整版下载: PDF下载
    法律状态
    申请(专利)号:

    CN201310242975.0

    授权公告号:

    ||||||

    法律状态公告日:

    2014.12.03|||2013.10.30|||2013.09.25

    法律状态类型:

    发明专利申请公布后的视为撤回|||实质审查的生效|||公开

    摘要

    本发明公开了一种血细胞分析仪溶血剂,在1L溶血剂中:季铵盐5~40.0g,碱金属氯化物5.0~25.0g,乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸衍生物0.05~5.0g,无机酸0.5~5.0ml,pH调节剂0.5~8.0g调pH在5.0~8.0,余量为水。本发明着重解决了南京普朗医用设备有限公司生产的XFA6000系列和XFA6000Intelligent系列全自动血液细胞分析仪白细胞直方图淋巴细胞、单核细胞、粒细胞三个峰形不明显或只能出现淋巴细胞和粒细胞两个波峰的问题,和因此导致的白细胞三分类不够准确等一系列问题,并且试剂中不含防腐剂、不含氰化物,对环境无污染。

    权利要求书

    权利要求书
    1.   一种血细胞分析仪溶血剂,其特征在于,在1L溶血剂中: 
    。

    2.   根据权利要求1所述的溶血剂,其特征在于,所述季铵盐为十烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基氯化铵、十烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十八烷基三甲基溴化铵中的一种或几种。 

    3.   根据权利要求1所述的溶血剂,其特征在于,所述碱金属氯化物为氯化钠和氯化钾。 

    4.   根据权利要求1所述的溶血剂,其特征在于,所述乙二胺四乙酸衍生物为乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸二钾。 

    5.   根据权利要求1所述的溶血剂,其特征在于,所述无机酸为蚁酸、醋酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、苯甲酸或马来酸中的一种或几种。 

    6.   根据权利要求1所述的溶血剂,其特征在于,所述pH调节剂为盐酸、硫酸、磷酸、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种。 

    说明书

    说明书一种血细胞分析仪溶血剂
    技术领域
    本发明属于医疗诊断仪器用试剂领域,具体涉及一种血细胞分析仪溶血剂。
    背景技术
    稀释液和溶血剂是医学检验中血液分析仪最常用的试剂,是测定血红蛋白(HGB)和白细胞(WBC)计数或分类的关键试剂。溶血剂在稀释液的配合作用下,一方面使红细胞(RBC)迅速溶解,释放出血红蛋白与溶血剂结合形成稳定的血红蛋白衍生物,以提供量测定HGB;另一方面白细胞维持原有形态,并保持一定的体积,供WBC计数用,并且根据白细胞的大小来对白细胞进行三分群:淋巴细胞(LYM)、单核细胞(Mo)、粒细胞(GRA)。
    通常,血细胞分析是用稀释液稀释血样,然后分析一部分已稀释血样从而测出红细胞和血小板参数,再将溶血剂加入其余已稀释的血样中,出去红细胞和血小板,以便进行血红蛋白含量测定、白细胞计数和分类的测定。
    由于红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白浓度对化学试剂的敏感性,难于找到一种既发生降解也不会不合需要地改变需分析的细胞特性和血红蛋白参数的化学试剂的组合,特别是在改变操作温度的条件下。细胞的物理参数会受到稀释液成分和分析方法的影响,无论是自动、半自动还是手工操作,现有的稀释液都规定了必须用专门的实验方法或使用专有的仪器,因此,现有的稀释液是不能通用或用于多种实验仪器或实验方法。
    美国专利4255385报道了用于测定血样中血红蛋白的方法和试剂,该文献公开了一种用于溶解和稀释全血样品以便进行细胞分析的试剂,但这种试剂含有用于测定血红蛋白的铁氰化钾。
    美国专利5227304报道了一种复杂的在Cell Dyn牌血液分析仪上进行血细胞计数和大小分类时用的试剂系统。该试剂系统包括一种等渗的稀释剂和去垢剂,其中稀释剂由咪唑有机缓冲液、抗菌剂、无机盐和pH调节剂组成,但其不适用于其他机型。
    中国专利1247982报道了用于血样中血红蛋白的测量和白细胞的测定的试剂,公开了用于测定白细胞分群的溶血剂,但这种溶血剂在使用后得到的白细胞直方图中(见图1),单核细胞(Mo)的波峰不够明显,容易造成仪器软件识别的误差。
    发明内容
    发明目的:针对现有技术中的问题,本发明的目的是提供一种血细胞分析仪溶血剂。
    技术方案:为了解决上述技术问题,本发明提供了一种血细胞分析仪溶血剂,在1L溶血剂中:

    所述季铵盐为十烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基氯化铵、十烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十八烷基三甲基溴化铵中的一种或几种。
    所述碱金属氯化物为氯化钠和氯化钾。
    所述乙二胺四乙酸衍生物为乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸二钾。
    所述无机酸为蚁酸、醋酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、苯甲酸或马来酸中的一种或几种。
    所述pH调节剂为盐酸、硫酸、磷酸、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种。
    与本发明配对使用的稀释液中各物质组分如下:
    一种血细胞分析仪稀释液,在1L稀释液中:

    所述碱金属氯化物为氯化钠或氯化钾,能提供一定渗透压。
    所述乙二胺四乙酸衍生物为乙二胺四乙酸二钠或乙二胺四乙酸二钾。
    所述吡啶鎓盐为吡啶鎓铜或吡啶鎓钠。
    所述pH缓冲剂磷酸盐缓冲液、Tris–盐酸缓冲液或硼酸–硼砂缓冲液中的一种。
    有益效果:本发明着重解决了南京普朗医用设备有限公司生产的XFA6000系列和XFA6000Intelligent系列全自动血液细胞分析仪白细胞直方图,淋巴细胞、单核细胞、粒细胞三个峰形不明显或只能出现淋巴细胞和粒细胞两个波峰的问题,和因此导致的白细胞三分类不够准确等一系列问题,本发明淋巴细胞、单核细胞、粒细胞三个峰形明显,并且试剂中不含防腐剂、不含氰化物,对环境无污染。
    附图说明
    图1为中国专利1247982白细胞直方图。
    图2为本发明在南京普朗医用设备有限公司生产的XFA6000系列上进行血液细胞分析的白细胞直方图。横坐标代表体积单位(FL),纵坐标代表细胞个数。
    图3为本发明在南京普朗医用设备有限公司生产的XFA6000Intelligent系列全自动血液细胞分析仪上进行血液细胞分析的白细胞直方图。横坐标代表体积单位(FL),纵坐标代表细胞个数。
    具体实施方式
    下面结合附图对本发明作更进一步的说明。
    实施例1
    稀释液:
    氯化钠8.12g/L,磷酸氢二钠11.2g/L,磷酸二氢钠1.9g/L,乙二胺四乙酸二钾0.5g/L,吡啶鎓铜0.5g/L,其余为水,pH值7.5。
    溶血剂:
    十烷基三甲基氯化铵25.8g/L,十四烷基三甲基溴化铵1.7g/L,氯化钠9.2g/L,1M盐酸0.5ml/L,乙二胺四乙酸二钠2.0g/L,氢氧化钠1.2g/L其余为水,pH值6.0。
    实施例2:
    稀释剂:
    氯化钾12.44g/L,硼酸3.2g/L,硼砂1.4g/L,乙二胺四乙酸二钠1.5g/L,吡啶鎓钠0.4g/L,其余为水,pH值7.4。
    溶血剂:
    十二烷基三甲基氯化铵22.4g/L,十六烷基三甲基溴化铵2.2g/L,氯化钠8.6g/L,蚁酸1.0ml/L,乙二胺四乙酸二钠1.5g/L,氢氧化钠1.2g/L其余为水,pH值5.6。
    实施例3
    稀释剂:
    氯化钾5g/L,磷酸氢二钠5.04g/L,磷酸二氢钠38g/L,乙二胺四乙酸二钠0.05g/L,吡啶鎓钠0.01g/L,其余为水,pH值6.0。
    溶血剂:
    十四烷基三甲基氯化铵38.0g/L,十八烷基三甲基溴化铵2.0g/L,氯化钠25g/L,蚁酸5.0ml/L,乙二胺四乙酸二钠5g/L,氢氧化钠8g/L其余为水,pH值8.0。
    实施例4
    氯化钠25g/L,磷酸氢二钠11.2g/L,磷酸二氢钠1.9g/L,乙二胺四乙酸二钾5.0g/L,吡啶鎓铜3.2g/L,其余为水,pH值7.5。
    溶血剂:
    十六烷基三甲基氯化铵2.8g/L,十四烷基三甲基溴化铵2.2g/L,氯化钠5.0g/L,1M盐酸2.5ml/L,乙二胺四乙酸二钠5.0g/L,氢氧化钠0.5g/L其余为水,pH值6.0。
    实施例5
    在南京普朗医用设备有限公司生产的XFA6000系列和XFA6000Intelligent系列全自动血液细胞分析仪上使用本发明实施例1~4进行白细胞分析测定实验,分为两种模式,实验结果分别如图2和图3。
    a)在全血模式下,13μL的全血和3.5mL的稀释液混合,形成1:270的稀释后样品。
    将1:270的稀释后样品分成两部分。
    取15.6μL的1:270的稀释后样品和3.9mL的稀释液混合,形成1:45000的样品,用于红细胞和血小板的计数测量。
    白细胞(WBC)池将剩下的稀释样品和0.5mL的溶血剂再加1mL稀释液混合,形成1:385的样品,用于白细胞的计数测量。
    b)在预稀释模式下,取20μL的抗凝血和1.6mL的稀释液混合(机外稀释),形成1:81的稀释后样品。
    将1:81的稀释后样品吸入0.7ml,加入WBC计数池。向WBC计数池加入1.1mL稀释液,形成1:263的稀释后样品。
    将1:263的稀释后样品分成两部分。
    取15.2μL的1:263的稀释后样品和3.9mL的稀释液混合,形成1:45000的样品,用于红细胞和血小板的计数测量。
    剩下的1:263稀释后样品和0.5mL的溶血剂混合再加入0.5mL稀释液,形成1:378的样品,用于白细胞的计数测量。
    当第二次稀释完成后,在计数前,将溶血剂加到WBC稀释样本中以溶解红细胞膜,通常红细胞比白细胞多1000倍,计量白细胞必须首先消除红细胞对它的干扰,红细胞通常无细胞核,溶血剂能起到消除白细胞稀释液中的红细胞的作用。
    以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出:对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的?;し段?。

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